《International Journal of Molecular Sciences》：Critical Illness-Related Alterations in Plasma Phosphatidylcholine Species Reveal Selective Induction of PC 32:0
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循环脂蛋白浓度在关键疾病中降低，提示血浆磷脂酰胆碱（PC）水平也可能下降。然而，已发表的关键疾病中单个PC种类的数据相互矛盾，且潜在的肝硬化可能显著影响全身脂质谱。因此，研究人员检查了系统性炎症反应综合征（SIRS）/脓毒症（伴有或不伴有肝硬化）对循环PC种类
循环脂蛋白浓度在关键疾病中降低，提示血浆磷脂酰胆碱（PC）水平也可能下降。然而，已发表的关键疾病中单个PC种类的数据相互矛盾，且潜在的肝硬化可能显著影响全身脂质谱。因此，研究人员检查了系统性炎症反应综合征（SIRS）/脓毒症（伴有或不伴有肝硬化）对循环PC种类的影响。研究人员在160例SIRS、脓毒症或脓毒性休克患者（包括31例肝硬化患者）中定量了21种血浆PC种类。将PC谱与健康对照者以及临床相关亚组进行了比较。在没有肝硬化的SIRS/脓毒症患者中，与健康对照者相比，15种PC种类减少，而PC 32:0增加。在伴有肝硬化的SIRS/脓毒症患者中，12种PC种类低于无肝硬化的脓毒症患者，而PC 32:0再次增加。由于循环PC的一部分来源于磷脂酰乙醇胺（PE），研究人员探讨了PE向PC转化的改变是否可解释这些变化；然而，观察到的模式不支持这一机制。在存活者和非存活者之间未观察到PC种类的显著差异。总之，关键疾病与循环PC种类的广泛减少相关，且这种减少因合并肝硬化而加重。相反，PC 32:0在SIRS/脓毒症以及SIRS/脓毒症伴肝硬化中均持续增加，提示其具有独特的生物学作用，值得进一步研究。
脓毒症（sepsis）是重症监护医学中的主要挑战，其高死亡率及长期后遗症凸显了脂质代谢和脂质介质在免疫调控中的关键作用。磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine, PC）作为细胞膜中含量最丰富的甘油磷脂，其脂肪酸链的长度和饱和度决定了膜流动性、曲率和信号转导效率。已有研究显示，脓毒症患者血浆PC谱发生显著改变，但不同PC种类的变化方向存在矛盾，且肝硬化作为影响脂质代谢的重要合并症，在既往研究中往往被忽视。肝硬化患者本身存在多种脂质水平降低，并增加感染风险和死亡率，但PC种类在肝硬化合并脓毒症中的变化规律尚不清楚。因此，研究人员旨在明确关键疾病（包括系统性炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS）/脓毒症）中血浆PC种类的重塑特征，并评估潜在肝硬化对上述变化的修饰效应。
研究人员在德国大学医院医学ICU中招募了160例SIRS、脓毒症或脓毒性休克患者（其中31例合并肝硬化），在入院后12–24小时采集血浆样本，同时纳入23例健康对照者。通过流动注射分析-傅里叶变换质谱（flow injection analysis–Fourier transform mass spectrometry, FIA-FTMS）定量了21种PC种类及部分磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine, PE）种类，并比较了不同临床亚组及肝硬化状态下的差异。研究结论表明，SIRS/脓毒症伴随循环PC种类的广泛减少，尤其是多不饱和PC种类，而PC 32:0则选择性增加；肝硬化进一步加重了PC种类的减少，但PC 32:0仍保持升高。这一发现揭示了PC 32:0作为关键疾病中PC重塑的独特特征，具有潜在的生物学意义，值得进一步机制研究。该论文发表在《International Journal of Molecular Sciences》。
主要关键的技术方法：研究样本来源于德国雷根斯堡大学医院ICU的160例患者及23例健康对照者。血浆PC种类采用流动注射分析-傅里叶变换质谱（FIA-FTMS）进行定量，使用混合四极杆-轨道阱仪器（Thermo Fisher Scientific），在负离子模式下检测甲酸加合物[M+HCOO]
?，m/z范围520–960。内标包括PC 14:0/14:0和PC 22:0/22:0，根据Bligh和Dyer方法提取脂质。PE种类分析采用近期报道的方法。统计分析使用Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis检验、Spearman相关性及多元线性回归，p值经Bonferroni校正。
**2.1 对照与SIRS/脓毒症患者的磷脂酰胆碱种类**
通过比较健康对照者与160例SIRS/脓毒症患者（包括脓毒性休克）的血浆PC种类，发现PC 32:2、34:2、34:3、36:2、36:3、36:4、36:5、38:3、38:4、38:5、38:6、38:7、40:4、40:5、40:7及总PC水平降低，而PC 32:0水平升高。
**2.2 合并肝硬化的SIRS/脓毒症患者的磷脂酰胆碱种类**
在SIRS/脓毒症合并肝硬化患者中，与无肝硬化患者相比，PC 34:1、34:2、34:3、36:4、36:5、38:3、38:4、38:5、38:6、40:5、40:6、40:7及总PC水平降低，PC 32:0再次升高。总PE水平在肝硬化中也降低，但血浆PC/PE比值无变化。PC 32:0的受试者工作特征曲线下面积（AUROC）为0.677，以21.1 nmol/mL为界值预测肝硬化的灵敏度和特异度分别为68%和69%。
**2.3 排除肝硬化患者的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺种类**
排除肝硬化患者后，SIRS/脓毒症患者与健康对照者比较，PC 32:2、34:2、34:3、36:2、36:3、36:4、36:5、38:3、38:4、38:5、38:6、38:7、40:4、40:5、40:7及总PC水平降低，PC 32:0升高。多元线性回归显示性别和年龄无法预测PC 32:0等多数PC种类，但年龄显著预测PC 30:0、32:2、36:1、36:2、36:3、38:3、38:7及40:4。年龄匹配分析证实PC 32:0在患者中仍显著升高，十种PC种类仍显著降低。性别分层分析显示，女性患者中PC 32:2、34:3、36:2、36:3、36:5、38:3、38:5、38:7、40:4、40:7降低，男性患者中PC 32:2、36:3、38:3、38:5、38:7、40:4降低，PC 32:0在性别分层中未达显著差异。
**2.4 SIRS/脓毒症患者的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺种类**
检测PE种类发现，PC 32:1和PC 34:1在SIRS/脓毒症中未改变，但PE 32:1和PE 34:1显著升高；PC 34:2和PC 38:6降低，而PE 34:2和PE 38:6升高。总PC水平降低，总PE水平不变。SIRS、脓毒症和脓毒性休克三组间PC种类水平无显著差异，PC/PE比值均降低。按双键数分类，多不饱和PC（≥2个双键）显著降低，饱和和单不饱和PC不变；PE中1个或6个双键的种类升高。
**2.5 相关性和多元线性回归分析**
在无肝硬化SIRS/脓毒症患者中，PC种类与BMI、白细胞计数等无显著相关，但PC 30:0、32:0、32:1、32:2、38:7与降钙素原正相关，PC 34:1、34:2与C反应蛋白正相关。短链PC（C30-C32）与转氨酶、胆红素、γ-谷氨酰转移酶（GGT）相关。多元线性回归显示，在全体患者中PC 32:0由胆红素、胆固醇、白蛋白、GGT预测，而非性别、肝硬化等；排除肝硬化后，PC 32:0由胆红素、AST、ALT、GGT预测。
**2.6 合并胆管炎或SARS-CoV-2感染的SIRS/脓毒症患者的磷脂酰胆碱种类**
合并胆管炎（9例）的患者PC 32:0和PC 32:2水平高于无胆管炎患者；合并COVID-19（22例）的患者PC 32:0水平低于非COVID-19患者，其他PC种类无差异。胆红素和GGT水平在各组间无显著差异，排除这些因素对PC种类改变的影响。
**2.7 磷脂酰胆碱种类与干预措施及生存的关系**
透析、机械通气和血管升压药治疗未改变PC种类水平或PC/PE比值。存活者与25例非存活者之间PC种类、PE种类及PC/PE比值无显著差异。
讨论部分总结：研究数据表明，脓毒症的特征是循环PC种类广泛减少，肝硬化加重这种减少，而PC 32:0在两种情况下均选择性增加。在SIRS/脓毒症中，PC减少通常不伴随PE降低，但合并肝硬化时PC和PE平行下降。PC种类水平在SIRS/脓毒症患者中未提供诊断或预后价值。与既往研究比较，多数研究支持不饱和PC在脓毒症中降低，但PC 32:0的升高在既往脓毒症研究中未被报道。PC 32:0与胆红素正相关，提示胆汁淤积或肝胆功能障碍可能参与其升高。PC 32:0与胆固醇无相关性，但其升高仍与胆固醇稳态紊乱相关。多元线性回归提示，除胆固醇外，SIRS/脓毒症中PC水平改变的因素尚不清楚。年龄和性别匹配分析证实了主要发现，但性别分层分析因样本量较小而统计效力有限。PC 32:0在脓毒症中选择性升高的机制尚不明确，可能涉及棕榈酸酯的可用性增加，但需进一步研究。血浆PC/PE比值在SIRS/脓毒症中降低，主要由于PC降低而PE不变，该比值与炎症标志物或肝病指标无关，可能反映全身脂质重塑的独特方面。研究局限性包括单中心设计、非空腹采样、单次血样、健康对照组较小且年龄性别不匹配，以及未纳入无脓毒症的肝硬化患者。
研究结论部分翻译：总之，SIRS/脓毒症的特征是循环PC种类广泛减少，尤其是不饱和PC，且这种模式因潜在肝硬化而进一步加重。相反，PC 32:0在SIRS/脓毒症以及SIRS/脓毒症伴肝硬化中均持续增加，将其确定为关键疾病中PC重塑的一个独特特征。这些发现表明，单个PC种类受到差异调节而非均匀减少，并突出PC 32:0作为进一步机制研究的候选分子。
