SQSTM1变异在ALS中的临床意义：p.Arg119Cys病例报告及文献综述

《Neurogenetics》：Clinical significance of SQSTM1 variants in ALS: report of p.Arg119Cys and literature review

　　

研究人员分析了一名携带SQSTM1基因新变异的肌萎缩侧索硬化(ALS)患者的临床特征，并结合既往文献探讨了SQSTM1基因变异的基因型-表型关联。收集了该院收治的1例ALS患者的临床资料和基因检测结果。采用全外显子组测序筛选ALS相关基因，并通过Sanger测序和家系分析验证候选变异。在PubMed数据库中使用关键词（“肌萎缩侧索硬化”）或（“运动神经元病”）和（“SQSTM1”）进行系统检索，总结既往报道的SQSTM1变异ALS患者的临床和遗传特征。该患者为49岁男性，双下肢进行性无力1年，左上肢无力3个月。肌电图显示广泛性神经源性损害。基因检测发现SQSTM1基因一个新的杂合错义变异c.355 C>T (p.Arg119Cys)。家系验证显示其表型正常的母亲携带相同变异。文献检索发现58例SQSTM1变异相关ALS病例。错义变异是最常见的类型。研究人员在1例ALS患者中发现了一个新的SQSTM1变异c.355 C>T (p.Arg119Cys)。虽然该发现扩展了变异谱，但其致病性仍不确定，需要进一步的功能验证和家系确认。文献综述进一步表明，SQSTM1相关ALS主要表现为肢体起病，部分患者伴有额颞叶痴呆或佩吉特病。

**论文解读：SQSTM1变异在ALS中的临床意义——p.Arg119Cys病例报告及文献综述**

**研究背景与问题**
肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis, ALS）是一种致命性神经退行性疾病，以大脑皮层和脊髓运动神经元进行性丢失为特征，临床表现为肢体无力、肌肉萎缩及呼吸衰竭，患者生存期约3-5年。约10%的ALS患者具有家族史，多数为散发性。目前已发现超过40个ALS相关致病基因，其中C9orf72、SOD1、TARDBP和FUS最为常见。SQSTM1基因位于人类染色体5q35，编码p62蛋白，该蛋白具有泛素结合功能，通过调控核因子κB（NF-κB）信号通路和自噬参与细胞代谢、免疫应答及DNA损伤修复。p62蛋白在ALS患者中与SOD1、TDP-43或FUS相关聚集体共定位，提示其参与ALS发病机制。2011年Fecto等首次报道SQSTM1基因变异与家族性和散发性ALS相关，后续不同种族队列研究证实其变异频率约1-4%，且以错义变异为主，广泛分布于PB1、UBA、ZZ、TRAF6等多个功能域。然而，SQSTM1变异在ALS中的致病性仍不完全清楚，尤其对于新发现的变异位点，需要结合临床表型和家系分析进行综合评估。本研究旨在报道一例携带SQSTM1新变异p.Arg119Cys的散发ALS患者，并通过系统文献综述分析该基因变异的基因型-表型关联，以丰富SQSTM1相关ALS的变异谱。

**研究内容与结论**
研究人员对北京清华长庚医院神经内科2025年9月收治的一名49岁男性ALS患者进行详细临床评估，收集其性别、发病年龄、起病部位、病程、家族史、神经系统检查、电生理及影像学资料。采用全外显子组测序（whole-exome sequencing, WES）筛选ALS相关基因，通过Sanger测序验证候选变异并进行家系分析。同时，系统检索Web of Science、PubMed和Scopus数据库，关键词为“amyotrophic lateral sclerosis” OR “motor neuron disease” AND “SQSTM1”，排除非原创研究、非人类研究、无详细临床资料及非ALS相关研究，最终纳入58例SQSTM1变异ALS患者，提取变异位点、变异类型、性别、发病年龄、起病部位、生存时间及合并症等信息，使用SPSS 26.0进行统计分析。研究发现：该患者携带SQSTM1基因一个新的杂合错义变异c.355 C>T (p.Arg119Cys)，位于第3外显子，导致p62蛋白的ZZ结合域中精氨酸被半胱氨酸取代。该变异在东亚人群中的频率为0.0001（gnomAD数据库），既往未在PubMed或ClinVar中报道，根据美国医学遗传学与基因组学学会（ACMG）指南评为意义未明变异（VUS）。家系验证显示其表型正常的母亲携带相同杂合变异，父亲为野生型，提示该变异存在不完全外显率。文献综述表明，58例SQSTM1变异ALS患者中，错义变异最常见，肢体起病占68.1%，延髓起病占31.9%；女性平均发病年龄62.7±2.5岁，男性55.8±1.9岁；生存期范围5-218个月；20例有明确家族史，6例合并其他疾病。UBA结构域变异频率最高（49.1%），常伴有认知障碍、额颞叶痴呆（frontotemporal dementia, FTD）或佩吉特病（Paget’s disease）。ZZ结合域变异（包括p.Arg119Cys）均表现为肢体起病，平均发病年龄59.5岁，女性居多，平均生存期48个月，无合并其他疾病。该研究重要意义在于：扩展了SQSTM1基因的变异谱，为理解p62蛋白在ALS发病中的作用提供了新的临床依据，并提示p.Arg119Cys变异可能具有不完全外显率，其致病性需进一步功能验证和家系确认。论文发表在《Neurogenetics》。

**主要技术方法**
研究人员采用以下关键技术方法：（1）全外显子组测序（WES）：对患者外周血样本进行全外显子捕获及高通量测序（Illumina NovaSeq6000平台，150bp双端读长），数据比对至人类参考基因组GRCh37/hg19，使用BWA Aligner和VEP进行变异注释，筛选所有已知ALS相关致病基因以排除其他基因变异的影响。（2）Sanger测序验证：对候选变异位点进行一代测序验证，并对患者父母进行相同位点测序以评估遗传模式和致病性。（3）系统文献检索：在Web of Science、PubMed和Scopus数据库中，以“amyotrophic lateral sclerosis” OR “motor neuron disease” AND “SQSTM1”为检索词，纳入符合标准的原创研究，提取临床和遗传数据。（4）统计分析：使用SPSS 26.0软件，计量资料以均数±标准差或中位数表示，计数资料以例数表示，组间比较采用t检验或Mann-Whitney U检验，P<0.05为差异有统计学意义。患者来源为北京清华长庚医院神经内科。

**研究结果**
**Case report（病例报告）**：研究人员通过全外显子组测序发现患者携带SQSTM1基因c.355 C>T (p.Arg119Cys)变异，并经Sanger测序验证。该变异位于第3外显子，导致p62蛋白ZZ结合域中第119位精氨酸变为半胱氨酸。家系分析显示其表型正常的母亲携带相同杂合变异，父亲为野生型。患者临床表现为典型肢体起病ALS（ALSFRS-R评分37分），无认知障碍或骨病，肌电图显示广泛神经源性损害，血清碱性磷酸酶正常，骨X线无佩吉特病征象，脑磁共振成像及脑脊液正常。患者接受利鲁唑和依达拉奉治疗，但病情仍进展。
**Review of ALS patients with SQSTM1 variants（SQSTM1变异ALS患者文献综述）**：系统检索共纳入58例患者（33例男性，25例女性），平均发病年龄女性62.7±2.5岁，男性55.8±1.9岁；肢体起病68.1%，延髓起病31.9%；20例有家族史，6例合并其他疾病。错义变异最常见，UBA结构域变异频率最高（49.1%），常伴FTD或佩吉特病。ZZ结合域变异（9例，包括p.Arg119Cys）均表现为肢体起病，平均发病年龄59.5岁，女性居多，平均生存期48个月，无合并疾病。p.Arg119Cys变异在gnomAD东亚人群中频率0.0001，未在大型中国ALS队列中检出，提示为罕见变异。

**讨论与结论**
讨论部分指出，p.Arg119Cys变异位于p62蛋白的ZZ结合域，该域是高度保守的锌指结构域，介导蛋白-蛋白相互作用，参与NF-κB信号通路调控和自噬过程。既往报道的ZZ域变异均表现为肢体起病，本研究病例表型与之相符。UBA域是最常突变区域，其变异常导致p62泛素结合能力下降，影响自噬和异常蛋白聚集体清除，导致更复杂的临床表型（如认知障碍、FTD或佩吉特病）。家系分析显示母亲携带变异但无表型，证实不完全外显率的存在，这与SQSTM1变异在ALS中常见散发性、不完全外显率现象一致。研究人员还讨论了寡基因遗传的可能性，即多个基因罕见变异共同参与发病，但本患者全外显子测序未发现其他已知ALS相关基因罕见变异，不能完全排除非编码区基因互作。此外，p62蛋白和自噬通路已成为ALS治疗靶点，如海藻糖、雷帕霉素、自噬靶向嵌合降解剂等，但不同变异对p62介导的自噬和NF-κB/Nrf2信号通路的影响可能不同，需个体化评估。研究局限性包括：p.Arg119Cys变异根据ACMG指南评为VUS，致病性证据有限；纳入病例数较少，无法完全反映临床特征；不同研究在临床评估方法、随访时间和基因检测范围上存在异质性；文献检索限于英文和中文数据库，可能遗漏其他语言研究；家系数据有限，不完全外显率仅为可能性而非确定性。
**结论**：研究人员报告了一例携带SQSTM1新变异c.355 C>T (p.Arg119Cys)的ALS患者。经过文献综述，总结了SQSTM1相关ALS的临床和遗传特征。需要进一步的功能研究和家系验证以阐明p.Arg119Cys的致病性。