《Behavioural Brain Research》：Ibogaine as a Double-Edged Sword: Developmental Cardiotoxicity and Neurobehavioral Alterations in Zebrafish
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伊波加因作为物质使用障碍的潜在治疗手段日益受到关注；然而，其临床应用仍受限于有据可查的心脏毒性，且其在早期发育中的安全性尚不明确。这里，研究人员使用斑马鱼胚胎和幼鱼作为转化模型，研究了伊波加因的发育心脏毒性和神经行为效应。伊波加因在低至100 ng/mL的浓度
伊波加因作为物质使用障碍的潜在治疗手段日益受到关注；然而，其临床应用仍受限于有据可查的心脏毒性，且其在早期发育中的安全性尚不明确。这里，研究人员使用斑马鱼胚胎和幼鱼作为转化模型，研究了伊波加因的发育心脏毒性和神经行为效应。伊波加因在低至100 ng/mL的浓度下诱导早期心动过缓，并在500 ng/mL浓度下诱导心包水肿，表明心功能和形态学双重受损。同时，伊波加因破坏了神经行为终点，包括胚胎运动活动增加、幼鱼运动模式改变和探索行为改变。值得注意的是，行为改变出现在明显形态毒性更低的浓度，提示神经发育终点可能是伊波加因暴露更敏感的指标。这些发现表明伊波加因在早期发育过程中影响多个生理系统，并强调了其在脆弱人群中使用相关的潜在风险。鉴于其治疗兴趣日益增长，研究人员的这些结果强调了需要仔细进行安全性评估，特别是关于发育暴露和心脏风险。
伊波加因（ibogaine）是一种源自加蓬植物Tabernanthe iboga的吲哚生物碱，传统上用于Bwiti宗教仪式和治疗目的。自20世纪90年代以来，伊波加因因其抗成瘾特性而受到广泛关注，尤其在减少阿片类药物使用障碍患者的戒断症状、渴求感和复发方面表现出潜力。然而，目前大多数人类证据来自非对照环境下的病例系列和观察性研究，缺乏严格的临床对照试验。更重要的是，伊波加因已知具有心脏毒性，包括QT间期延长（通过抑制hERG钾通道），这是导致其在非医疗环境中使用后出现死亡病例的主要原因。此外，伊波加因在子宫内或通过母乳暴露对胎儿和新生儿的致畸性和心脏风险尚不清楚。斑马鱼（Danio rerio）作为一种与人类约70%基因同源的脊椎动物模型，具有与人类hERG同源的zERG基因，并拥有高度保守的神经发育过程和神经调节系统（如5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺），以及下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能等效物HPI轴。因此，斑马鱼成为研究药物发育毒性和神经行为效应的理想工具。然而，目前关于伊波加因发育神经毒性的数据仍然缺乏。为了解决这一知识空白，研究人员开展了本研究，旨在通过斑马鱼胚胎和幼鱼模型，系统评估伊波加因的发育心脏毒性和神经行为效应，为早期生命暴露的潜在风险提供临床前证据。该论文发表在《Behavioural Brain Research》。
研究人员使用斑马鱼胚胎和幼鱼，从巴西圣保罗大学药学院斑马鱼设施获得胚胎。主要关键技术方法包括：鱼胚胎毒性（FET）测试（遵循OECD指南，监测24-96 hpf的发育参数）、形态测量分析（使用DanioScope软件定量测量体长、眼面积和心包面积）、心率测量（48 hpf视频记录，计算每分钟心跳数）、尾部卷曲试验（26 hpf记录3分钟，分析爆发活动、爆发持续性、爆发活动效率指数EAEI、不活动/活动比）、视觉运动反应（VMR）试验（144 hpf，在光照-黑暗交替刺激下测量总距离、平均速度、爆发事件参数）、趋触性试验（144 hpf，测量进入内区次数和在外区时间），以及神经行为NOAEC的确定（10-100 ng/mL浓度范围）。统计方法包括单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验，以及混合效应模型。
研究结果分为以下部分：
3.1 通过FET和形态测量评估伊波加因的发育毒性：FET测试中，伊波加因在100-1000 ng/mL浓度下未引起明显的致死性、致畸性或亚致死性参数（如色素沉着、眼发育）改变。但通过定量形态测量，研究人员发现从500 ng/mL起，幼虫心包面积显著增大，表明心包水肿，这一变化在视觉检查中不易察觉，强调了定量终点的重要性。
3.2 伊波加因在斑马鱼胚胎中引发心动过缓：通过心率测量，研究人员发现伊波加因以浓度依赖性方式降低心率，即使在最低测试浓度100 ng/mL下也观察到明显的心动过缓。这表明伊波加因同时影响心脏形态和功能，具有双重心脏毒性。
3.3 伊波加因诱导斑马鱼胚胎运动亢进：通过尾部卷曲试验，研究人员发现伊波加因从100 ng/mL起浓度依赖性增加胚胎爆发活动、爆发持续性和爆发活动效率指数，同时降低不活动/活动比。这些结果表明胚胎运动模式改变，表现为爆发驱动的亢进表型。
3.4 伊波加因增加斑马鱼幼虫运动活动并改变探索行为：通过VMR试验，研究人员发现伊波加因从75 ng/mL起增加幼虫总距离和平均速度，并在500和1000 ng/mL下增加爆发事件、爆发距离和爆发持续时间，表明运动亢进。趋触性试验显示，从100 ng/mL起幼虫外周偏好降低（减少趋触性），从500 ng/mL起区域穿越增加，提示探索行为增强。然而，由于运动亢进与趋触性改变同时发生，尚无法明确区分焦虑相关效应与运动活动改变。
3.5 确定神经行为改变的未观察到不良反应浓度（NOAEC）：通过细化10-100 ng/mL范围，尾部卷曲试验显示从50 ng/mL起出现爆发持续性、EAEI和活动/不活动比改变；VMR试验显示从75 ng/mL起主要在暗周期出现总距离和爆发参数增加。因此，研究人员将伊波加因的发育神经毒性NOAEC确定为25 ng/mL。
讨论部分：研究人员总结指出，伊波加因在斑马鱼早期发育中诱导心包水肿和心动过缓，支持了临床中关于人类心脏改变的证据。与先前研究相比，本研究发现神经行为改变（如运动亢进）出现在低于形态毒性的浓度，提示神经发育终点是更敏感的暴露指标。先前研究报道了伊波加因的焦虑样或抗焦虑效应，而本研究中观察到的运动亢进和探索行为改变可能与代谢差异有关，因为斑马鱼可能将伊波加因代谢为去甲伊波加因（noribogaine），后者具有κ-阿片受体拮抗作用，可能产生抗焦虑效应。但两种物质均与心脏风险相关。研究结论部分翻译如下：总体而言，研究人员的发现表明，伊波加因破坏了斑马鱼胚胎和幼鱼的心脏和神经行为发育，产生从心动过缓和心包水肿到活动亢进、运动活动改变和探索行为变化的浓度依赖性效应。25 ng/mL NOAEC的确定凸显了斑马鱼对伊波加因的敏感性，并强调了发育暴露的潜在风险，有必要进一步研究其心脏毒性和神经毒性的机制。
