一种模块化γδ TCR-T平台，结合KRAS pMHC靶向功能与可重复使用的mRNA引导重定向技术

《Journal of Hematology & Oncology》：A modular γδ TCR-T platform combining KRAS pMHC targeting with re-dosable mRNA engager redirection

　　

摘要

当抗原表达发生变化或限制性的人类白细胞抗原（HLA）等位基因丢失时，实体瘤常常能够逃避免疫系统中经TCR工程改造的αβ T细胞。相比之下，γδ T细胞可通过非肽类/主要组织相容性复合体（MHC）信号，如磷酸化抗原和应激配体，来识别细胞功能异常，因此可被开发为异体疗法。尽管肿瘤内的γδ T细胞特征与多种癌症患者的更好预后相关，但γδ T细胞的识别范围较广，其受体同样在胸腺中经过选择。不过，γδ T细胞的特异性并非依赖于特定的驱动突变pMHC表位。因此，我们探讨了是否有一种高亲和力、无需共受体的αβ TCR，能够在保留内源性γδ TCR功能的同时，将致癌驱动因子的特异性转移到γδ T细胞上。我们将KRASG12V/HLA-A*11:01 TCR A11v基因导入初级人类γδ T细胞中。这些工程化细胞同时表达转基因αβ TCR和内源性γδ TCR，能够在体外和体内杀死KRASG12V/HLA-A*11:01⁺肿瘤细胞。为应对可能因HLA-A*11:01丢失而产生的耐药性，我们使用了编码分泌型间皮素×CD3（M5）双特异性T细胞衔接分子的mRNA脂质纳米颗粒（LNP）。LNP-M5可产生循环中的TCE，引导γδ A11v T细胞及多克隆旁观者T细胞去攻击间皮素⁺靶标，同时还能增加体内γδ A11v T细胞的数量。在携带混合HLA-A*11:01⁺和HLA-A*11:01???KRASG12V肿瘤的人源化小鼠中，仅使用γδ A11v T细胞只能实现暂时性控制，而加入LNP-M5后则能获得完全缓解并延长生存期。由此可见，这种两步式疗法结合了恒定的驱动因子靶向与可调控的定向作用，同时解决了TCR疗法面临的限制性HLA等位基因丢失问题。它提供了一种现成的试剂，便于基于KRAS的疗法应用，并且还能再次递送该试剂。