摘要
布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌属细菌引起的人畜共患疾病，对人类健康构成严重威胁。铜抗性是许多胞内病原体毒力的重要决定因素，其中包括那些能表达多铜氧化酶CueO的病原体。然而，CueO在布鲁氏菌中的作用至今仍不甚明了。在本研究中，我们利用生物信息学工具对CueO蛋白的序列同源性及保守结构域进行了分析。通过同源重组技术，构建了无标记的cueO缺失突变株以及互补型布鲁氏菌株。随后进行了多项实验，包括体外铜耐受性测试、RAW264.7巨噬细胞内的存活检测、小鼠体内的毒力测定、抗生素敏感性测试等。研究发现，CueO在各种细菌中都存在高度保守的结构域（1–10号结构域）。值得注意的是，布鲁氏菌的相应蛋白仅包含2、3、5、6和10号结构域，但这些结构域在该菌属内依然保持高度保守。尽管结构域组成有所减少，CueO对于布鲁氏菌抵抗铜毒性仍然至关重要。它有助于布鲁氏菌在RAW264.7巨噬细胞内存活，并维持其体内的铜平衡。在鼠模型中，删除cueO会降低细菌的毒力。此外，CueO还会影响细菌对多西环素和左氧氟沙星的敏感性。总体而言，我们的研究结果表明，尽管缺乏一些典型的结构域，CueO仍具有关键功能，它将铜解毒与胞内存活、毒力以及抗生素抗性联系在一起。这些发现不仅加深了我们对CueO功能的理解，还为探究布鲁氏菌的致病机制提供了新的视角。
图形摘要
CueO是布鲁氏菌中一种高度保守的多铜氧化酶，它通过参与铜解毒来促进细菌的胞内存活、毒力提升，以及提高其对多西环素和左氧氟沙星的抵抗力。删除cueO会打破铜平衡，从而降低细菌的致病性。
利益冲突声明
作者声明不存在任何利益冲突。
数据可用性说明
所有研究数据均收录在本文中，相关补充信息可见支持信息部分。
