保加利亚动物源性食品中肠炎沙门氏菌血清型的时间动态，2007-2023

《Journal of Food Protection》：Temporal Dynamics of Salmonella enterica Serovars in Foods of Animal Origin in Bulgaria, 2007-2023

　　

沙门氏菌（Salmonella）仍然是一种主要的食源性人兽共患病危害，然而关于东南欧动物源性食品中血清型分布的长期数据有限。研究人员描述了2007年至2023年保加利亚动物源性食品中分离的肠炎沙门氏菌（Salmonella enterica）血清型的时间动态和食品类别分布。公共和私人实验室提交给国家参考实验室（National Reference Laboratory, NRL）的共1,906株确诊沙门氏菌分离株，通过经典生化鉴定和根据White-Kauffmann-Le Minor方案进行血清分型分析。沙门氏菌最常从禽肉（39.8%）、禽副产品（13.1%）、肉制品（16.9%）、碎肉（11.7%）和猪肉（6.9%）中分离到。时间血清型组成存在显著差异（蒙特卡罗χ² = 763.0，P < 0.0001；克莱姆V（Cramer's V） = 0.258）。二项广义线性模型（Binomial generalized linear model）显示，婴儿沙门氏菌（S. Infantis）显著逐年增加（OR/年 = 1.095，95% CI 1.056-1.136；FDR q < 0.001），鼠伤寒沙门氏菌（S. Typhimurium）显著减少（OR/年 = 0.929，95% CI 0.873-0.989；q = 0.030），而肠炎沙门氏菌（S. Enteritidis）无显著线性趋势。食品类别与主要血清型之间强相关（蒙特卡罗χ² = 827.0，P < 0.0001；克莱姆V = 0.339）。S. Infantis、S. Enteritidis和科特布斯沙门氏菌（S. Kottbus）集中在禽源产品中，而S. Typhimurium、其单相变种（monophasic variant）和德比沙门氏菌（S. Derby）与猪肉、碎肉和肉制品相关。这些发现支持在禽类和猪肉产业链中持续进行血清型水平监测和有针对性的控制措施。

沙门氏菌（Salmonella）是全球最重要的食源性人兽共患病病原体之一，动物源性食品（如肉、蛋及其制品）是其主要传播载体。在欧盟，沙门氏菌病在2022年位列第二常见食源性胃肠道感染，报告病例达65,208例。血清型分布并非静态，而是随地理、动物宿主、生产系统、贸易模式和时间动态变化。近年来，婴儿沙门氏菌（S. Infantis）在肉鸡生产中日益突出，并与多重耐药性密切相关；而鼠伤寒沙门氏菌（S. Typhimurium）及其单相变种（1,4,[5],12:i:-）在猪和猪肉产品中仍具重要公共卫生意义。保加利亚于2007年加入欧盟，随后实施全面食品安全法规，但东南欧地区关于动物源性食品中沙门氏菌血清型长期分布的数据极为有限。为此，研究人员（Gergana Mateva、Aleksandra Daskalova、Hristo Daskalov）开展了一项覆盖17年（2007-2023）的全国性监测研究，旨在描述保加利亚动物源性食品中肠炎沙门氏菌（Salmonella enterica）血清型的长期时间动态和食品类别分布，并识别主要血清型对应的关键食品类别。该研究为血清型水平监测提供了国家基线，支持禽类和猪肉产业链中有针对性的控制措施。论文发表在《Journal of Food Protection》。

研究人员采用的关键技术方法包括：样本来源为保加利亚全国食品加工企业和零售市场，通过官方控制或监测项目收集，由公共和私人实验室提交至国家参考实验室（NRL）。共1,906株确诊沙门氏菌分离株纳入分析。检测与分离依据ISO 6579:2002及后续替代标准ISO 6579-1:2017，采用缓冲蛋白胨水预增菌、选择性增菌（Rappaport-Vassiliadis大豆肉汤和Muller-Kauffmann四硫磺酸钠-新生霉素肉汤），以及选择性平板（木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂和Rambach琼脂）分离。血清分型采用玻片凝集法，使用商业O和H抗血清，按White-Kauffmann-Le Minor方案进行。生化鉴定辅以API 20E测试条。数据分析运用二项广义线性模型（Binomial generalized linear model）、蒙特卡罗卡方检验（Monte Carlo χ²）、Fisher精确检验及Benjamini-Hochberg假发现率（FDR）校正，计算比值比（OR）和95%置信区间（CI）。

研究结果如下：

**Distribution by food category（按食品类别的分布）**
通过计数和百分比分析，发现禽肉是主要来源，占39.8%（758/1,906），其次为禽副产品（13.1%）、肉制品（16.9%）、碎肉（11.7%）和猪肉（6.9%）。禽类相关矩阵（禽肉、禽副产品、鸡蛋）合计占52.9%，表明禽类产品是保加利亚食品来源沙门氏菌的主要载体。

**Temporal dynamics of serovar dominance（血清型优势的时间动态）**
通过二项广义线性模型分析，发现S. Infantis呈现显著逐年增加（OR/年=1.095，95% CI 1.056-1.136，FDR q<0.001），其整体占比达40.1%，在2019-2023年期间升至55.8%。S. Typhimurium显著下降（OR/年=0.929，95% CI 0.873-0.989，q=0.030），从2007-2018年的19.9%降至2019-2023年的6.1%。S. Enteritidis无显著线性趋势（OR/年=0.988，q=0.632），保持相对稳定（约9.0%）。单相S. Typhimurium（1,4,[5],12:i:-）在2019年首次检测到，占2019-2023年分离株的3.1%，呈显著增加（OR/年=1.333，q<0.001）。S. Kottbus也呈正线性趋势（OR/年=1.198，q=0.011），但敏感性分析（排除2023年）后无显著趋势，表明该结果主要由2023年数据驱动。

**Association between serovars and food categories（血清型与食品类别之间的关联）**
通过蒙特卡罗卡方检验（χ²=827.0，P<0.0001；Cramer's V=0.339）和FDR校正后残差分析，发现主要血清型与特定食品类别强相关。S. Infantis、S. Enteritidis和S. Kottbus与禽源产品（禽肉、禽副产品、鸡蛋）显著相关（OR分别为9.30、1.63、3.44，q均<0.05）。S. Typhimurium、单相S. Typhimurium和S. Derby与猪肉/混合肉矩阵（猪肉、猪牛副产品、碎肉、肉制品、熟烟熏香肠）显著相关（OR分别为16.61、无限大（因所有15株单相S. Typhimurium均出现在该矩阵）、8.42，q均<0.05）。S. Enteritidis在鸡蛋中也有显著富集（调整后残差=7.48，q<0.001）。

讨论部分总结指出，禽肉和猪肉是保加利亚食品来源沙门氏菌的主要载体，与全球证据一致。S