《Animals》：Dietary Supplementation of Protease and/or Amylase Improves Growth Performance, Digestive Function, and Intestinal Health of Weaned Piglets
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共选用96头26日龄断奶仔猪，随机分为4组，每组3个重复：（1）CON组（基础日粮），（2）PRS组（补充蛋白酶），（3）AMS组（补充淀粉酶），（4）蛋白酶和淀粉酶联合组（PAS组）（补充蛋白酶和淀粉酶）。与CON组相比，AMS组降低了料重比（F/G）（p
共选用96头26日龄断奶仔猪，随机分为4组，每组3个重复：（1）CON组（基础日粮），（2）PRS组（补充蛋白酶），（3）AMS组（补充淀粉酶），（4）蛋白酶和淀粉酶联合组（PAS组）（补充蛋白酶和淀粉酶）。与CON组相比，AMS组降低了料重比（F/G）（p < 0.05）。此外，所有处理组均提高了粗脂肪（EE）消化率（p < 0.05）。PRS组和AMS组降低了血清尿素氮（UN）水平（p < 0.01）。PAS组提高了总蛋白（TP），并降低了总胆固醇（T-Cho）（p < 0.05）。补充PRS和/或AMS提高了血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。AMS组的IgM和IgG更高。此外，D-乳酸（D-Lactate）和二胺氧化酶（DAO）水平降低（p < 0.05）。PRS组粪便乙酸和戊酸水平升高（p < 0.05）。微生物群分析显示，补充PRS和/或AMS富集了有益菌，包括Anaerovoracaceae和Blautia。代谢组学分析显示，促进健康的差异代谢物，包括S-亚硝基谷胱甘肽（S-nitrosoglutathione）和犬尿喹啉酸（kynurenic acid），进一步富集，表明免疫调节和肠道稳态增强。综上，补充PRS和/或AMS可有效促进营养消化、肠道微生物群结构和代谢，并增强肠道屏障，从而改善断奶仔猪的生长性能。
本研究针对早期断奶仔猪消化系统发育不成熟、肠道屏障受损及微生物失调等关键问题，系统评估了日粮单独或联合补充蛋白酶（PRS）和淀粉酶（AMS）对断奶仔猪生长性能、消化功能、肠道屏障、微生物组成及代谢产物的影响，为缓解断奶应激提供实验依据，论文发表于《Animals》。
早期断奶虽能提高母猪繁殖效率，但会给仔猪带来严重生理挑战。断奶期间，仔猪同时经历与母猪分离、环境变化、日粮由母乳转为固体植物性饲料等多重应激，常导致采食量下降、营养吸收受损、肠道炎症及病原菌定植，进而引发腹泻和生长抑制。外源饲料酶可降解特定底物，弥补内源酶不足。蛋白酶能降解抗性蛋白，提高粗蛋白消化率；淀粉酶可加速淀粉水解，提供可消化能量。然而，关于热稳定蛋白酶和淀粉酶联合添加于断奶仔猪日粮的研究仍有限。因此，研究人员设计了为期42天的饲养试验，探究二者单独及协同作用的效果。
该研究选取96头26日龄杜洛克×长白×约克夏断奶仔猪（初始体重10.46 ± 0.16 kg），随机分为4组：CON组（基础日粮）、PRS组（基础日粮+150 mg/kg蛋白酶）、AMS组（基础日粮+133 mg/kg淀粉酶）、PAS组（基础日粮+蛋白酶和淀粉酶）。每组3个重复，每重复8头。试验采用酸不溶性灰分指示剂进行消化试验，通过试剂盒检测血清生化、抗氧化、免疫球蛋白和肠道通透性指标，用气相色谱分析粪便挥发性脂肪酸，通过16S rRNA基因V3–V4区测序分析微生物组成，并进行粪便非靶向代谢组学及Spearman相关性分析。
主要研究结果如下：
3.1 生长性能：与CON组相比，AMS组显著降低了料重比（F/G）（p = 0.027），而初始体重、最终体重、平均日增重和平均日采食量均无显著差异，表明淀粉酶可提高饲料利用率。
3.2 表观营养素消化率：所有酶处理组均显著提高粗脂肪（EE）消化率（p < 0.05），且存在PRS×AMS的交互作用；粗蛋白（CP）和粗纤维（CF）消化率未受显著影响，但PRS组有提高CP消化率的趋势（p = 0.067）。
3.3 血清生化指标：PRS和AMS单独补充均显著降低血清尿素氮（UN）（p < 0.001）；PAS组显著提高总蛋白（TP）并降低总胆固醇（T-Cho）（p < 0.05），提示蛋白质合成增强和脂质代谢改善。
3.4 抗氧化能力和免疫球蛋白：PRS和/或AMS补充显著提高血清总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）；AMS组显著提高IgM和IgG浓度，表明体液免疫状态增强。
3.5 肠道通透性和粪便挥发性脂肪酸：AMS显著降低血清D-乳酸，PAS组显著降低二胺氧化酶（DAO）活性，说明肠道屏障完整性得到改善；PRS组粪便乙酸和戊酸水平显著升高，多种挥发性脂肪酸受AMS主效应影响。
3.6 粪便微生物分析：各组α多样性无显著差异，但β多样性显示处理组微生物群落结构与CON组明显分离。在门水平，PRS组富集Patescibacteria；在科水平，各处理组富集Erysipelotrichaceae、Anaerovoracaceae、Monoglobaceae等；在属水平，富集了产丁酸和短链脂肪酸的有益菌如Blautia、Coprococcus、Senegalimassilia等，同时降低了Clostridium、Rikenellaceae_RC9_gut等潜在有害菌的相对丰度。
3.7 代谢组学分析：PCA及OPLS-DA显示各处理组代谢谱与CON组明显分离。差异代谢物主要富集于初级胆汁酸生物合成、鞘脂信号通路、不饱和脂肪酸生物合成等通路。健康相关代谢物如S-亚硝基谷胱甘肽、犬尿喹啉酸、岩芹酸等上调，而myotoxin A、aminopentol等有害代谢物下调。
3.8 微生物与代谢物相关性：Spearman分析显示，Coprococcus、Blautia等有益菌与健康相关代谢物（如犬尿喹啉酸、S-亚硝基谷胱甘肽）呈正相关，与有害代谢物呈负相关；而Rikenellaceae_RC9_gut和Prevotellaceae_NK3B31等有害菌则与健康代谢物负相关，与有害代谢物正相关。
讨论部分指出，AMS降低F/G而不增加采食量，说明其提高了养分利用效率。EE消化率提高可能与蛋白酶和淀粉酶促进脂质乳化或底物可及性有关。血清UN降低和TP升高表明氨基酸沉积和蛋白质合成增强。抗氧化和免疫能力改善可能源于外源酶水解释放的生物活性肽，这些肽可激活免疫相关信号通路。肠道通透性标志物降低以及VFAs含量增加，共同提示肠道屏障功能增强。微生物组和代谢组的改变表明，酶制剂能够重塑肠道菌群结构，富集产短链脂肪酸的有益菌，抑制潜在致病菌，并通过调节宿主代谢促进健康。然而，相关性分析不能确立因果关系，仍需进一步研究。
研究结论可翻译为：综上所述，日粮补充PRS和/或AMS可改善断奶仔猪的营养消化率、抗氧化能力、免疫功能、肠道屏障完整性和饲料效率，并伴随肠道微生物组成和粪便代谢谱的有利变化，表明肠道生态系统调节可能有助于观察到的生理益处。然而，由于本研究是在受控实验条件下进行的，其结果有必要在商业生产条件下进行验证。未来应整合宏基因组学、宏转录组学及靶向代谢组学方法，以阐明微生物-代谢物-宿主轴中潜在的机制性相互作用。
