《Clinical Autonomic Research》：Cutaneous alpha-synuclein deposition informs autonomic function in individuals with early-stage multiple system atrophy
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目的多系统萎缩（MSA）是一种进行性神经退行性疾病，以自主神经衰竭、帕金森综合征和小脑性共济失调为特征。皮肤神经中的磷酸化α-突触核蛋白（phosphorylated α-synuclein）已成为一种有前景的生物标志物，但纵向研究仍然有限。本研究评估了皮肤α
目的多系统萎缩（MSA）是一种进行性神经退行性疾病，以自主神经衰竭、帕金森综合征和小脑性共济失调为特征。皮肤神经中的磷酸化α-突触核蛋白（phosphorylated α-synuclein）已成为一种有前景的生物标志物，但纵向研究仍然有限。本研究评估了皮肤α-突触核蛋白沉积随时间的变化、其与自主神经功能障碍的关联，以及其与种子扩增试验（SAA）结果的一致性。方法研究人员对17名很可能的多系统萎缩（probable MSA）参与者进行了为期12个月的随访，包括临床评估、后颈部和远端大腿区域的皮肤活检、标准化体位生命体征测量以及脑脊液（CSF）生物标志物采集。通过免疫荧光显微镜对磷酸化α-突触核蛋白沉积进行定量，并与自主神经测量指标和种子扩增试验（SAA）结果进行相关性分析。结果皮肤α-突触核蛋白沉积从基线到12个月随访时增加。总沉积量与体位性收缩压下降（p=0.80, p=0.0001）以及体位性低血压问卷（OHQ）和复合自主神经症状评分（COMPASS-31）的较高评分相关。后颈部沉积与自主神经的关联性强于远端大腿沉积。未发现与整体疾病严重程度或神经丝轻链（NfL）水平存在关联。两名种子扩增试验（SAA）结果阴性的参与者在皮肤活检中显示出磷酸化α-突触核蛋白。结论在本队列中，皮肤磷酸化α-突触核蛋白随时间增加，并与早期突触核蛋白病中的客观体位性低血压和自主神经症状负担相关。皮肤活检可作为支持诊断、监测进展和分层临床试验参与者的微创工具。
本研究探讨了皮肤磷酸化α-突触核蛋白沉积在早期多系统萎缩（MSA）患者中的临床意义，重点关注其随时间的变化、与自主神经功能的关联以及与其它生物标志物的一致性。多系统萎缩（MSA）是一种进行性神经退行性疾病，其特征是神经元和少突胶质细胞内异常积聚磷酸化α-突触核蛋白（phosphorylated α-synuclein），形成广泛分布的胶质细胞胞浆内包涵体（glial cytoplasmic inclusions），这是其组织学标志。α-突触核蛋白聚集的病理改变伴随多系统变性，包括黑质、纹状体、小脑、脑桥、延髓和橄榄核的神经元丢失、反应性胶质增生和萎缩。临床表现为帕金森综合征、自主神经衰竭和小脑性共济失调。由于多系统萎缩（MSA）临床表现和预后存在变异性，亟需能够辅助诊断并准确追踪疾病症状进展的生物标志物。一般认为，α-突触核蛋白的纤维状聚集体在症状出现前数年就已形成。无论病理遵循“身体优先”还是“脑优先”的传播模式，磷酸化α-突触核蛋白均存在于外周。因此，在周围组织中识别磷酸化α-突触核蛋白已成为多系统萎缩（MSA）以及其他突触核蛋白病（包括帕金森病（PD）和路易体痴呆（DLB））的一种有前景的诊断工具。最近的研究强调了皮肤磷酸化α-突触核蛋白不仅能够确认突触核蛋白病的存在，还有助于区分诊断亚型。除了诊断，外周神经中α-突触核蛋白沉积的定量也可能成为反映症状学信息的关键工具。对帕金森病（PD）患者的研究已显示α-突触核蛋白浓度与Valsalva动作反应之间存在关联，证明了皮肤活检在向临床医生提供自主神经功能信息方面的潜力。同样，在多系统萎缩（MSA）和帕金森病（PD）患者队列中，磷酸化α-突触核蛋白水平与临床残疾量表、疾病严重程度和认知能力相关。尽管取得了进展，但对皮肤α-突触核蛋白的价值和重要性的认识仍受限于横断面研究方法。为了在这些发现的基础上深入研究，研究人员旨在确定皮肤α-突触核蛋白沉积是否随时间变化，以及这些变化是否具有临床意义。这项研究是在“多系统萎缩进展的生物标志物”（bioMUSE）自然史研究中进行的，旨在评估皮肤磷酸化α-突触核蛋白作为早期多系统萎缩（MSA）疾病进展的外周生物标志物的效用。
研究人员使用的主要关键技术方法包括：样本来源于bioMUSE自然史研究队列，在范德比尔特大学医学中心招募了17名很可能的多系统萎缩（probable MSA）参与者。方法包括：1) 在基线和12个月随访时，从后颈部和远端大腿区域进行皮肤穿刺活检，并采用双重标记免疫荧光染色法，使用全轴突标志物PGP 9.5和抗磷酸化α-突触核蛋白抗体，通过共聚焦显微镜定量磷酸化α-突触核蛋白沉积，并计算复合评分；2) 在每个访视点进行标准化的体位生命体征测量（包括卧位和立位血压），以评估体位性低血压；3) 采集脑脊液（CSF）并测量神经丝轻链（NfL）水平；4) 采用种子扩增试验（SAA）分析脑脊液（CSF）样本，并与皮肤活检结果进行比较。统计分析使用Wilcoxon符号秩检验评估纵向变化，使用Spearman等级相关分析评估沉积与临床指标及生物标志物的关联，并采用错误发现率（FDR）校正多重比较。
研究结果如下：
α-突触核蛋白检测与纵向变化：通过Wilcoxon符号秩检验发现，所有17名参与者在基线和12个月随访时均检测到磷酸化α-突触核蛋白。总沉积量（后颈部和远端大腿活检部位复合评分之和）从基线（6.6±4.4）到12个月（7.7±4.2）显著增加（p=0.0384）。后颈部沉积量从3.1±2.6增至3.8±2.4（p=0.0792），远端大腿沉积量从3.5±2.9增至3.9±2.5（p=0.2926）。
与临床评估的相关性：Spearman相关分析显示，在基线时，总沉积量与体位性收缩压（SBP）下降值（ρ=0.80, p=0.0001）和舒张压（DBP）下降值（ρ=0.67, p=0.004）强相关，且该结果通过了FDR校正（q<0.05）。在12个月时，总沉积量与体位性低血压问卷（OHQ）评分（ρ=0.58, p=0.01）和复合自主神经症状评分（COMPASS-31）评分（ρ=0.56, p=0.02）呈正相关，但未通过FDR校正（q=0.07和0.08）。按部位分析显示，后颈部沉积与自主神经症状的关联性强于远端大腿。未发现总沉积量与统一多系统萎缩评定量表（UMSARS）评分、神经保护帕金森叠加综合征自然史量表（NNIPPS-PPS）评分或计时起走测试（TUG）评分等整体疾病严重程度指标存在显著相关性。
与生物流体标志物的关联：总α-突触核蛋白沉积与脑脊液（CSF）或血浆神经丝轻链（NfL）水平在整个队列中无显著关联。在多系统萎缩（MSA）亚组中，观察到基线脑脊液（CSF）神经丝轻链（NfL）与总α-突触核蛋白沉积之间存在中等程度的负相关（ρ=-0.62, p=0.055），但未达到统计学显著性。
在讨论部分，研究指出，最有力的发现是α-突触核蛋白沉积与体位性血压下降之间的强相关性，这为外周病理与自主神经衰竭之间的联系提供了客观的生理学证据。皮肤α-突触核蛋白可能追踪自主神经功能障碍，且与自主神经症状问卷评分的关联（尽管未通过FDR校正）也支持其作为自主神经功能障碍替代标志物的潜力。关于种子扩增试验（SAA）结果不确定的诊断意义，研究提到两名种子扩增试验（SAA）阴性但皮肤活检显示磷酸化α-突触核蛋白沉积的参与者，强调了外周组织取样在诊断模糊或前驱期突触核蛋白病中的补充价值。在混合突触核蛋白病队列中，α-突触核蛋白沉积与体位性血压下降的关联在整个队列中均可观察到，支持其作为跨突触核蛋白病自主神经功能障碍外周生物标志物的作用。研究未发现皮肤α-突触核蛋白沉积与整体疾病严重程度或神经丝轻链（NfL）之间存在显著关联，提示外周α-突触核蛋白聚集可能不直接反映整体临床损害或中枢轴索损伤，两者可能代表不同的生物学过程。研究结论部分翻译如下：在本队列中，皮肤磷酸化α-突触核蛋白负荷在12个月随访期间增加，并且与客观的体位性低血压以及自主神经症状严重程度相关。这些发现表明，皮肤活检可能作为一种微创工具，用于追踪外周α-突触核蛋白病理，并可能补充现有的早期诊断、疾病监测和突触核蛋白病临床试验分层方法。需要更大规模的研究来证实这些发现。
