糖基化飞燕草素，天然抗氧化剂，在胶质母细胞瘤细胞中功能性调节COX-2/PGE2轴并下调MDR1

《Antioxidants》：Glycosylated Delphinidins, Natural Antioxidants, Functionally Modulate the COX-2/PGE2 Axis and Downregulate MDR1 in Glioblastoma Cells

　　

多药耐药（MDR）表型由MDR1/P-糖蛋白（P-gp）等转运体介导，是胶质母细胞瘤（GB）治疗中的关键障碍。天然抗氧化剂如糖基化飞燕草素——一种富含于智利浆果，特别是原生物种Aristotelia chilensis（maqui）中的花青素——已成为调节炎症和癌症相关通路的生物活性化合物。在此背景下，调节炎症相关信号通路（包括COX-2和NF-κB）是克服化疗耐药的一种潜在策略。在这项研究中，研究人员使用ELISA、RT-qPCR、Western blot和荧光素酶报告基因分析，评估了飞燕草素-3-葡萄糖苷（DEL-3）对U87-MG和GBM38胶质母细胞瘤细胞以及NOD-SCID异种移植模型中COX-2/PGE2轴、MDR1表达和化疗药物敏感性的影响。DEL-3减少了PGE2的产生，与COX-2/PGE2通路的功能性调节一致，并在转录和蛋白水平上下调了MDR1表达，这与启动子活性降低一致。在功能上，DEL-3与MDR1底物化疗药物联合治疗增强了U87-MG细胞的细胞毒性。尽管DEL-3在NOD-SCID异种移植模型中没有显著减少肿瘤生长，但治疗组肿瘤中MDR1表达降低，表明该靶点在体内受到调节。总之，这些发现表明，DEL-3作为一种天然抗氧化剂，调节炎症相关机制并下调MDR1，从而可能增强胶质母细胞瘤细胞对MDR1底物化疗药物的敏感性。

多药耐药（MDR）是胶质母细胞瘤（GB）化疗失败的核心障碍，其重要机制之一是MDR1/P-糖蛋白（P-gp）等ATP结合盒（ABC）转运蛋白对化疗药物的外排作用。近年研究表明，炎症相关信号通路，特别是环氧化酶-2（COX₂）及其催化产物前列腺素E2（PGE₂），可能通过调节MDR1表达参与化疗耐药。核因子κB（NF-κB）作为氧化还原敏感转录因子，可调控COX₂表达。天然抗氧化剂糖基化飞燕草素广泛存在于智利浆果中，尤其是原生物种Aristotelia chilensis（maqui）富含飞燕草素-3-葡萄糖苷（DEL-3），具有抗炎和抗肿瘤活性。然而，DEL-3能否通过COX₂/PGE₂轴调控MDR1并改善GB化疗敏感性尚不明确。为此，研究人员开展了本研究，成果发表于《Antioxidants》。

研究人员在U87-MG和患者来源的GBM38（间充质干细胞样）细胞及NOD-SCID异种移植模型中，评估了DEL-3对COX₂/PGE₂轴、MDR1表达和化疗药物敏感性的影响，并利用临床转录组数据进行相关性分析。主要技术方法包括：使用MTT法评估细胞活力；ELISA检测PGE₂水平；RT-qPCR检测ABCB1、COX₂等基因表达；Western blot检测蛋白水平；双荧光素酶报告基因检测MDR1启动子活性；在NOD-SCID小鼠皮下接种U87-MG细胞建立异种移植模型，给予DEL-3处理后通过免疫组化评估MDR1表达；药物协同分析采用SynergyFinder+的Bliss模型。此外，利用CGGA数据库（225例GB患者）进行转录组相关性分析。

研究结果如下：

3.1 DEL-3在胶质母细胞瘤细胞中减少PGE2产生并调节COX-2通路

通过ELISA检测，DEL-3处理U87-MG和GBM38细胞48小时后，PGE₂产生显著减少，尤其在GBM38中作用更明显。尽管DEL-3在U87-MG中上调COX₂ mRNA，在GBM38中下调COX₂ mRNA，但Western blot显示总COX₂蛋白及糖基化形式未显著改变。这提示DEL-3可能通过影响COX₂酶活性或下游合成步骤来抑制PGE₂，而非简单调节其表达。

3.2 糖基化飞燕草素降低胶质母细胞瘤细胞中MDR1表达

RT-qPCR结果显示，DEL-3在24小时和48小时均