基于外部质量评估数据的阿哌沙班检测长期分析性能

《Thrombosis Research》：Long-term analytical performance of apixaban measurements based on external quality assessment data

　　

摘要

研究目的

尽管直接口服抗凝药通常无需监测，且其临床临界值尚未明确，但在紧急情况下仍常需要检测阿哌沙班浓度，对于那些药代动力学可能存在差异的患者也是如此。为确保结果的准确性，不同实验室和检测平台得出的数据必须具有可比性。然而，目前大多数外部质量评估项目仅能提供短期性能数据。本研究旨在利用多中心外部质量评估数据来评估阿哌沙班检测方法的长期分析性能，并找出导致分析差异的根源。

研究方法

本研究分析了ECAT项目中的匿名数据。该项目每年两次分发两份冻干柠檬酸血浆样本（阿哌沙班浓度在24–413?ng/mL之间）。首先确定共识值，然后通过对各实验室的检测结果与共识值进行线性回归分析，计算斜率、截距和标准误差。此外还确定了总误差、随机误差、偏差（恒定偏差和比例偏差）、长期变异系数以及分析临界差异。同时也评估了检测平台一致性对检测结果的影响。

研究结果

共有233家实验室的238种方法-试剂-校准品组合符合研究纳入标准。在阿哌沙班浓度高于50?ng/mL时，各实验室的检测结果变异系数均低于10%，但随着浓度降低，变异系数上升至24.6%。平均总误差为16.8%，其中主要由随机误差造成（10.7%）。平均总偏差为33.1?ng/mL，且多为比例偏差。中位长期变异系数为5%（范围为1.7–19.9%），中位分析临界差异为34.2?ng/mL。使用相同制造商的设备、检测方法和校准品的统一平台，其检测结果的长期变异系数和分析临界差异明显低于那些部分统一或非统一的平台。

研究结论

尽管不同检测方法之间存在差异，但阿哌沙班检测方法仍具备良好的长期精确度。比例偏差是导致检测结果偏差的主要因素。而通过统一检测平台，可以提高检测结果的重现性。

引言

直接口服抗凝药已成为大多数患者预防及治疗静脉血栓栓塞症和肺栓塞的首选口服药物[1]。这类小分子抑制剂通过直接与因子Xa或凝血酶（因子IIa）结合，从而抑制它们的酶活性，进而发挥抗凝作用[2]。

阿哌沙班是一种因子Xa抑制剂，目前是全球使用最广泛的直接口服抗凝药，全球有超过2000万患者正在使用该药物，主要集中在欧洲和美国[3]。它之所以被广泛使用，部分原因在于其良好的安全性，尤其是在老年人群体中[4]。

直接口服抗凝药的药代动力学特性较为稳定，因此通常无需定期进行实验室检测[2]。不过，在某些特殊情况下，仍需检测这些药物的浓度，以便确认其浓度是否与III期试验中的数据存在较大差异[5]。这些情况包括治疗期间出现严重出血或血栓事件，或是需要立即进行高风险手术且必须评估或逆转抗凝效果时。此外，对于体重极大或肾功能受损的患者，由于药物清除率可能发生变化，也需要对其药物浓度进行检测[2]。

阿哌沙班的血浆浓度可通过抗因子Xa显色法进行测定，而液相色谱-串联质谱法则是目前公认的参考检测方法[5]。这两种方法都需要使用阿哌沙班或直接口服抗凝药专用标准品进行校准[6]。可靠的实验室检测结果对于制定合理的临床治疗方案至关重要。确保同一实验室内、不同检测方法之间以及全球不同实验室之间的检测结果具有可比性，是直接口服抗凝药检测工作的关键目标。

为帮助实验室评估自身的检测性能，目前有一些外部质量评估项目可供使用。这类项目能够揭示局部因素以及与检测方法相关的变异来源，通常针对较短时间范围内的检测数据[7]、[8]、[9]。通过采用长期评估模型，可以进一步研究阿哌沙班检测性能随时间的变化趋势[7]。在本项数据分析中，我们旨在利用这些数据来评估现有阿哌沙班检测方法的性能，并找出影响检测结果的变异因素。

内容节选

外部质量评估项目

“诊断检测外部质量控制”项目（ECAT）设立了一套质量评估体系，旨在确保实验室检测结果的可靠性。该项目每六个月分发两份能力验证样本，因此全球范围内参与该抗凝剂检测项目的实验室每年可收到4份样本。参与者需按照常规临床样本的处理流程来处理这些样本，详细操作指南见补充文件A。检测结果需在规定时间内提交。

共识值

在2021年至2024年期间，共有300家实验室参与了ECAT组织的阿哌沙班外部质量评估项目。这些实验室共对16份能力验证样本进行了4989次检测。其中有1257次检测结果被排除，因为它们来自同一实验室内的相同备份检测系统，容易导致检测结果过度集中。在排除了异常值后（共44例），最终为每份能力验证样本计算出了共识值（见表1）。该共识值的...

讨论

这项针对外部质量评估数据的长期分析表明，目前用于检测阿哌沙班的方法存在相当大的差异。尽管存在这些差异，大多数实验室仍能实现可接受的长期分析精确度，其长期变异系数通常低于10%，这充分体现了在常规检测条件下阿哌沙班浓度检测方法的整体稳定性[10] [11]。

这些研究结果进一步扩展了此前关于实验室间检测差异的研究成果。

研究局限性

本研究存在一些局限性，在解读研究结果时需予以考虑。首先，基于外部质量评估的分析依赖于共识值而非绝对的参考检测值，这在系统误差估计过程中可能存在一定的循环性问题。不过，由于目前尚无阿哌沙班的参考检测体系，因此只能以共识值作为比较依据，这种做法在现阶段是不可避免的。其次，本研究的数据来源为各实验室自愿提供的检测数据。

研究结论

虽然阿哌沙班检测方法存在较大的差异，但其整体长期精确度依然良好（长期变异系数低于10%）。那些完全统一、采用同一家公司生产设备的检测平台，其检测性能最为优异，这也凸显出进一步标准化检测方法的重要性，同时也应接受约10%的检测方法间差异这一现实情况。

CRediT作者贡献说明

Bob Smit： 文章撰写——审阅与编辑、文章撰写——初稿撰写、可视化处理、方法设计、实验研究、正式数据分析、数据整理。Piet Meijer： 文章撰写——审阅与编辑、数据整理、概念构思。 An Stroobants： 文章撰写——审阅与编辑、方法设计、概念构思。

关于写作过程中使用生成式AI及AI辅助技术的情况声明

在撰写本文时，作者们使用了ChatGPT来协助校对文本、修正语法错误以及为图形摘要制作图标。作者们对相关输出内容进行了必要的审阅和修改，并对最终发表的文章内容承担全部责任。

利益冲突声明

Piet Meijer与ECAT基金会存在关联，具体为该基金会的董事会成员。其他作者则声明自己不存在任何可能影响本文研究结果的财务利益冲突或个人关系。

Bob Smit|Piet Meijer|An Stroobants

荷兰奈梅亨市拉德布德大学医学中心诊断实验室