摘要
基于CRISPR的检测方法在提升结核病诊断准确性方面展现出潜力，但由于缺乏独立的验证研究，相关证据仍较为有限。我们针对一种串联qPCR-CRISPR检测方法进行了前瞻性评估，该方法可用于检测结核分枝杆菌（Mtb）以及利福平耐药性。我们从疑似结核病患者身上采集了用于涂片显微镜检查、结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF Ultra（Xpert）检测以及本研究中所用检测方法的样本。对于培养阳性的病例，还进行了表型药物敏感性测试。该检测方法的诊断性能是通过微生物学参考标准（MRS）和综合参考标准（CRS）来评估的，而药物耐药性的预测性能则是以pDST和Xpert作为参考标准来判定的。共有179名成人参与了这项研究，其中包括84例确诊结核病患者、18例临床结核病患者以及77例非结核病患者。该串联qPCR-CRISPR检测方法在对照MRS时的灵敏度为84.5%（95%置信区间为75.0–91.5%），特异性为95.8%（95%置信区间为89.6–98.8%）；在对照CRS时的灵敏度为70.6%（95%置信区间为60.6–79.0%），特异性为96.1%（95%置信区间为88.3–99.0%）。在检测药物耐药性方面，该方法的灵敏度为77.5%（95%置信区间为61.1–88.6%），特异性为90.9%（95%置信区间为77.4–97.0%）。痰液样本的检测灵敏度高于支气管肺泡灌洗液样本。总体而言，该串联qPCR-CRISPR检测方法在检测结核病及多药耐药/耐乙胺丁醇结核病方面的性能尚不尽如人意，因此在临床应用之前还需进一步优化。
