摘要
间充质基质细胞在再生医学领域具有巨大潜力，这主要得益于其免疫调节作用。然而，由于缺乏足够标准化的效力检测方法，这些细胞的临床应用受到了限制。鉴于巨噬细胞是介导间充质基质细胞作用的关键细胞，以巨噬细胞为基底的检测方法有望成为评估间充质基质细胞产品活性的有效体外工具。本研究将犬源脂肪间充质基质细胞与人类THP-1和U937单核细胞系衍生的巨噬细胞、小鼠RAW264.7巨噬细胞以及原代人类巨噬细胞进行共培养。通过IL-4/IL-13刺激后，检测了THP-1和U937巨噬细胞的M2极化情况。并利用qPCR技术分析了促炎和抗炎标志物的mRNA表达水平。结果显示，ASCs的转孔共培养能以与模型及标志物相关的显著方式改变LPS诱导的炎症mRNA表达。其中，U937衍生的巨噬细胞对所检测的炎症转录本具有最稳定的抑制作用，而RAW264.7细胞则可用于检测特定炎症标志物；在所选刺激条件下，THP-1巨噬细胞能够抑制TNFA的表达，但无法抑制IL1B或PTGS2的表达。IL-4/IL-13在U937衍生的巨噬细胞中引起了IL10和TGFB1水平的适度变化，但这些变化在统计上并不显著，而在THP-1衍生的巨噬细胞中则未出现可重复的反应。在后续的U937共培养实验中，ASCs分泌的旁分泌因子在特定时间点改变了某些与M2相关的转录本。这些研究结果为利用巨噬细胞相关的转录检测方法作为比较不同巨噬细胞反应模型及检测犬源ASCs的抗炎旁分泌效应的早期工具提供了依据；同时，U937细胞被认为特别适合用于研究炎症极化现象，而RAW264.7细胞则适用于标准化筛选。
