胃癌单细胞RNA测序揭示巨噬细胞来源的C1q作为诊断标志物

《Cancer Science》：scRNA-Seq in Gastric Cancer Reveals Macrophage-Derived C1q as a Diagnostic Marker

　　

肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）和补体系统在重塑慢性炎症微环境和驱动恶性转化中发挥关键作用。尽管已在多种肿瘤类型中鉴定出C1QA+ TAMs，但其在胃癌（GC）中的作用仍未被探索。研究人员对3例未接受治疗患者的配对肿瘤组织和癌旁组织进行了单细胞RNA测序（scRNA-seq），以绘制巨噬细胞异质性图谱。为评估C1q的临床和转化价值，研究人员对100例GC样本进行了免疫组织化学（IHC）检测，并通过ELISA检测了来自多中心队列的240例患者血浆和100例GC组织中的C1q浓度。此外，研究人员利用体外迁移实验研究了C1q介导的THP-1来源巨噬细胞对GC细胞恶性行为的影响。对56,151个单细胞的转录组分析成功鉴定出一个独特的促炎亚群：C1QA+ TAMs。IHC染色表明，C1q和CD163在病变组织中高度共表达，且其表达升高与患者预后不良显著相关。多中心血浆分析显示，循环C1q水平升高显著提高了临床诊断准确性。体外功能实验证实，C1q显著促进M2巨噬细胞极化，从而加速GC细胞迁移。研究人员首次鉴定并功能验证了C1QA+ TAM亚群是微环境重塑的关键驱动因素。C1q是巨噬细胞极化的重要介质，并有望成为新型非侵入性早期诊断生物标志物。

胃癌（GC）是全球高发恶性肿瘤，多数患者确诊时已处于晚期，5年生存率低于5%。肿瘤微环境（TME）中的肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）通过免疫抑制、基质重塑等机制促进肿瘤进展。单细胞RNA测序（scRNA-seq）可在单细胞水平解析肿瘤异质性。尽管C1QA+ TAMs已在多种肿瘤中被鉴定，但其在胃癌中的作用尚不清楚。为此，研究人员利用scRNA-seq、免疫组织化学（IHC）、ELISA及体外功能实验，系统探讨了C1q在胃癌中的临床价值与功能。该研究成果发表于《Cancer Science》。

主要技术方法包括：对来自东南大学附属中大医院和武威肿瘤医院的3例初治胃癌患者的配对肿瘤及癌旁组织进行scRNA-seq（10× Genomics平台）；对100例胃癌组织样本进行IHC染色；通过ELISA检测多中心队列（240例患者血浆及100例胃癌组织）中的C1q浓度；利用TCGA-STAD和GEO数据库进行转录组验证；体外采用THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞，结合Transwell迁移实验评估C1q对M2极化和胃癌细胞迁移的影响，并通过慢病毒敲低C1QA进行功能验证。

研究结果如下：3.1 单细胞测序鉴定出胃癌中11种主要细胞类型：基于56,151个高质量单细胞，聚类为24个亚群并注释为11种细胞类型，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞等。3.2 髓系细胞异质性：肿瘤微环境中髓系细胞呈现显著异质性，补体基因高表达的Mφ₄亚群具有组织驻留和促肿瘤M2样特征。3.3 肿瘤相关巨噬细胞的