单步整体色谱法可高效纯化多种铜绿假单胞菌噬菌体，并显著降低其内毒素含量至治疗级标准

《npj Viruses》：Single-step monolithic chromatography efficiently purifies diverse Pseudomonas aeruginosa phages with therapeutic-grade endotoxin reduction

　　

摘要

噬菌体作为抗菌剂在治疗方法及病原体控制方面越来越受到关注。为确保使用噬菌体的安全性并符合相关标准，必须进行严格的质量控制，并去除微生物生长产生的副产物；对于从革兰氏阴性菌裂解液中分离出的噬菌体，这需要去除内毒素（脂多糖/LPS）以及污染的宿主蛋白。本文介绍了弱疏水性羟基功能化整体柱色谱技术（CIMmultus-OH）的应用，该技术可通过一步法纯化五种具有尾结构的抗假单胞菌噬菌体，包括肌病毒型和丝状病毒型噬菌体，以及所谓的“巨型”噬菌体，从而获得可用于人体静脉注射的符合治疗标准的样品。通过采用磷酸钾梯度实现的盐驱动优先排阻色谱技术，我们几乎完全去除了内毒素（去除率达99.98–≥99.99%）和蛋白质杂质（去除率达99.12–99.83%）。研究还发现，纯化后噬菌体的回收率与尾长及有效颗粒尺寸（流体力学直径）呈反比关系，尾较短、颗粒较小的噬菌体回收率更高。综上所述，一步法CIMmultus OH整体柱色谱技术具有可扩展性、重复性好，且无需使用有害化学物质，非常适合应用于工业化的噬菌体纯化流程中。