欧黄杨对胶原诱导性关节炎大鼠Wnt/β-连环蛋白通路中关键节点及基因表达的影响

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Effects of Eucommia ulmoides Oliv. on Key Nodes and Gene Expression in Wnt/β-Catenin Pathway in Collagen-Induced Arthritis Rats

　　

摘要

目的

研究欧锦鸡儿在胶原诱导性关节炎大鼠模型中的治疗机制。

方法

通过给大鼠接种II型胶原蛋白建立胶原诱导性关节炎模型。Wistar大鼠被分为正常组（n=6），其余模型大鼠再按体重分为胶原诱导性关节炎组、欧锦鸡儿组以及Iguratimod阳性对照组（每组n=6）。欧锦鸡儿以4克/千克体重的剂量每日口服，Iguratimod以4.5毫克/千克体重的剂量每日口服，连续给药4周。通过测量后爪体积来评估关节炎的严重程度。使用苏木精和伊红以及番红花O/快绿染色剂对踝关节进行组织病理学分析。通过ELISA检测血清中I型前胶原N端肽、I型胶原交联羧基末端肽、骨钙素、β-交叉连接蛋白、肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1β和CTNNB1（β-连环蛋白）的水平。采用硝酸还原酶测定法检测血清中的一氧化氮水平。通过转录组测序和RT-qPCR检测mRNA的表达情况，同时通过Western blot检测脾脏中Wnt2和β-连环蛋白的蛋白质表达情况。

结果

与胶原诱导性关节炎组相比，欧锦鸡儿显著减轻了关节炎的严重程度和爪部肿胀（P<0.05），并降低了滑膜炎症和软骨损伤。血清分析显示，欧锦鸡儿降低了TNF-α、IL-1β、NO、ICTP和β-CTX的水平，同时提高了PINP和BGP的水平（P<0.05或P<0.01），还降低了CTNNB1的水平（P<0.01）。在脾脏中，欧锦鸡儿降低了IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平（P<0.05或P<0.01），上调了IL-10的水平，同时降低了β-连环蛋白的蛋白质含量（P<0.05）；与胶原诱导性关节炎组相比，Wnt2的mRNA水平呈现轻微下降趋势。在踝关节中，欧锦鸡儿显著降低了Wnt2和β-连环蛋白的mRNA表达水平（P<0.05或P<0.01）。

结论

欧锦鸡儿可能通过调节Wnt/β-连环蛋白信号通路来减轻类风湿性关节炎的炎症和骨破坏，因此具有作为类风湿性关节炎治疗药物的潜力。