用于可持续标签辅助液相肽合成技术的极性标签平台开发

《ACS Sustainable Chemistry & Engineering》：Development of a Polar Tag Platform for Sustainable Tag-Assisted Liquid-Phase Peptide Synthesis (TA-LPPS)

　　

摘要

标签辅助的液相肽合成技术（TA-LPPS）为解决固相肽合成中的瓶颈问题以及传统液相肽合成所需的漫长研发时间提供了潜在方案。现代TA-LPPS技术通过在肽链上连接疏水性烷基链，以便在每一步合成后便于提取或沉淀。然而，这些高度非极性的结构在合成过程中也容易发生自聚，并存在溶解性方面的问题。相比之下，最初关于TA-LPPS的报道中使用的标签来自分子量约为20,000 Da的极性多分散PEG链，这类标签能使肽在肽合成所需的极性有机溶剂中保持良好的溶解性。尽管如此，由于PEG聚合物的多分散性，使得带标签产品的LC-MS分析变得十分复杂，因此极性标签一直未被充分利用。在此，我们介绍了一种单分散的极性标签ADO₁₀，它是由一种名为2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙酸（AEEA）的廉价商业原料制得的。ADO₁₀采用了常规的Fmoc/t-Bu保护基团，从而大大简化了LC-MS反应监测过程。与水相提取或沉淀不同，ADO₁₀标签利用绿色溶剂中的特殊有机-有机液-液分离方法，既能快速实现相分离，又能有效去除杂质。基于这种极性TA-LPPS平台，已经可以实现多种生物活性肽的克级合成，其中包括Semaglutide的一种片段。此外，我们还证明了极性标签的优异溶解性有助于解决易聚集的肽类Aβ(25–35)在固相肽合成过程中遇到的难题。