《Food Science & Nutrition》：Multi-Target Anti-Obesity Potential of Coula edulis Nut Extract in High-Fat Diet-Induced Obesity in Rats
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肥胖已知与血脂异常（dyslipidaemia）、心血管疾病、氧化应激、脂肪生成（adipogenic）和脂肪因子（adipokine）反应相关。研究人员在高脂饮食（HFD）喂养的肥胖Wistar大鼠中研究了Coula edulis坚果提取物（CEE）的抗肥胖
肥胖已知与血脂异常（dyslipidaemia）、心血管疾病、氧化应激、脂肪生成（adipogenic）和脂肪因子（adipokine）反应相关。研究人员在高脂饮食（HFD）喂养的肥胖Wistar大鼠中研究了Coula edulis坚果提取物（CEE）的抗肥胖效果。在四周的HFD喂养后，研究人员以两批次设计让大鼠口服（p.o.）该坚果提取物5周。第一批：正常对照组（仅ND）、肥胖对照组（仅HFD）、标准对照组（HFD + 0.03 g/kg b.w. Orlistat）以及提取物处理组1和2（分别为HFD + CEE1g/kg b.w.和HFD + CEE2g/kg b.w.）。第二批：正常对照组（仅ND）、肥胖对照组（仅ND）、标准对照组（ND + 0.03 g/kg b.w. Orlistat）以及提取物处理组1和2（分别为ND + CEE1g/kg b.w.和ND + CEE2g/kg b.w.）。在5周的提取物处理期间，第一批大鼠继续喂食HFD，而第二批大鼠则改为喂食正常饮食（ND）。研究人员测定了体重增加、摄食量、人体测量指标、血脂、心血管风险指数、胰腺脂肪酶活性、组织脂质含量、肝脏胆固醇生物合成、氧化应激指标、脂肪生成/脂生成基因的表达以及脂肪组织学。研究人员发现Coula edulis提取物可降低体重增加、肥胖指标、脂生成、胰腺脂肪酶活性、心血管危险因素、氧化应激以及PPAR-γ、C/EBP-α和SREBP-1c mRNA水平（p < 0.05）。总之，结果表明Coula edulis坚果提取物可通过调节脂质消化、胆固醇合成、氧化应激和脂肪生成/脂生成转录因子来减轻肥胖。
**论文解读**
**研究背景与问题**
肥胖及其相关合并症（如血脂异常、心血管疾病、氧化应激和脂肪组织功能障碍）已成为全球性公共卫生挑战。世界卫生组织数据显示，1975至2025年间肥胖人数增长三倍，2022年全球超18岁超重和肥胖人群分别超过22亿和6.5亿。在尼日利亚，2014年成人肥胖率高达64%，2023年该国肥胖人数超2000万，位列全球前十。高能量饮食（如糕点、冰淇淋、加工食品、精制碳水化合物和含糖饮料）的消费增加被认为是肥胖率上升的主要原因。现有抗肥胖药物（如西布曲明、奥利司他）虽有效，但伴有腹胀、油性斑点、腹泻、脂肪泻等副作用；新批准的洛卡色林、芬特明/托吡酯及纳曲酮/安非他酮等药物也面临临床副作用和经济成本高的问题。因此，寻找安全、易得、成本低且有效的天然植物产品、功能性食品和膳食辅助剂成为迫切需求。Coula edulis 坚果（又称非洲核桃）在赤道非洲被用于传统医学，其树皮粉末用于伤口愈合，树皮煎剂用于治疗贫血和增加食欲，种子富含黄酮类化合物（flavonoids）。前期未发表数据显示，Coula edulis 坚果乙醇提取物可通过改善全身转运和储存脂质来调节泊洛沙姆诱导的高脂血症大鼠的血脂异常。基于此抗高脂血作用及其高黄酮含量，有必要科学评估其对体重控制的作用及其在脂肪生成（adipogenesis）和肥胖相关低度慢性炎症与氧化应激中的影响，并阐明其脂质代谢的作用模式和分子机制。
**研究内容与结论**
研究人员采用高脂饮食（HFD）诱导肥胖Wistar大鼠模型，评估Coula edulis 坚果提取物（CEE）在两种剂量（1 g/kg和2 g/kg体重）下的抗肥胖效果，并设置两批实验：第一批在提取物处理期间继续喂食HFD，第二批将HFD替换为正常饮食（ND），以考察提取物在有无HFD条件下的体重控制效能。研究考察了体重增加、摄食量、人体测量指标（腹部围度、Lee指数、BMI）、血清脂质谱、心血管风险指数（动脉粥样硬化指数、动脉粥样硬化系数、心脏风险比）、胰腺脂肪酶活性、组织脂质含量（心脏、肝脏、脂肪组织）、肝脏胆固醇生物合成（HMG-CoA还原酶活性/甲羟戊酸比）、氧化应激指标（SOD、GPx、GSH、TBARS-MDA）、脂肪生成/脂生成相关基因（PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c）的表达以及脂肪组织组织学。结果显示，CEE显著降低了HFD诱导的体重增加（72.9%和92.2%）、腹部围度、Lee指数和BMI；改善了血清脂质谱（降低TC、TAG、LDL-c、VLDL-c，升高HDL-c）；降低了动脉粥样硬化指数、动脉粥样硬化系数和心脏风险比；抑制了胰腺脂肪酶活性（14.5%和30.5%）；减少了心脏、肝脏和脂肪组织中的总脂质、总胆固醇、甘油三酯和磷脂；抑制了肝脏HMG-CoA还原酶活性（降低胆固醇合成）；提高了抗氧化酶活性（SOD、GPx）和GSH水平，降低了MDA含量；下调了脂肪组织中PPARγ和C/EBPα mRNA表达以及肝脏中SREBP-1c mRNA表达；组织学观察显示脂肪细胞大小和数量减少。这些效果在HFD转换ND组中更为显著，表明提取物与低脂饮食协同作用。该研究发表在《Food Science》期刊。
**主要技术方法**
1. **高脂饮食诱导肥胖模型**：将64%商业大鼠颗粒、15%猪油、10%蔗糖、5%全脂奶粉、5%蛋黄粉、0.8%猪胆汁盐和0.2%氯化钠混合，能量较正常饮食高28.8%。
2. **生化分析**：使用Fortress试剂盒测定血清总胆固醇、HDL-c和甘油三酯；通过动力学法测定胰腺脂肪酶活性；采用Folch法提取组织脂质并测定总脂质、胆固醇、磷脂和甘油三酯；通过HMG-CoA/甲羟戊酸比值（TMAR）评估肝脏HMG-CoA还原酶活性。
3. **氧化应激评估**：测定脂肪组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性和还原型谷胱甘肽（GSH）水平，以及硫代巴比妥酸反应物（TBARS-MDA）含量。
4. **基因表达分析**：从肝脏和脂肪组织提取RNA，逆转录后通过常规PCR（聚合酶链式反应）检测PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA表达，以β-actin为内参，凝胶电泳后用Image J软件定量。
5. **组织学检查**：脂肪组织经福尔马林固定、石蜡包埋、切片后行苏木精-伊红（H&E）染色，观察脂肪细胞形态。所有动物实验均经尼日利亚卡拉巴尔大学基础医学科学学院动物研究伦理委员会批准（批准号：406BCM3225）。
**研究结果**
- **饮食组成与摄入**：HFD的碳水化合物和脂肪含量分别比正常饮食高20.6%和63.7%，蛋白质低36.5%，总代谢能高28.8%（p<0.05）。HFD组与正常对照组摄食量无显著差异，但能量摄入显著升高（p<0.05）。
- **肥胖诱导确认**：HFD喂养4周后，所有HFD组体重增加百分比均显著高于正常对照组（24.5%–48.8%），且Lee指数>310，腹部围度和BMI均显著升高（p<0.05），确认肥胖模型成功建立。
- **提取物对膳食摄入的影响**：在5周处理期间，HFD组与ND组摄食量无显著差异，但HFD组能量摄入显著高于ND组；将HFD替换为ND后能量摄入显著降低（p<0.05）。
- **提取物对体重和人体测量指标的影响**：与HFD肥胖对照组相比，1 g/kg和2 g/kg CEE分别使体重增加减少72.9%和92.2%（p<0.05），疗效优于奥利司他（63.6%）。ND组中，CEE进一步降低体重增加（62.7%和75.7%）。CEE显著降低腹部围度（12.4%和17.4%）、Lee指数（19.32%和14%）和BMI（47.7%和45%）（p<0.05）。
- **提取物对血清脂质谱和胰腺脂肪酶活性的影响**：CEE显著降低TC（45.6%和48.1%）、TAG（57.9%和48.1%）、LDL-c（67%和55.8%）、VLDL-c（21.8%和5.4%），升高HDL-c（18.9%和48.4%）（p<0.05）。动脉粥样硬化指数、系数和心脏风险比分别降低39.1%–69.6%、45.8%–63.9%和19.2%–26.7%（p<0.05），呈剂量依赖性。胰腺脂肪酶活性降低14.5%和30.5%（p<0.05）。
- **提取物对组织脂质、器官重量和HMG-CoA还原酶活性的影响**：CEE显著降低心脏、肝脏和脂肪组织中的总脂质（26.7%–70.5%）、总胆固醇（20.8%–65.2%）、甘油三酯（10.3%–47.1%），升高磷脂（62.6%–81.4%）（p<0.05）。绝对和相对脂肪组织重量分别降低71.6%和32.2%，心脏绝对重量降低23.4%（p<0.05）。HMG-CoA/甲羟戊酸比（TMAR）升高8.65%–9.52%，表明HMG-CoA还原酶活性受抑制，肝脏胆固醇合成从96.04%降至64.38%–62.21%（p<0.05），Pearson相关系数r=?0.637（p=0.05）。
- **提取物对氧化应激指标的影响**：CEE显著提高SOD活性（75.4%和93.6%）、GPx活性（10.3%和63.9%）和GSH水平（49.5%和37.7%），降低MDA含量（58.8%）（p<0.05），表明抗氧化防御增强。
- **提取物对脂肪生成/脂生成基因表达的影响**：CEE下调脂肪组织中PPARγ mRNA表达（6.0%和14.6%）、C/EBPα（26.2%和68.9%）和肝脏中SREBP-1c（85.9%和25.6%）（p<0.05）。ND组中进一步下调。
- **提取物对脂肪组织组织学的影响**：H&E染色显示，CEE处理组脂肪细胞大小和数量均小于肥胖对照组，提示脂肪生成受抑。
**讨论与结论**
讨论部分指出，CEE的抗肥胖作用可能源于其植物化学物质（如黄酮类、酚酸、不饱和脂肪酸、植物甾醇和生育酚类抗氧化剂）的单独、相加或协同作用。这些成分通过抑制胰腺脂肪酶减少膳食甘油三酯的消化吸收，通过抑制HMG-CoA还原酶降低肝脏胆固醇合成，通过下调PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c抑制脂肪细胞分化和肝脏脂生成，并通过提高SOD、GPx和GSH水平、降低MDA含量减轻氧化应激。组织学结果进一步证实了脂肪细胞体积和数量的减少。研究结论如下：本研究验证了Coula edulis 坚果提取物的抗肥胖潜力，其机制涉及减少脂质吸收、生物合成、储存、能量摄入、氧化损伤和炎症，同时增强能量消耗并调节前脂肪细胞分化和增殖。减少或停止高热量和饱和脂肪摄入可增强其效果。本研究的贡献总结于表S3a,b。
