海藻糖和硝氯酰胺在调节自噬以抑制体外巨噬细胞中利什曼原虫感染中的作用

《BMC Microbiology》：The utility of trehalose and niclosamide in modulating autophagy to inhibit Leishmania major infection in macrophage cells in vitro

　　

摘要

利什曼病属于被忽视的热带疾病，目前可用的抗利什曼病药物种类有限，且往往存在副作用、价格高昂以及需要长期治疗的问题。物种多样性、寄生虫的耐药性以及共存疾病的存在等因素都会显著影响治疗效果。自噬是一种用于清除细胞内病原体的免疫机制，但许多病原体会抑制吞噬细胞中的自噬功能。鉴于这些挑战，本研究旨在评估尼古拉酰胺和海藻糖的抗利什曼病作用，以在体外抑制L. major感染。根据qPCR和Giemsa染色结果，尼古拉酰胺对体外巨噬细胞中的L. major生长具有抑制作用，而海藻糖对无鞭毛体则没有明显影响。尼古拉酰胺在6小时、24小时和48小时时的IC₅₀值分别为479.5、380.11和378.26 μg/ml，相应的EC₅₀值也为715.23、708.67和690.7 μg/ml，表明其对L. major的前鞭毛体和无鞭毛体有显著抑制作用。此外，尼古拉酰胺对J774.A1细胞系也有明显抑制作用，6小时、24小时和48小时时的CC₅₀值分别为446.7、375.9和341.4 μg/ml。通过对自噬标志物的qRT-PCR分析，发现ATG12表达显著上升，而mTOR表达下降（p?<?0.0001）。尼古拉酰胺（400 μg/ml）和海藻糖（800 μg/ml）分别使47.87%和37.97%的受感染巨噬细胞发生凋亡，而联合使用时的凋亡率为27.65%。本研究认为，与联合疗法相比，尼古拉酰胺治疗可能是未来控制体内利什曼病的有效手段。