在流式检测条件下，冯维勒布兰德因子A2结构域可抑制A1与DNA的结合，同时保持A1与血小板的相互作用：重组结构域实验的结果佐证

《Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis》：Von Willebrand Factor A2 Domain Inhibits A1-DNA Binding while Preserving A1-Platelet Interaction under Flow: Evidence from Recombinant Domain Constructs

　　

摘要

背景

在炎症和血栓形成过程中，循环中的游离细胞DNA水平会升高。在免疫性血栓形成过程中，中性粒细胞的胞外陷阱会释放具有促血栓形成特性的长DNA纤维。有研究指出，冯维勒布兰德因子可通过其A1结构域与DNA发生相互作用；不过，这种相互作用的后果以及由相邻的A2结构域对其的调控机制目前仍不甚清楚。

研究目的

我们利用重组冯维勒布兰德因子结构域构建体，旨在研究冯维勒布兰德因子A1结构域与DNA之间的相互作用，并确定冯维勒布兰德因子A2结构域是否能够调节A1与DNA的结合，以及这种结合对流动条件下血小板黏附的影响。

方法

我们通过原子力显微镜、磁镊子、酶联免疫吸附试验以及微流控流动试验来研究冯维勒布兰德因子A1结构域与DNA的相互作用。同时，我们使用了重组的A1结构域以及哺乳动物表达的A1A2结构域组合，以评估其在生理环境中的实际意义。

结果

冯维勒布兰德因子A1结构域可以与DNA结合，并导致DNA出现浓度依赖性的凝缩现象。DNA与冯维勒布兰德因子A1结构域的结合会显著抑制流动条件下的血小板黏附。而A2结构域则能抑制冯维勒布兰德因子A1结构域与DNA的结合，这一作用在单独的A2结构域以及A1A2结构域组合中均有体现，同时该结构域还能减轻DNA对A1结构域介导的血小板黏附的抑制作用。

结论

这些研究结果表明，在重组的冯维勒布兰德因子结构域中，冯维勒布兰德因子A1结构域会使DNA发生凝缩，而A2结构域则会负向调控A1与DNA的相互作用，但同时仍能维持A1结构域在流动条件下介导的血小板黏附功能。尽管还需要在天然的多聚体冯维勒布兰德因子以及更具生理相关性的模型中进行进一步验证，但这些研究结果为了解A2结构域如何差异性地调控A1结构域与DNA及血小板的相互作用提供了新的见解。

彭志彤|孙晓溪|曲广州|方金华|刘爱英|黄玉明|吴志伟|杨俊贤|马杰|林建国

中国广东省广州市510006，华南理工大学医学院