《Cancers》：Sample Source and Cryopreservation Affect Flow-Cytometric Profiling of Immune-Escape-Related Markers on AML Blasts
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背景/目的：急性髓系白血病（AML）的流式细胞术读数可能取决于标本来源和处理。研究人员评估了样本来源（外周血[PB] vs. 骨髓[BM]）和冷冻保存是否影响AML原始细胞上的免疫逃逸相关标志物。方法：对19名成年患者的配对PB和BM样本，在新鲜和冷冻保存后进
背景/目的：急性髓系白血病（AML）的流式细胞术读数可能取决于标本来源和处理。研究人员评估了样本来源（外周血[PB] vs. 骨髓[BM]）和冷冻保存是否影响AML原始细胞上的免疫逃逸相关标志物。方法：对19名成年患者的配对PB和BM样本，在新鲜和冷冻保存后进行分析。使用中位荧光强度（MFI）和相对荧光指数（RFI）评估活CD45dim单细胞中的ULBP1-6、MICA/B、CD34、CD44、CD70、CD80和CD184。配对比较采用双侧Wilcoxon符号秩检验，并在每个终点和比较中对六个标志物进行Benjamini–Hochberg校正。还使用预定义的传统20%参考阈值评估不一致性。结果：调整后，RFI在PB或BM内的新鲜和冷冻保存样本之间，或新鲜PB和BM之间均无差异。在冷冻保存样本中，PB和BM在CD70（q = 0.042）和ULBP1-6（q = 0.028）上存在差异。冷冻保存增加了PB和BM中CD184和ULBP1-6以及PB中MICA/B的MFI；PB-BM的MFI差异均无显著性。基于阈值的分类在CD34、CD44、CD80、CD184、MICA/B和ULBP1-6中5.3–38.9%的配对中存在不一致，而CD70无不一致。结论：队列水平差异仅限于特定标志物和条件，而患者水平的阈值不一致持续存在。因此，在解释基于阈值的分类时应考虑样本来源和冷冻保存。
急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia, AML）是一种异质性血液恶性肿瘤，流式细胞术免疫分型是其诊断和监测的核心工具。然而，样本来源（外周血Peripheral Blood, PB vs 骨髓Bone Marrow, BM）和冷冻保存（cryopreservation）是常见的预分析变量，可能影响标志物的检测。尽管常规标志物（如CD13、CD33）在PB和BM之间具有可比性，但免疫逃逸相关标志物（如NKG2D配体ULBP1-6（UL16-binding protein 1-6）、MICA/B（MHC class I polypeptide-related sequence A/B），共刺激分子CD80（cluster of differentiation 80），粘附分子CD44（cluster of differentiation 44），趋化因子受体CD184（chemokine receptor CXCR4），以及免疫检查点CD70（cluster of differentiation 70））的表达稳定性尚不清楚。这些标志物在AML免疫逃逸和治疗抵抗中发挥重要作用，且其表面可检测性可能更依赖于细胞状态和处理条件。目前，关于冷冻保存对这类标志物影响的研究较少，尤其是在AML原始细胞中。因此，本研究旨在系统性评估样本来源和冷冻保存对7种免疫逃逸相关标志物在AML原始细胞上表达的影响，为转化研究和多中心试验提供预分析标准化依据。研究人员收集了19名AML患者（17例初诊，1例复发，1例进展）的配对PB和BM样本，每个样本分为新鲜和冷冻保存两种处理条件，共获得4组数据。使用多参数流式细胞术，
