连续θ爆发刺激延迟左旋多巴诱导的异动症进展并改善口舌异动症，伴随纹状体FosB/ΔFosB和神经炎症的减少

《Brain Research Bulletin》：Continuous theta burst stimulation delays L-DOPA-induced dyskinesia progression and ameliorates orolingual dyskinesia with concomitant reduction of striatal FosB/ΔFosB and neuroinflammation

　　

背景：L-3,4-二羟基苯丙氨酸（L-DOPA）是帕金森病（PD）的金标准药物，但不可避免地导致左旋多巴诱导的异动症（LID）。连续θ爆发刺激（cTBS）是一种有前景的治疗LID的非侵入性脑调控技术。然而，从L-DOPA给药开始，长期同时应用cTBS对延迟LID进展的效果及其潜在机制仍不清楚。方法：研究人员通过单侧向前脑内侧束（MFB）注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）建立偏侧帕金森病大鼠模型。然后将大鼠随机分为四组：PD组、LID组、LID+假cTBS组和LID+真cTBS组。后三组连续三周每天接受L-DOPA（6 mg/kg，s.c.）联合苄丝肼（12 mg/kg，s.c.）注射，而PD组接受生理盐水。LID+真cTBS组在L-DOPA注射后立即接受同时进行的cTBS（600个脉冲，50 Hz burst at 5 Hz，80%静息运动阈值）治疗，持续三周。每周使用异常不自主运动（AIMs）评分评估LID的严重程度。干预后，研究人员进行免疫组织化学和酶联免疫吸附测定（ELISA）以检测背外侧纹状体中FosB/ΔFosB阳性细胞数、小胶质细胞标志物和促炎细胞因子的水平。结果：电磁仿真证实背外侧纹状体位于cTBS诱导的有效电场范围内。与LID组相比，LID+真cTBS组在第2周和第3周的总、轴、肢和口舌AIMs评分显著降低，且随时间无显著进展，口舌评分甚至下降。cTBS显著减少了背外侧纹状体中FosB/ΔFosB阳性细胞数、CD68⁺/Iba1⁺小胶质细胞的比例以及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的水平。相关性分析显示这些分子标志物与LID严重程度呈正相关。结论：长期同时应用的cTBS可延迟LID进展并改善口舌异动症，这与纹状体FosB/ΔFosB积累减少和小胶质细胞相关神经炎症减轻有关。研究人员的这项研究为PD的L-DOPA治疗提供了一种新的非药物辅助策略。

**论文解读：连续θ爆发刺激延缓左旋多巴诱导异动症进展的机制研究**

**1. 研究背景与目的**

帕金森病（PD）是一种以运动症状为特征的神经退行性疾病，左旋多巴（L-DOPA）是其标准药物治疗，但长期使用常导致左旋多巴诱导的异动症（LID），严重影响患者生活质量。重复经颅磁刺激（rTMS）是一种有前景的非侵入性脑调控技术，其中连续θ爆发刺激（cTBS）可产生持久的皮层抑制效应。鉴于LID与皮质-纹状体通路的异常过度激活相关，cTBS可能具有治疗潜力，但长期同时应用cTBS从L-DOPA给药初期即预防或延缓LID进展的效果及其机制尚不明确。纹状体背外侧亚区是LID病理生理学的核心节点，其异常激活表现为转录因子FosB/ΔFosB的积累，并与LID严重程度密切相关。此外，小胶质细胞介导的神经炎症在LID发生发展中也起关键作用。本研究旨在探究长期同时应用cTBS是否能延缓LID进展，并探讨其是否与降低纹状体FosB/ΔFosB积累及减轻小胶质细胞相关神经炎症有关。该研究成果发表在《Brain Research Bulletin》。

**2. 主要技术方法**

研究人员采用雄性Sprague-Dawley大鼠（体重230-280 g，购自西安交通大学实验动物中心），通过单侧向内侧前脑束（MFB）注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）建立偏侧帕金森病大鼠模型。经阿扑吗啡旋转测试验证模型成功后，随机分为四组：PD组（生理盐水）、LID组（L-DOPA+苄丝肼）、LID+假cTBS组和LID+真cTBS组。后三组连续三周每日给予L-DOPA（6 mg/kg，皮下注射）联合苄丝肼（12 mg/kg），LID+真cTBS组在注射后立即接受cTBS（600脉冲，50 Hz burst at 5 Hz，80%静息运动阈值）刺激。通过电磁仿真验证cTBS对背外侧纹状体的刺激效果。每周采用异常不自主运动（AIMs）评分评估LID严重程度（包括轴、肢、口舌和旋转亚型）。干预结束后，采用免疫荧光染色检测FosB/ΔFosB、Iba1（小胶质细胞标志物）和CD68（活化小胶质细胞标志物）的表达，并采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的水平。

**3. 研究结果**

**3.1. 偏侧帕金森病大鼠模型成功建立**
通过酪氨酸羟化酶（TH）免疫组化染色证实，损毁侧的黑质致密部（SNc）和腹侧被盖区（VTA）TH阳性神经元丢失分别达97.08%和84.06%，与未损毁侧相比差异显著（P<0.001），表明模型建立成功。

**3.2. cTBS有效刺激背外侧纹状体**
电磁仿真显示，cTBS线圈在背外侧纹状体区域产生的感应电场强度为19.7-47.6 V/m，且背外侧亚区电场强度最高（超过28 V/m），该强度足以调节神经元兴奋性。

**3.3. cTBS延缓LID进展**
在LID组和LID+假cTBS组中，总AIMs评分、轴、肢和口舌亚型评分随L-DOPA给药时间逐渐增加（P<0.05）。而LID+真cTBS组的总评分、轴和肢评分在各时间点间无显著变化，口舌评分随时间显著下降（P<0.05）。与LID+假cTBS组相比，LID+真cTBS组在第2周和第3周的总、轴、肢和口舌评分均显著降低（P<0.01），表明cTBS延缓了LID的进展，并改善了口舌异动症。

**3.4. cTBS减少背外侧纹状体FosB/ΔFosB阳性细胞数**
LID组FosB/ΔFosB阳性细胞数显著高于PD组（P<0.001），而LID+真cTBS组显著低于LID+假cTBS组（P<0.001）。相关性分析显示，FosB/ΔFosB阳性细胞数与总、轴、肢和口舌AIMs评分均呈正相关（P<0.05）。

**3.5. cTBS不影响小胶质细胞总数但减少活化小胶质细胞比例**
四组间Iba1阳性细胞数（总小胶质细胞）无显著差异。但LID组CD68⁺/Iba1⁺细胞（活化小胶质细胞）比例显著高于PD组（P<0.001），而LID+真cTBS组显著低于LID+假cTBS组（P<0.001），表明cTBS抑制了小胶质细胞的促炎表型，但不改变其数量。

**3.6. cTBS降低促炎因子水平**
LID组iNOS、IL-1β、TNF-α和IL-6水平均显著高于PD组（P<0.05），而LID+真cTBS组显著低于LID+假cTBS组（P<0.05）。这些因子水平与总、轴、肢和口舌AIMs评分均呈正相关（P<0.05）。

**4. 讨论与结论**

讨论部分指出，cTBS延缓LID进展的机制与其降低背外侧纹状体FosB/ΔFosB积累和减轻小胶质细胞相关神经炎症有关。FosB/ΔFosB是慢性神经元激活的标志，其减少可能直接抑制了异常运动输出。同时，cTBS下调了促炎因子（iNOS、IL-1β、TNF-α、IL-6），并减少了CD68⁺活化小胶质细胞的比例，但总小胶质细胞数量未变，提示cTBS主要诱导小胶质细胞的功能重塑而非减少其数量。研究还提出FosB/ΔFosB与神经炎症可能形成双向恶性循环，cTBS通过多节点干预打破这一循环。

研究结论翻译如下：总之，cTBS治疗可延缓LID进展并改善口舌异动症，这与纹状体中FosB/ΔFosB阳性细胞的减少以及小胶质细胞相关炎症的缓解密切相关。本研究为cTBS治疗对LID的预防作用提供了实验证据，并初步揭示了其潜在机制。本研究提出了一种新的非药物策略，有望作为PD患者L-DOPA治疗的临床辅助手段。