经等离子体处理的过滤器能提高存活真菌孢子的回收率，便于后续培养和DNA分析

《Applied Microbiology and Biotechnology》：Plasma-modified filters improve recovery of viable fungal spores for culture and DNA analysis

　　

摘要

这项概念验证研究评估了经过等离子体处理的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）过滤器在收集真菌气溶胶以及后续培养和分子分析方面的应用。研究使用2-甲基-2-氧唑啉（POX）或全氟辛烷（PFO）对过滤器进行等离子体处理，以提高真菌孢子的附着率与回收率，其中以黑曲霉作为丝状真菌的代表，红酵母作为酵母类真菌的代表。在15升/分钟的流速下处理30分钟时，可达到最佳捕获效果；当使用4到5块菌落培养板所得的生物量达到38毫克时，过滤器便达到饱和状态。存活率测试表明，收集在PFO涂层及未涂层过滤器上的孢子仍具有萌发能力，而POX涂层则能抑制孢子再生，显示出其具有抗真菌表面效应。分子分析结果显示，14–16毫克的捕获生物量足以用于后续的DNA分析。通过PCR扩增内部转录间隔区（ITS）后，所有测试物种都能得到长度约为550个碱基对的清晰扩增产物。序列测定结果与GenBank中的参考序列相似度达99–100%，从而确认等离子体涂层并未影响DNA的质量、扩增效率或测序的完整性。这些研究结果表明，经过等离子体聚合物处理的PET过滤器是用于收集真菌气溶胶的有效工具，且适用于后续的培养和PCR分析，同时也为其在环境评估中的应用提供了可行的操作参数。

要点

• 经过等离子体处理的PET过滤器有助于实现真菌气溶胶的综合性分析。

• PFO涂层过滤器能够有效回收具有存活能力的真菌孢子。

• 回收到的真菌生物量适合用于PCR分析和ITS序列测定。

图形摘要