FAM120A作为膀胱癌中前颗粒蛋白/EphA2致癌轴中新效应因子的功能特性研究

《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》：Functional characterization of FAM120A as a novel effector in the progranulin/EphA2 oncogenic axis in bladder cancer

　　

摘要

背景

膀胱癌是美国最致命的疾病之一，2026年预计将有84,530例新发病例和17,870例死亡病例。生长因子progranulin与多种人类疾病相关，包括额颞叶痴呆、免疫反应以及癌症。我们的研究显示，在膀胱癌中，progranulin及其信号受体EphA2会推动肿瘤细胞的迁移、侵袭以及体内肿瘤的形成，因此它是肿瘤发生过程中的关键通路。不过，progranulin/EphA2作用的具体分子机制仍不明确。

方法

通过蛋白质组学方法研究了progranulin依赖性的EphA2相互作用网络。分别利用免疫组化技术和免疫印迹法检测了膀胱癌组织微阵列中的FAM120A或EphA2蛋白水平，以及膀胱癌细胞系中的FAM120A蛋白表达情况。通过西方免疫印迹法检测了progranulin诱导的AKT和ERK1/2的激活情况。采用共免疫沉淀法和邻近连接试验检测EphA2与FAM120A之间的相互作用。此外，还通过免疫荧光法观察了EphA2与FAM120A的共定位情况以及F-actin细胞骨架的重排情况。最终通过慢病毒shRNA技术、伤口愈合实验、细胞迁移与侵袭实验、球形细胞形成实验、软琼脂克隆形成实验、细胞毒性实验以及体内异种移植模型，研究了FAM120A的生物学功能。

结果

通过蛋白质组学分析，我们发现了新的progranulin依赖性EphA2相互作用蛋白，其中包括FAM120A——这是一种在致癌通路中可能起作用的支架蛋白。我们确认，在progranulin刺激下，EphA2与FAM120A的相互作用会增强，且FAM120A在膀胱癌组织中的表达水平也会上升。进一步研究表明，FAM120A对于progranulin诱导的AKT和ERK1/2激活、膀胱癌细胞系的克隆形成能力、伤口愈合能力、迁移能力、侵袭能力以及3D球形细胞形成都起着关键作用。此外，FAM120A还是细胞脱离附着生长以及在体内形成肿瘤所必需的。同时，敲低FAM120A后会提高膀胱癌细胞对顺铂治疗的敏感性。从机制上来看，FAM120A的缺失会通过ERK1/2和RhoA依赖性途径抑制progranulin诱导的F-actin细胞骨架重排，而且FAM120A缺失还会抑制progranulin诱导的RhoA激活。

结论

发现FAM120A是具有致癌作用的progranulin依赖性EphA2相互作用蛋白，这一发现为了解progranulin/EphA2信号通路提供了新的视角，同时也为膀胱癌的治疗带来了新的潜在靶点。此外，FAM120A的表达可能可作为膀胱癌的生物标志物，具有诊断价值，或许还有预后判断的意义。