《Frontiers in Nutrition》：6-gingerol modulates lipid metabolism, insulin resistance, and inflammation in NAFLD: evidence from a preclinical meta-analysis
背景：非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一个重大的全球健康问题，且缺乏有效的药物治疗。6-姜辣素是生姜的主要生物活性化合物，在实验研究中显示出代谢和肝脏保护潜力；然而，其总体疗效尚未被系统量化。目的：评估6-姜辣素在动物模型中对NAFLD相关结局的影响，并探讨异质性的潜在来源。方法：按照PRISMA指南对对照动物研究进行了系统评价和荟萃分析。检索了多个数据库以识别相关研究。使用随机效应模型计算标准化均数差（SMD）及其95%置信区间（CI）。根据物种、剂量和治疗持续时间进行了预设的亚组分析，并通过敏感性分析评估结果的稳健性。结果：共纳入8项研究。6-姜辣素显著改善了人体测量指标、肝脏和循环脂质谱、肝酶以及葡萄糖代谢参数。在部分研究中，还观察到了对炎症介质和脂肪因子的有益影响。尽管存在中至高度异质性，但在所评估的主要结局领域中均观察到有利效应。探索性亚组分析提示，治疗持续时间、剂量和物种可能导致研究间变异；然而，几个亚组层内研究数量较少，无法就效应修饰得出确切结论。敏感性分析显示，剔除单项研究后，合并估计值的总体方向未发生实质性改变。结论：在NAFLD动物模型中，6-姜辣素与多项代谢和肝脏结局的有利变化相关。然而，由于研究数量有限、异质性显著以及方法学报告不完整，应谨慎解读这些发现。需要进一步开展标准化的临床前和临床研究。系统评价注册：https://www.crd.york.ac.uk/PROSPERO/view/CRD420261290223，标识号CRD420261290223。
1 引言
6-姜辣素是源自生姜（Zingiber officinale）的主要生物活性酚类化合物，被广泛认为是生姜药理特性的主要介质。该天然产物表现出多种多效性生物学作用，包括已充分记录的抗氧化和抗炎效应，以及对代谢稳态的调节作用。这些多方面的特性支持了6-姜辣素作为解决以脂质失调、氧化应激和慢性低度炎症为特征的代谢紊乱的潜在候选药物的研究兴趣。
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已成为全球慢性肝脏病理的主要病因，与肥胖、胰岛素抵抗和心血管代谢风险升高密切相关。其发病机制是一个复杂的多击过程，涉及肝脏脂肪变性、胰岛素信号受损、氧化损伤和促炎级联反应的相互作用。这些相互关联的机制共同驱动从单纯脂肪变性向更严重的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）和纤维化的转变。尽管进行了广泛研究，NAFLD的有效药物干预措施仍然稀缺，这促使人们对能够同时靶向多种致病途径且具有良好安全性的生物活性天然产物持续产生兴趣。
近年来，大量临床前研究评估了6-姜辣素在多种饮食或遗传诱导的NAFLD动物模型中的疗效。虽然许多对照研究报告了组织病理学特征和代谢参数的改善，但研究结果存在异质性，随实验模型、物种、给药方案和治疗持续时间的不同而有很大差异。因此，这些治疗效应的一致性和幅度尚未被系统量化。此外，所报告的机制见解往往零散且不一致，阻碍了对6-姜辣素如何在体内调节疾病相关通路的统一理解，并阻碍了这些发现的转化。
为解决这一空白，研究人员开展了一项对照动物干预研究的系统评价和荟萃分析。目标是定量评估6-姜辣素在临床前NAFLD模型中对关键结局领域（包括肝脏脂肪变性、脂质谱、肝损伤生物标志物以及葡萄糖/胰岛素抵抗指数）的疗效。此外，旨在对纳入研究中报告的机制信号进行叙述性综合，以构建其作用的更完整图景。通过整合和严格评估现有临床前证据，本工作旨在阐明6-姜辣素的总体治疗潜力，确定实验异质性的关键来源，并提供基于证据的总结，以指导未来标准化的临床前研究并为转化研究的设计提供信息。
2 材料与方法
2.1 方案注册与报告标准
本系统评价和荟萃分析按照2020年系统评价和荟萃分析首选报告项目（PRISMA）声明进行。审查方案已前瞻性注册于国际前瞻性系统评价注册库（PROSPERO），注册号为CRD420261290223。使用PRISMA 2020流程图记录研究选择过程。
2.2 检索策略
研究人员进行了全面的文献检索，以评估6-姜辣素在NAFLD实验模型中效应的对照动物干预研究。检索了PubMed/MEDLINE、Embase、Web of Science核心合集和Cochrane对照试验中心注册库（CENTRAL），检索时间从建库至2026年1月21日。详细的PubMed检索策略作为代表性示例在表1中提供，其余数据库的完整检索策略见补充表1-3。
检索策略。未施加语言或出版日期限制。手动筛选纳入研究和相关综述的参考文献列表以识别额外符合条件的研究。
2.3 纳入标准
2.3.1 研究设计
在本综述中，NAFLD被用作涵盖NAFLD和NASH实验模型的统称。符合纳入条件的为对照体内动物干预研究。
2.3.2 动物模型
符合条件的研究采用NAFLD或NASH的体内动物模型，包括饮食诱导模型（例如高脂饮食、高脂/高果糖饮食、果糖富集饮食或蛋氨酸-胆碱缺乏饮食）。任何物种或品系、任何性别和任何年龄均符合条件，前提是NAFLD/NASH已建立并得到组织学和/或生化证据支持。
2.3.3 干预和对照
感兴趣的干预措施为6-姜辣素作为单一疗法在体内给药，无论剂量、制剂、给药途径（例如口服灌胃、饮食或饮水混合物、或注射）、给药频率或相对于NAFLD诱导的时间（预防性或治疗性设计）如何。符合条件的对照包括接受溶媒/安慰剂的NAFLD模型动物、未治疗的NAFLD对照，或不含6-姜辣素的相同饮食/饮水。如果6-姜辣素与其他活性化合物共同给药且无法分离其独立效应，或使用未明确鉴定和定量6-姜辣素的生姜提取物或混合物，则排除研究。
2.3.4 结局
研究报告至少一个NAFLD相关结局且具有干预组和对照组可提取的定量数据，则符合条件。符合条件的结局包括人体测量指标、脂质代谢指标（肝脏和/或血清）、肝损伤酶、葡萄糖代谢和胰岛素抵抗参数、氧化应激标志物、炎症介质以及与脂质代谢、炎症或氧化应激通路相关的信号分子。
2.4 研究选择
所有检索到的记录导入参考文献管理软件，筛选前去除重复项。两名评审员根据预定义的纳入和排除标准独立筛选标题和摘要，然后对潜在符合条件的研究进行全文评估。记录全文阶段的排除原因。分歧通过讨论解决，必要时由第三名评审员裁决。研究选择过程使用PRISMA 2020流程图总结。
2.5 数据提取
数据提取由两名评审员使用预试验的标准化提取表独立进行。提取的信息包括研究特征、动物和模型细节、干预和对照特征以及定量结局数据（组水平均值、离散度度和样本量）。当结局数据仅以图形形式呈现时，由两名评审员使用数字绘图数字化软件独立从图中提取数值，分歧通过讨论解决。必要时，使用标准公式将均数标准误（SEM）或置信区间转换为标准差。当一项研究包含多个6-姜辣醇剂量组共享一个共同对照组时，为避免对照组重复计数和违反独立性假设，仅保留一个干预组用于主要定量综合。根据预设方案，预先基于剂量水平选择最高剂量组，且不参考观察到的结果，从而在研究中提供一致的组选择规则。该组选择策略的潜在影响在敏感性分析中进一步检验，如2.7节所述。
2.6 偏倚风险评估
纳入研究的偏倚风险由两名评审员使用动物实验系统评价中心（SYRCLE）偏倚风险工具独立评估。每个领域根据报告的方法学细节判断为低、高或不明确的偏倚风险。分歧通过共识或第三方评审员裁决解决。在解释合并结果时考虑偏倚风险评估。
2.7 统计分析
所有荟萃分析均使用随机效应模型进行，以考虑临床前动物实验固有的预期研究间异质性，包括物种、NAFLD诱导方法、给药方案和结局评估的差异。对于连续结局，效应量以标准化均数差（SMD）及95%置信区间表示。选择SMD是因为纳入研究在动物物种和品系、基线结局范围、实验室评估方法以及某些终点的报告单位或标准化程序方面存在差异。因此，即使某些结局以名义上相似的单位报告，也不能假设绝对平均差在所有研究中一致可比。因此，使用SMD允许在异质性临床前实验中以共同的 dimensionless 尺度表达治疗效果。
使用Cochran’s Q检验评估统计异质性，并使用I
2统计量量化。仅对三项或更多独立研究报告的结局进行定量综合。氧化应激相关结局在多项研究中进行了评估，但评估了不同的生物标志物，且没有单一标志物由至少三项独立研究报告。因此，这些结局未进行定量合并。
进行预设亚组分析以探讨异质性的潜在来源，包括动物物种、6-姜辣素剂量和治疗持续时间，当数据足以进行分层分析时。鉴于符合条件临床前研究数量有限，某些亚组层基于单项研究；这些分析被视为探索性并谨慎解读。未进行元回归，因为每个结局贡献的独立研究少于10项。在这种情况下，元回归的统计功效有限，可能产生不稳定或虚假的关联。因此，将异质性探索限制在预设亚组分析中。
对至少五项研究的结局进行敏感性分析，以评估合并估计值的稳健性。研究数量较少的结局因统计稳定性有限而未进行敏感性分析。此外，为评估主要组选择策略的稳健性，进行了一项敏感性分析，将报告多个6-姜辣素剂量研究中的最高剂量组替换为最低剂量组，而仅含单一治疗剂量的研究保持原样。统计显著性定义为双侧P < 0.05。
3 结果
3.1 研究选择
文献检索共获得121条记录（119条来自电子数据库，2条来自其他来源）。去除43条重复后，76条记录通过标题和摘要筛选。此阶段排除37条记录。对39篇报告全文进行资格评估，其中31篇因以下原因被排除：会议摘要（n=2）、临床研究（n=2）、综述文章（n=19）、内容不相关（n=8）以及与本综述无关的结局（n=2）。没有记录因检索失败被排除。最终，8项研究符合预定义纳入标准，并被纳入定性综合和荟萃分析。研究选择过程总结于PRISMA 2020流程图（图1）。
3.2 研究特征
在8项纳入研究中，4项在中国进行，2项在韩国，1项在印度尼西亚，1项在伊朗；均使用NAFLD/NASH啮齿动物模型，包括大鼠、小鼠和金黄叙利亚仓鼠。8项研究共纳入138只动物。在所有实验中，6-姜辣素作为单一疗法给药，并与适当的NAFLD/NASH模型对照比较。主要研究和干预特征总结于表2。
3.3 偏倚风险评估
使用SYRCLE偏倚风险工具评估偏倚风险，结果见补充图1、2。总体而言，纳入研究的特征为低或不明确的偏倚风险，没有领域被判断为高风险。大多数担忧源于方法学细节报告不足，而非明确方法学缺陷的证据。不完整结局数据和其他偏倚在所有纳入研究中持续被判断为低风险。选择性报告在纳入研究中也被评估为低风险，因为未发现报告结局与研究目标之间的明显差异。相比之下，分配隐藏、盲法（检测偏倚）和随机结局评估在大多数研究中因报告有限而被评为不明确风险。随机序列生成、基线特征、盲法（实施偏倚）和随机饲养显示出混合判断，部分研究报告了充分方法，其余仍不明确。总体而言，纳入研究的内部有效性主要受限于关键方法学程序报告不足。
3.4 6-姜辣素在NAFLD动物模型中的总体效应
在纳入研究中，定量综合表明6-姜辣素改善了实验动物的多个NAFLD相关结局领域。与NAFLD/NASH对照相比，6-姜辣素与人体测量指数（体重、肝脏重量和肝脏指数）降低、肝脏和循环脂质谱改善、肝损伤酶降低以及葡萄糖代谢和胰岛素抵抗标志物的有利变化相关。机制终点进一步支持促炎介质和脂肪生成信号减少，以及脂肪因子的有利调节。经常观察到显著的研究间异质性，可能反映了物种/品系、NAFLD诱导方法、给药方案和治疗持续时间的差异。因此使用预设亚组和敏感性分析来探索异质性并检验稳健性。
3.5 人体测量结局
荟萃分析显示，6-姜辣素显著改善了NAFLD动物模型的人体测量指标。与NAFLD对照相比，6-姜辣素降低了体重（8项研究；SMD -2.88，95%CI ?5.18至-0.58；P=0.014），具有显著异质性（I
2=92.5%，P<0.001）。肝脏重量也降低（5项研究；SMD -5.62，95%CI ?8.47至-2.77；P<0.001；I
2=87.1%，P<0.001）。肝脏指数在治疗动物中显著降低（7项研究；SMD -3.90，95%CI ?5.08至-2.72；P<0.001），具有中度异质性（I
2=60.5%，P=0.019）。总体而言，这些发现表明体重和肝脏质量相关指数显著降低，尽管效应幅度在研究间存在差异。
3.6 脂质谱
合并分析表明，6-姜辣素给药后肝脏和循环脂质参数显著改善。肝脏甘油三酯显著降低（6项研究；SMD -6.86，95%CI ?10.25至-3.47；P<0.001；I
2=90.0%，P<0.001），肝脏总胆固醇水平也降低（6项研究；SMD -3.16，95%CI ?5.53至-0.79；P=0.009；I
2=90.3%，P<0.001）。循环脂质谱观察到类似益处，血清甘油三酯降低（6项研究；SMD -5.26，95%CI ?6.74至-3.78；P<0.001；I
2=60.3%，P=0.027），总胆固醇降低（6项研究；SMD -4.07，95%CI ?7.00至-1.13；P=0.007；I
2=93.9%，P<0.001），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）降低（4项研究；SMD -9.16，95%CI ?14.39至-3.93；P=0.001；I
2=91.9%，P<0.001），游离脂肪酸（FFA）降低（3项研究；SMD -3.53，95%CI ?5.22至-1.84；P<0.001；I
2=71.6%，P=0.029）。相反，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平升高（5项研究；SMD 3.77，95%CI 1.16-6.37；P=0.005；I
2=91.7%，P<0.001）。在所有肝脏和循环脂质结局中观察到显著异质性。然而，这些脂质参数合并效应的总体方向仍然有利。
3.7 肝功能检查
6-姜辣素治疗与肝损伤生化标志物改善相关。与对照相比，治疗动物ALT水平较低（4项研究；SMD -4.71，95%CI ?8.36至-1.07；P=0.011），具有显著异质性（I
2=89.5%，P<0.001）。AST同样降低（4项研究；SMD -4.24，95%CI ?6.89至-1.59；P=0.002；I
2=85.2%，P<0.001）。
3.8 葡萄糖代谢和胰岛素抵抗
6-姜辣素给药改善了葡萄糖稳态和胰岛素抵抗指数。FBG降低（4项研究；SMD -3.56，95%CI ?5.58至-1.55；P=0.001），具有显著异质性（I
2=81.1%，P=0.001）。循环胰岛素水平也降低（5项研究；SMD -3.58，95%CI ?4.68至-2.47；P<0.001），具有中度异质性（I
2=52.4%，P=0.078）。HOMA-IR显著改善（4项研究；SMD -4.62，95%CI ?6.18至-3.05；P<0.001），具有中度异质性（I
2=55.8%，P=0.079）。总之，这些结果支持6-姜辣素对全身葡萄糖调节和胰岛素敏感性的有利影响。
3.9 炎症和代谢调节分子
机制荟萃分析提示，6-姜辣素调节炎症细胞因子、脂肪生成相关信号和脂肪因子。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）降低（3项研究；SMD -5.71，95%CI ?9.69至-1.74；P=0.005；I
2=87.4%，P<0.001），白细胞介素-6（IL-6）同样降低（3项研究；SMD -6.76，95%CI ?11.97至-1.55；P=0.011；I
2=90.8%，P<0.001）。6-姜辣素降低了脂肪酸合酶（FAS）表达（3项研究；SMD -5.25，95%CI ?6.86至-3.64；P<0.001），异质性低（I
2=32.3%，P=0.228）。脂联素升高（3项研究；SMD 11.85，95%CI 3.72-19.97；P=0.004），具有显著异质性（I
2=93.3%，P<0.001），而瘦素降低（3项研究；SMD -5.75，95%CI ?7.11至-4.39；P<0.001），无异质性可检测（I
2=0.0%，P=0.776）。总体而言，这些发现表明炎症和脂肪生成信号以及脂肪因子谱的协调改善，尽管效应幅度存在差异。
3.10 亚组分析
鉴于大多数结局观察到的显著异质性，进行了预设亚组分析以探讨研究间变异的潜在来源。基于剂量、治疗持续时间和物种的亚组分析详细结果见表3-5。
对于基于剂量的亚组分析，研究被分类为高剂量（≥100 mg/kg/day）或低剂量（<100 mg/kg/day）。按剂量分层与多个结局的较低I
2值相关。特别是，脂联素的I
2值为0%，肝脏指数、血液甘油三酯和HOMA-IR的I
2值较低。然而，由于几个层内研究数量较少，这些描述性变化应谨慎解读。对于其他几个结局，包括肝脏重量、肝脏甘油三酯、肝脏总胆固醇和HDL-C，异质性仍然显著。这些发现表明剂量可能有助于治疗效应的变异，但不能完全解释观察到的异质性。
对于治疗持续时间，研究被分类为长持续时间（≥8周）或短持续时间（<8周）。按治疗持续时间分层与比其他分层更广泛的结局中较低的I
2值相关。在一些治疗持续时间层中，肝脏重量、肝脏甘油三酯、HDL-C和空腹血糖的I
2值为0%。然而，由于相应层包含的研究非常少，这些值不应被解读为真实同质性的证据。其他结局，如血液甘油三酯、肝脏总胆固醇和胰岛素，也显示异质性显著降低。这些描述性发现表明治疗持续时间可能有助于研究间变异。
按物种进行的亚组分析也与部分结局的较低I
2值相关。按物种分层与几个终点的I
2值为0%相关，包括体重、肝脏指数、肝脏总胆固醇、血液甘油三酯和胰岛素。然而，这些发现基于小而失衡的亚组层，应谨慎解读。相比之下，其他结局如肝脏甘油三酯和FBG的异质性仍然相对较高。这些描述性发现表明物种差异可能有助于异质性，尽管其解释受限于各亚组研究数量少且不平衡。
总体而言，剂量、治疗持续时间和物种可能导致观察到的研究间异质性。治疗持续时间分层在描述性上与比剂量或物种分层更多的结局中较低的I
2值相关。然而，几个亚组层仅包含一项或几项研究，且小而失衡。因此，I
2值的降低（包括0%值）不应被解读为真实同质性或明确效应修饰的证据。这些亚组分析应被视为探索性和假设生成性的。几个结局仍存在残余异质性，表明其他因素，如NAFLD诱导模型、实验设计和结局评估方法的差异，也可能导致研究间变异。
3.11 敏感性分析
对具有足够研究数量的结局进行了敏感性分析，包括体重、肝脏重量、肝脏指数、肝脏甘油三酯、肝脏总胆固醇、血液甘油三酯、血液总胆固醇、HDL-C和胰岛素。留一分析显示，所有结局的合并效应总体方向和统计显著性均保持不变，表明没有单项研究对结果产生不成比例的影响。尽管在某些情况下观察到效应大小的微小变化，但这些变化并未实质性影响总体结论。
未对任何结局评估发表偏倚，因为每项分析中可用研究少于10项。漏斗图和Egger’s或Begg’s检验等统计检验在小样本荟萃分析中被认为不可靠且功效不足。
在具有多个干预剂量的研究中，将最高剂量治疗组替换为最低剂量治疗组并未实质性改变合并结果。合并效应的总体方向在人体测量指数、脂质代谢、葡萄糖代谢、肝功能和炎症/代谢标志物中保持一致。
4 讨论
4.1 主要发现
在本系统评价和荟萃分析中，研究人员综合了6-姜辣素在NAFLD实验模型中效应的临床前证据。总体而言，研究结果表明，6-姜辣素给药可能与多个NAFLD相关领域的改善相关，包括人体测量、代谢和肝脏结局。这些效应伴随部分纳入研究中炎症介质、脂肪生成信号分子和脂肪因子的有利调节。
总体而言，合并分析提示在评估的结局领域中均存在有利效应。尽管动物物种、NAFLD诱导方法、剂量和治疗持续时间存在差异，但纳入研究中观察到的效应总体方向似乎大致相似。然而，鉴于研究数量有限和显著的研究间异质性，应谨慎解读这些发现。同时，观察到的异质性强调了模型和设计相关因素的影响，并突出了未来动物研究中更大标准化的必要性。
肝脏脂质积累和肝酶的改善与全身代谢参数（包括葡萄糖稳态和胰岛素抵抗）的有利变化平行。这种模式提示6-姜辣素的作用超越局部肝脏作用，涉及全身代谢调节。机制结局并非在所有研究中统一报告，仅在部分实验中可用，表明当前发现应被解读为与机制信号的关联，而非明确的通路水平证据。
本荟萃分析总结了6-姜辣素在NAFLD模型中效应的可用动物证据。尽管在多个结局领域观察到有利变化，但有限的证据基础和一致的机制报告限制了机制和转化解释。
4.2 机制发现和背景证据
本节区分纳入研究中报告的机制证据与更广泛实验文献衍生的背景证据。前者包括定量合并结局和叙述性总结的发现，而后者用于解释生物学合理性和生成假设。来自资格集外研究的证据未纳入定量综合，不应被视为本荟萃分析确立的机制。
4.2.1 纳入NAFLD研究的机制证据
机制终点仅在部分纳入研究中报告，且不如主要代谢结局一致。FAS、TNF-α、IL-6、脂联素和瘦素至少有三项独立研究可用，可进行定量综合。氧化应激相关结局更异质，并进行叙述性检查。
合并分析显示6-姜辣素治疗后FAS表达降低。该结果基于Xia等人、Liu等人和Tzeng等人的研究。FAS表达降低与肝脏甘油三酯和总胆固醇水平的降低平行。这些结局方向的一致性提示肝脏脂质合成抑制可能有助于脂肪变性改善。然而，可用研究未评估相同的上游信号分子，无法从合并数据中识别共同通路。TNF-α和IL-6在6-姜辣素给药后也降低。两项分析均基于三项研究，且存在显著异质性。这些发现支持炎症活性降低，但该反应的幅度随实验环境变化。由于纳入研究未一致测量通路水平炎症标志物，这些细胞因子结果不能用于将效应归因于特定信号级联。
脂肪因子发现来自部分不同的实验集。在Sarrafan等人、Hong等人和Tzeng等人的研究中，脂联素升高而瘦素降低。这些变化与更广泛代谢分析中较低的胰岛素浓度和改善的HOMA-IR同时发生。因此，它们与全身代谢调节的改善相容，而非仅肝脏反应。脂联素和瘦素的变化是否直接促进胰岛素敏感性改善未被检验，无法从当前数据推断中介作用。
氧化应激无法以同样方式评估。研究间生物标志物不同，且没有单个氧化应激标志物由三项独立实验报告。然而，Liu等人报告6-姜辣素治疗后氧化应激相关指标改善。该观察提供支持性证据，但仍为单项研究发现而非合并估计。图7呈现了纳入研究中报告的机制和代谢信号。图中所示连接旨在组织这些发现，并不表明已证明各结局之间的因果关系。
4.2.2 更广泛实验文献的背景证据
来自资格集外研究的证据为解释纳入NAFLD研究中识别的机制信号提供了额外生物学背景。这些数据不属于定量综合部分，且不确立相同通路介导了合并效应。在年龄相关肝脏脂肪变性模型中，6-姜辣素被报告调节脂肪生成和脂肪酸氧化，同时改善线粒体功能和氧化应激。这些发现为本荟萃分析中观察到的较低FAS表达和肝脏脂质水平提供了合理的生物学背景。然而，实验环境不同，可用证据未显示共同上游通路在纳入NAFLD模型中运作。
氧化和炎症调节也可能重叠。He等人报告6-姜辣素在高脂血症小鼠中激活Nrf2并减少炎症损伤。Nrf2通过HO-1和NQO1等下游效应器调节细胞抗氧化反应，并与涉及SOD、CAT和GPx的更广泛抗氧化酶系统功能相关。这些防御可能减少氧化损伤并限制线粒体ROS积累。该框架与纳入研究个体报告的氧化应激相关观察以及TNF-α和IL-6的合并降低一致。这仍为背景解释：Nrf2激活在符合条件研究中评估不够一致无法综合，且细胞因子发现单独无法识别炎症减少的通路。
除肝脏氧化还原和炎症反应外，外部研究还提示6-姜辣素可能影响脂肪组织。在高脂饮食诱导肥胖小鼠中，Cheng等人发现治疗后脂肪细胞肥大和增生改善。Gunawan等人随后在代谢综合征大鼠模型中报告脂肪细胞因子和胰岛素抵抗的变化。这些研究使脂肪组织功能改变成为合并脂联素升高和瘦素降低的合理解释。它们未证明此处包含的NAFLD实验中脂肪-肝脏中介作用。
纤维化相关终点，包括TGF-β、α-SMA和胶原沉积，未在纳入NAFLD研究中系统评估，因此不符合定量综合条件。6-姜辣素可能的抗纤维化效应仍不确定。在心脏模型中，6-姜辣素被报告限制病理重塑和促纤维化信号。在肺纤维化模型中也观察到胶原沉积减少。两项发现均来自本综述范围之外的器官和疾病环境。它们为未来NAFLD研究检查TGF-β信号、α-SMA表达和细胞外基质沉积提供了理由，但不应被解读为6-姜辣素在纳入实验中预防或逆转肝纤维化的证据。
关于mTOR的更广泛文献也可能有助于将Liu等人报告的LKB1/AMPK信号背景化。mTOR密切参与对细胞能量和营养供应变化的代谢反应，其转录功能可能在营养过剩条件下促进代谢重塑。此类相互作用为解释纳入研究中肝脏脂质、葡萄糖调节、炎症标志物和脂肪因子的并发变化提供了可能框架。将6-姜辣素与完整LKB1-AMPK-mTOR轴（尤其是mTOR成分）直接联系的证据仍然有限；因此该框架应被视为假设生成性的，而非本荟萃分析的结论。
4.3 异质性来源和亚组发现
本荟萃分析中许多合并结局观察到显著异质性，这是临床前动物研究的常见特征。此类异质性可能反映动物研究固有的方法学和生物学变异，包括物种和品系差异、NAFLD诱导方法、给药方案、治疗持续时间和结局评估方案。这些因素可显著影响基线疾病严重程度和对干预的反应性，从而导致效应量估计的变异。
为探索异质性的潜在来源，根据动物物种、6-姜辣素剂量和治疗持续时间进行了预设亚组分析。尽管某些结局的个体亚组内研究数量有限，但治疗效应在亚组类别间通常显示相似方向趋势。分层与多个结局的较低I
2值相关，包括某些层中I
2值为0%。然而，由于几个层仅包含一项或几项研究，这些描述性变化不应被解读为真实同质性或明确效应修饰的证据。
描述性地，一些较高剂量和较长持续时间层显示较大效应估计或较低I
2值。然而，由于几个亚组层仅包含一项或几项研究且小而失衡，这些模式无法确立剂量-反应或持续时间-反应关系。同样，小亚组层中I
2值为0%不应被解读为真实同质性的证据。无法从当前证据中得出关于物种、剂量或治疗持续时间作为效应修饰因素的明确结论。因此，这些亚组发现应被视为探索性和假设生成性的。
尽管效应大小存在异质性，但大多数结局的效应总体模式大致相似。该模式提示在多样化实验环境中均观察到有利效应，尽管效应大小存在定量差异。然而，某些亚组内研究数量有限限制了对治疗反应调节因素的明确结论。
未来临床前研究将受益于NAFLD模型、给药策略和结局措施的更大标准化，以及实验设计和方法学细节的透明报告。此类改进将促进治疗效应的更精确估计，并增强动物荟萃分析的可解释性和可重复性。
4.4 转化研究意义和临床相关性
NAFLD仍然是未满足临床需求的领域，批准的药物选择有限，且无普遍有效疗法。在此背景下，具有多靶点代谢效应和良好安全性的生物活性天然化合物作为潜在辅助或预防策略日益受到关注。本荟萃分析提供了临床前证据的定量综合，表明6-姜辣素可能在NAFLD动物模型中发挥广泛代谢益处，支持其作为转化研究候选药物的持续研究。
观察到的肝脏脂质积累、肝酶、葡萄糖代谢以及炎症和脂肪因子相关标志物的改善与NAFLD的关键病理生理特征一致。鉴于该疾病复杂且多因素的性质（限制了单靶点干预的有效性），此类多领域效应尤为重要。从转化角度看，这些发现表明6-姜辣素可能作为多靶点治疗方法的一部分而非针对单一通路的独立药物具有前景。
然而，在将这些发现外推至人类疾病之前，必须考虑几个因素。动物研究中使用的6-姜辣素剂量通常超过典型饮食暴露，纯化6-姜辣素在人体中的药代动力学、生物利用度和长期安全性仍未完全表征。此外，动物模型和实验设计的异质性使效应量向临床环境的直接转化复杂化。这些因素突出了精心设计的剂量探索、药代动力学和安全性研究，随后进行良好对照临床试验的必要性。
重要的是，本综合有助于通过识别对6-姜辣素最响应的结局领域和机制信号来定义未来研究的优先事项。标准化临床前实验结合临床相关给药方案、严格方法学报告和协调结局措施将实质性加强转化证据基础。最终，高质量临床前数据与早期临床研究的整合对于确定动物模型中观察到的代谢益处能否有意义地转化为NAFLD患者至关重要。
4.5 优势和局限性
本研究具有多项优势。首先，据研究人员所知，这是首个定量综合6-姜辣素在NAFLD动物模型中效应的系统评价和荟萃分析。审查方案前瞻性注册于PROSPERO，研究按照PRISMA 2020进行和报告，增强了方法学透明度并降低了选择性报告风险。其次，全程应用随机效应模型并使用标准化均数差以适应纳入研究中结局测量、报告量表和基线结局范围的变异。第三，评估了广泛的NAFLD相关结局领域，允许对人体测量、代谢、肝脏和机制信号进行综合评估。最后，使用SYRCLE工具系统评估偏倚风险，并进行预设亚组分析以探索异质性的潜在来源。
还应承认几个局限性。首先，个体结局的纳入研究数量相对较少，特别是机制终点，这限制了合并估计的精确性和机制推断的强度。其次，许多结局观察到显著异质性，反映了动物物种和品系、NAFLD诱导方法、给药方案、给药途径、治疗持续时间和结局评估方法的差异。尽管进行了预设亚组分析，但几个亚组层仅包含一项或几项研究，且小而失衡。因此，这些亚组发现应被视为探索性和假设生成性的，而非效应修饰的明确证据。基于极少研究的I
2值降低（包括0%值）也应谨慎解读。此外，每个结局贡献的研究数量有限排除了可靠的元回归分析，这些分析将功效不足且易产生不稳定或虚假关联。
NAFLD诱导模型的变异也可能导致观察到的异质性。大多数纳入研究使用高脂饮食模型，主要重现肥胖相关代谢功能障碍和胰岛素抵抗。相比之下，含果糖模型，包括高果糖和联合高脂/高果糖饮食，促进肝脏从头脂肪生成，并可能诱导更广泛的代谢紊乱。这些病理生理差异可能导致了本荟萃分析中观察到的研究间异质性。给药途径可能是研究间变异的另一个潜在来源。口服灌胃通常提供更精确的剂量递送，而饮食补充可能因动物食物消耗差异导致实际摄入量的更大变异。此类异质性是临床前动物荟萃分析的公认特征，源于实验设计和疾病建模的固有变异。然而，它可能损害合并估计的稳健性和普遍性。
第三，方法学报告往往不完整，导致多个领域偏倚风险不明确；此类局限性也可能导致观察到的异质性和效应估计的不确定性。
几个合并SMD异常大。尽管这些估计可能部分反映6-姜辣素在实验性NAFLD中的真实生物学效应，但几个方法学和实验因素也可能有贡献。由于SMD相对于研究内标准差表达平均差，高度同质的动物种群和严格控制实验条件可能产生较小的组内标准差，从而导致较大的标准化效应。许多临床前实验中使用的较小样本量可能进一步产生组均值和标准差的不精确和不稳定估计。动物物种和品系、NAFLD诱导方法、基线疾病严重程度、剂量、治疗持续时间、实验室测定和结局标准化程序的差异也可能导致效应幅度的变异。此外，不能排除小研究效应和阳性发现的选择性发表，因为每个结局贡献的研究数量不足以进行可靠的发表偏倚评估。SMD也不如绝对平均差直接可解释。因此，应更重视合并效应的方向和不确定性，而非SMD的绝对幅度，且这些估计不应被解读为可直接转化的临床效应大小。
此外，当单项研究评估多个6-姜辣素剂量时，根据预设方案仅将最高剂量组纳入主要分析。该方法避免了共享对照组引起的非独立性，并在研究中提供一致的组选择规则；然而，它也可能增加了一些合并估计的幅度。额外的最低剂量敏感性分析在评估的结局领域产生了相似的总体效应方向，支持方向性发现的稳健性。尽管如此，由于选择最高剂量组导致主要合并估计幅度的某些膨胀不能完全排除。
最后，所有纳入研究均为临床前性质，这限制了当前发现的直接临床转化。关键的转化局限性涉及动物剂量与可实现人类暴露的相关性。尽管在纳入动物研究中观察到有利效应，但给药剂量可能无法通过习惯性饮食生姜消费轻易实现。例如，使用美国食品药品监督管理局推荐体表面积转换方法，100 mg/kg的小鼠剂量约相当于人类8.1 mg/kg，或70 kg成人约570 mg/天。然而，此类转换仅提供近似估计，未考虑物种间吸收、代谢、分布和消除的差异。该问题尤其相关，因为姜酚类化合物（包括6-姜辣素）口服后经历广泛的II相结合，导致未结合母体化合物的全身暴露相对较低。因此，未来研究应在观察到的临床前效应转化为人类NAFLD研究之前，纳入药代动力学评估、制剂优化和临床
