亚慢性大麻二酚（CBD）治疗在静默期未能阻止锂-毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态后增加的癫痫易感性

《Brain Sciences》：Subchronic Cannabidiol (CBD) Treatment During the Silent Period Fails to Prevent Increased Seizure Susceptibility Following Lithium-Pilocarpine-Induced Status Epilepticus

　　

摘要：引言。近年来，大麻二酚（CBD）已被用作抗癫痫药物的辅助疗法，用于控制难治性癫痫患者的癫痫发作。除抗惊厥作用外，CBD还具有明确的抗炎特性。由于神经炎症可触发多种促癫痫发生机制，CBD可能在抑制这一过程中发挥作用。癫痫发生是癫痫在脑损伤后成为慢性疾病的过程，其主要特征之一是因癫痫阈值降低而导致的癫痫易感性增加。然而，CBD在调节这种易感性中的作用仍知之甚少。方法。研究人员开发了一种实验方案，通过在锂-毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态（SE）后7天或14天，腹腔内（i.p.）给予小剂量戊四氮（15 mg/kg/每10分钟），来离散测量癫痫阈值（DMST）。结果。使用DMST，研究人员观察到SE后癫痫阈值显著降低，并伴有以易激惹和显著体重减轻为特征的高敏感状态。另一组大鼠在SE后接受了为期14天的CBD治疗（20 mg/kg）。结论。CBD治疗并未改善癫痫阈值；此外，它还加重了高敏感状态并延迟了SE后的恢复。研究人员的结论提示，口服给予人等效治疗安全剂量的CBD不能改善SE后的癫痫发展易感性。

**论文解读：亚慢性大麻二酚治疗在锂-毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态后未能阻止癫痫易感性增加**

**研究背景与问题**

癫痫持续状态（Status Epilepticus, SE）是导致癫痫慢性化（即癫痫发生过程）的最主要获得性因素之一，超过40%的SE患者在最初几年内发展为慢性癫痫。神经炎症被认为是触发癫痫发生的关键机制，包括促炎细胞因子释放、胶质细胞活化等过程。大麻二酚（Cannabidiol, CBD）是一种无致幻作用的植物大麻素，具有明确的抗惊厥和抗炎特性，已被美国食品药品监督管理局批准作为Dravet综合征和Lennox-Gastaut综合征的辅助治疗。然而，尽管CBD在控制癫痫发作方面有效，但其是否能够通过抗炎作用在SE后抑制癫痫发生、降低癫痫易感性，尚缺乏充分研究。现有实验证据存在矛盾：部分研究在SE诱导前或点燃发展过程中给予CBD，观察到癫痫发作减少，但这些结果可能归因于CBD对初始损伤的削弱而非直接抗癫痫发生作用；而另一些研究在SE后给予CBD，未发现对自发性癫痫发作频率的影响。因此，当前迫切需要明确SE后CBD治疗能否通过降低癫痫易感性来阻止癫痫慢性化，且需采用临床相关给药途径（口服）和剂量，避免抗惊厥作用与抗癫痫发生作用的混淆。

**研究设计与方法**

本研究采用锂-毛果芸香碱（Lithium-Pilocarpine）诱导的SE大鼠模型，动物来源为雄性Sprague-Dawley大鼠（约250 g）。主要关键技术方法包括：（1）离散测量癫痫阈值（Discrete Measured Seizure Threshold, DMST）协议：通过每10分钟腹腔注射亚惊厥剂量戊四氮（Pentylenetetrazol, PTZ，15 mg/kg），直至出现全身性强直-阵挛发作（Generalized Tonic-Clonic Seizures, GTCS），记录累积剂量和潜伏期；（2）亚慢性口服CBD治疗：SE后14天内，每日经口灌胃给予20 mg/kg CBD（人等效最大治疗剂量，溶于芝麻油）或等体积芝麻油（载体对照）或水（对照）；（3）体重动态监测与操作评分（Manipulation Score）：对SE后大鼠的易激惹性进行量化评分（1-10分），并拟合六次多项式描述体重变化参数（包括最大体重下降时间、恢复初始体重时间、最大体重增加时间等）；（4）统计分析：采用双尾t检验、单因素方差分析（Tukey事后检验）及双因素方差分析比较组间差异，线性回归分析相关性。

**研究结果**

**3.1 癫痫阈值测量（Seizure Threshold Measure）**
在SE后7天（7DPSE），通过DMST协议发现，与对照组相比，SE大鼠诱发GTCS所需的PTZ累积剂量显著降低（对照组：75 ± 12.25 mg/kg vs. 7DPSE组：50 ± 8.6 mg/kg，p < 0.05），潜伏期也显著缩短（42.5 ± 8.2 min vs. 29 ± 3.6 min，p < 0.05）。这表明SE后7天，大鼠对癫痫发作的易感性显著增加，癫痫阈值降低。

**3.2 评估CBD对SE后癫痫易感性的影响（Evaluation of the Effect of CBD on Susceptibility to Develop Seizures After SE）**
将SE后存活的大鼠分为CBD组（20 mg/kg，经口，14天）和载体组（芝麻油），并设置对照组（未经历SE）。操作评分显示，CBD组大鼠在治疗第3天后表现出显著且持久的易激惹性增加，评分高于载体组（pscore < 0.0001，ptime = 0.0002，交互作用<0.0001）。体重分析显示，CBD组大鼠的最大体重下降时间（T_min）和恢复初始体重时间（T_100%）均显著长于载体组（T_min：1.61 ± 0.57天 vs. 2.59 ± 1.43天，p = 0.036；T_100%：3.76 ± 1.20天 vs. 8.02 ± 3.96天，p = 0.039），且体重下降幅度有增加趋势（16.54 ± 2.66% vs. 21.34 ± 5.53%，p = 0.079）。DMST结果显示，CBD组和载体组诱发GTCS所需的PTZ累积剂量及潜伏期均无显著差异，且均显著低于对照组（p < 0.01），表明CBD治疗未能改善SE后的癫痫阈值，反而加重了高敏感状态并延迟了体重恢复。

**讨论与结论**

讨论部分指出，SE后大鼠出现的高敏感状态（易激惹）和体重下降与既往研究一致，且未发展为SE的大鼠表现与对照组相似，提示癫痫发作的强度/持续时间决定了高敏感状态。本研究开发的DMST协议避免了传统静脉连续灌注PTZ的技术困难，且24小时间隔排除了CBD与PTZ的药物相互作用（CBD半衰期在啮齿类动物中为2-12小时）。CBD未能改善癫痫易感性的可能机制包括：干扰SE后突触可塑性和功能恢复所需的小胶质细胞清除反应；影响CBD发挥抗焦虑作用所依赖的分子靶点（如5-HT_1A、TRPV1、GPR55等）的表达变化。此外，口服CBD在啮齿类动物中的生物利用度较高但半衰期较短，可能导致脑内暴露不稳定，且高剂量CBD可能具有细胞毒性。研究结论部分原文翻译如下：
**“总之，研究人员的发现表明，在本研究采用的实验条件下，SE后亚慢性口服20 mg/kg大麻二酚（CBD）并不能降低癫痫发展的易感性。需要进一步探索不同给药途径、替代剂量方案和慢性治疗协议，以及监测自发性复发性癫痫发作，才能最终确定CBD是否具有真正的抗癫痫发生作用。”**
该研究发表在《Brain Sciences》上，其重要意义在于：提示临床常用的口服CBD剂量在SE后治疗中可能无效甚至有害，强调了在癫痫发生模型中区分抗惊厥与抗癫痫发生作用的必要性，并为未来研究设计提供了重要参考（如给药途径、剂量优化、脑内浓度监测等）。