口服单剂量[14C]pixavir marboxil在中国健康男性受试者中的质量平衡、排泄及药代动力学研究

《Frontiers in Pharmacology》：Mass balance, excretion, and pharmacokinetics of a single oral dose of [14C]pixavir marboxil in healthy Chinese male participants

　　

**摘要**

**背景与目的：** 帽依赖性核酸内切酶（Cap-dependent endonuclease，CEN）抑制剂是一类 promising 的新型抗流感病毒药物。本I期研究旨在评估新型CEN抑制剂前药pixavir marboxil（TG-1000）在健康人体内的质量平衡、排泄途径和药代动力学特征。

**方法：** 六名健康中国男性受试者接受单次口服40 mg（100 μCi）剂量的[14C]pixavir marboxil。在给药后至384小时内的预设时间点收集血液、尿液和粪便样本。采用氧化燃烧法和液体闪烁计数法测定总放射性。使用非房室模型分析计算药代动力学参数，并采用高效液相色谱联用放射性检测和高分辨质谱法进行代谢物谱分析。

**结果：** 原形药物pixavir marboxil在血浆中未检出。全身暴露主要由其活性代谢物pixavir（TG-0527）及其后续的葡萄糖醛酸结合物TG-0600771组成。六名受试者中总放射性、pixavir和TG-0600771的几何平均药时曲线下面积（AUC_0?∞）分别为4,220 h·ng Eq./mL、2,490 h·ng/mL和981 h·ng/mL。给药放射性剂量的平均累积回收率为91.29%，其中粪便回收85.62%，尿液回收5.68%。代谢物谱分析鉴定出pixavir和TG-0600771为主要代谢物，血浆中未观察到主要的细胞色素P450（CYP）介导的氧化代谢物。单次剂量的[14C]pixavir marboxil安全且耐受性良好。

**结论：** Pixavir marboxil表现出良好的药代动力学特征，其特点为快速全身转化为活性代谢物、不依赖CYP的代谢途径以及以非肾脏清除为主。这些良好的药代动力学特征支持其具有明确的处置特性，即对CYP介导的代谢和活性pixavir的肾脏排泄依赖有限。

**试验注册：** 本研究在国家药品监督管理局（NMPA）药物临床试验登记与信息公示平台注册，注册号CTR20231822（http://www.chinadrugtrials.org.cn/）。

**论文解读： [14C]pixavir marboxil在中国健康男性受试者中的质量平衡、排泄与药代动力学研究**

**一、研究背景与目的**

季节性流感作为一种传染性呼吸道病毒感染，反复引发流行病，给全球带来了沉重的发病率和死亡率负担。数十年来，神经氨酸酶抑制剂（neuraminidase inhibitors，NAIs）如奥司他韦一直是主要的抗病毒治疗药物。然而，其临床实际应用常受限于狭窄的治疗窗口，即需在症状出现后48小时内启动治疗方能获得最大临床获益，同时循环中耐药病毒株持续构成风险。因此，临床上迫切需要开发具有更宽治疗窗口和更高耐药屏障的新型抗病毒策略。

帽依赖性核酸内切酶（cap-dependent endonuclease，CEN）抑制剂代表了一类新型治疗药物，为克服上述临床挑战提供了有前景的策略。通过选择性靶向病毒RNA聚合酶复合物中高度保守的聚合酶酸性（polymerase acidic，PA）亚基，CEN抑制剂能在病毒复制周期中比NAIs更早的阶段有效阻断病毒mRNA转录。由于绕过NAIs所靶向的表面糖蛋白，CEN抑制剂对NAI耐药株保持强效抗病毒活性。鉴于其已确立的临床获益，CEN抑制剂已被纳入近期治疗指南。Pixavir marboxil（TG-1000）是一种新型CEN抑制剂，被设计为单剂量口服治疗流感的药物。

为优化口服生物利用度和全身暴露，pixavir marboxil被特意设计为前药，其在体内经酯酶介导快速水解为活性代谢物pixavir，后者是发挥抗流感活性的部分。尽管早期临床评估已证实该新型前药在健康成人中具有良好的安全性、耐受性和药代动力学特征，但其在人体内的吸收、代谢和排泄（absorption, metabolism, and excretion，AME）特性尚不清楚，而这对于临床转化至关重要。阐明新化学实体的药代动力学处置是指导其临床应用的基本监管要求。人体放射性标记质量平衡研究为确定主要清除机制、量化绝对排泄途径和验证全面代谢特征提供了必要的定量数据。此外，表征肾脏或非肾脏（如粪便）清除途径的相对贡献，为理解新药的处置特征和指导后续临床药理学评价提供了重要基础。本研究旨在表征[14C]pixavir marboxil在中国健康男性受试者中的AME特征，包括质量平衡、排泄途径和药代动力学，为其临床应用提供药代动力学依据。

**二、主要技术方法**

本研究为一项在中国上海徐汇区中心医院进行的I期、单中心、开放标签、非随机、单剂量质量平衡研究。六名健康中国男性受试者入组并完成研究，平均年龄27.7岁，平均体重指数为21.83 kg/m2。受试者接受单次口服约40 mg（100 μCi）剂量的[14C]pixavir marboxil胶囊。放射性标记通过环丙烷甲醛部分引入，该部分在水解后保留在活性代谢物pixavir中。生物样本采集由基于定量终止标准的中间放射性监测指导。总放射性采用氧化燃烧和液体闪烁计数法测定。血浆中原形药及代谢物浓度采用经验证的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定。药代动力学参数使用Phoenix WinNonlin软件（版本8.3）通过非房室模型分析计算。代谢物谱分析采用高效液相色谱联用放射性检测和高分辨质谱进行，代谢物结构通过LC-HRMS基于精确质量和碎裂模式进行阐明。

**三、研究结果**

**3.1 参与者特征与安全性**

六名健康中国男性受试者全部完成研究。单次口服约40 mg（100 μCi）[14C]pixavir marboxil总体安全且耐受性良好，无死亡、严重不良事件（serious adverse events，SAEs）或导致研究终止的不良事件（adverse events，AEs）报告。三名受试者（50.0%）共经历三例治疗中出现的不良事件（treatment-emergent adverse events，TEAEs），均为1级（轻度）严重程度，无需医疗干预即自行缓解。

**3.2 药代动力学**

单次口服40 mg（100 μCi）[14C]pixavir marboxil后，原形前药在血浆中未检出。总放射性、pixavir和TG-0600771同步达峰，三种分析物的中位达峰时间（T_max）均为4.51小时。总放射性、pixavir和TG-0600771的几何平均最大血药浓度（C_max）分别为115 ng Eq./mL、70.7 ng/mL和30.7 ng/mL。几何平均AUC_0?∞分别为4,220 h·ng Eq./mL、2,490 h·ng/mL和981 h·ng/mL。两种主要循环代谢物pixavir和TG-0600771分别占血浆总放射性AUC_0?∞的70.49%和19.99%。总放射性、pixavir和TG-0600771的表观终末半衰期（t_1/2）分别为31.4 ± 4.85 h、41.6 ± 8.04 h和32.0 ± 5.51 h。全血与血浆总放射性浓度比值在各时间点均接近1.0，表明药物相关物质与红细胞存在一定程度的结合。

**3.3 质量平衡与排泄**

给药后384小时收集期内，放射性在粪便和尿液中回收。总体平均质量平衡（给药放射性总回收率）为91.29% ± 2.39%。给药放射性剂量的85.62% ± 4.35%在粪便中回收，5.68% ± 2.48%在尿液中回收。总放射性的排泄迅速，给药后120小时内回收了给药剂量的84.82%。质量平衡在给药后216小时达成（>90%回收），累积回收率为90.22%。放射性排泄在给药后168小时基本完成。

**3.4 代谢物谱分析与鉴定**

原形pixavir marboxil在血浆和尿液中未检出，在粪便中占给药剂量的0.27%。在合并血浆中，主要循环药物相关成分为活性代谢物pixavir及其葡萄糖醛酸结合物TG-0600771，分别占血浆总放射性暴露的70.10%和29.02%（经放射性化学检测确定）。粪便中主要代谢物为pixavir，占给药剂量的72.45%。TG-0600771是主要尿中代谢物，占给药剂量的2.51%。除原形药外，共鉴定出五种代谢物，包括亚砜产物（M468-1和M468-2）和另一种葡萄糖醛酸结合物（M628-1），各占剂量的一小部分。主要活性代谢物pixavir（M452）显示质子化分子离子[M + H]⁺为m/z 453.1079。其葡萄糖醛酸结合物TG-0600771（M628-2）的[M + H]⁺为m/z 629.1400，比pixavir高176 Da，具有m/z 453.1074的特征MS/MS碎片，表明丢失了葡萄糖醛酸部分。亚砜代谢物M468-1和M468-2均显示[M + H]⁺为m/z 469.1028，代表pixavir因单氧化而产生16 Da质量位移。

**四、讨论与结论**

本研究首次全面表征了[14C]pixavir marboxil单次口服给药在六名健康中国男性受试者中的质量平衡和排泄途径。给药剂量的放射性回收良好，粪便为主要消除途径，而肾脏排泄为次要途径。原形前药在血浆中未检出，表明pixavir marboxil在吸收或首过代谢过程中被快速吸收并完全转化为活性代谢物pixavir。代谢谱分析表明，pixavir marboxil经历快速酶促水解形成活性代谢物pixavir，随后pixavir经尿苷5′-二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（uridine 5′-diphospho-glucuronosyltransferase，UGT）介导的葡萄糖醛酸化和次要氧化途径进一步代谢。重要的是，血浆中未鉴定出主要的CYP介导氧化代谢物，表明pixavir的清除在很大程度上不依赖于CYP酶系统。这种非CYP依赖的代谢特征降低了pixavir与其他药物联用时作为CYP介导药物相互作用（drug-drug interactions，DDIs）受害者的可能性。此外，活性pixavir的肾脏排泄有限（仅占给药剂量的0.31%），结合单剂量口服治疗方案，这些特征提示pixavir具有较低的临床意义CYP介导DDIs风险和较低的失活代谢物肾脏排泄蓄积风险。研究的局限性在于样本量较小（N = 6）且仅纳入健康男性汉民族受试者，结果外推至其他人群需谨慎。总之，本研究证明了pixavir marboxil经历完全的吸收前转化为其活性代谢物pixavir，随后进行UGT介导的代谢和主要粪便排泄。活性pixavir的肾脏排泄有限以及缺乏主要CYP介导的氧化代谢物，提示pixavir不太可能发生肾脏排泄相关的失活代谢物蓄积，也不大可能成为临床意义显著的CYP介导药物相互作用的受害者。这些发现支持pixavir marboxil具有明确且良好的处置特征。该论文发表在《Frontiers in Pharmacology》。