《Biomedicine & Pharmacotherapy》：Diosmetin attenuates chronic unpredictable mild stress induced-depression-like behavior in mice via modulation of oxidative stress, neuroinflammation, and the gut–brain axis
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抑郁症是一种高发性情感障碍，目前的药物治疗常因疗效欠佳和不良反应而受到限制。香叶木素（diosmetin）是一种膳食黄酮类化合物，通过抗氧化和抗炎机制发挥神经保护作用；然而，其抗抑郁潜力尚未得到充分探索。研究人员在慢性不可预测轻度应激（CUMS）诱导的小鼠模型
抑郁症是一种高发性情感障碍，目前的药物治疗常因疗效欠佳和不良反应而受到限制。香叶木素（diosmetin）是一种膳食黄酮类化合物，通过抗氧化和抗炎机制发挥神经保护作用；然而，其抗抑郁潜力尚未得到充分探索。研究人员在慢性不可预测轻度应激（CUMS）诱导的小鼠模型中评估了香叶木素的抗抑郁样作用。为诱导抑郁样行为，雄性BALB/c小鼠被暴露于不同的应激方案。研究人员在持续应激暴露的同时，给予香叶木素（10、20和40?mg/kg，口服）治疗4周。行为学结果通过光声成像进行补充，随后对脑组织进行生化、分子和组织学分析。同时评估结肠组织的氧化应激和组织病理学变化，并分析粪便样本中的短链脂肪酸（SCFA）水平。CUMS暴露诱导了显著的抑郁样行为和认知缺陷，而香叶木素治疗显著减轻了这些变化。香叶木素降低了氧化应激（活性氧（ROS）和亚硝酸盐水平降低；还原型谷胱甘肽（GSH）水平升高），并上调了抗氧化标志物核因子E2相关因子2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）。它还抑制了神经炎症（诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）表达降低），抑制了凋亡（细胞色素c和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3水平降低），并恢复了脑源性神经营养因子（BDNF）水平。影像学结果显示脑血流动力学改善，组织学分析表明香叶木素治疗后神经元变性减少。此外，香叶木素改善了结肠氧化应激并恢复了改变的SCFA谱。总体而言，香叶木素表现出显著的抗抑郁样作用，这些作用与NRF2/HO-1抗氧化通路和NLRP3炎症小体通路的正常化、凋亡减少、神经营养信号改善以及SCFA水平恢复相关。这些发现表明，相互关联的通路可能有助于香叶木素的抗抑郁样作用，有必要进一步进行机制研究。
**论文解读：香叶木素通过调节氧化应激、神经炎症和肠-脑轴改善慢性应激诱导的抑郁样行为**
**1. 研究背景与意义**
抑郁症是一种高发性情感障碍，全球约3.32亿人受其影响，导致情绪低落、快感缺失、认知功能障碍及高自杀风险。现有抗抑郁药（如选择性5-羟色胺再摄取抑制剂）存在起效延迟、治疗抵抗和停药后复发等局限性，因此亟需开发更安全、多靶点的天然替代药物。香叶木素（diosmetin）是一种天然黄酮类化合物，广泛存在于柑橘类水果和药用植物中，已知具有抗氧化、抗炎、抗凋亡和神经保护作用，但其抗抑郁潜力及与肠-脑轴（gut–brain axis）相关机制尚不明确。本研究旨在通过慢性不可预测轻度应激（CUMS）诱导的抑郁小鼠模型，系统评估香叶木素的抗抑郁样作用，并探讨其潜在机制，包括氧化应激、神经炎症、凋亡、脑血流动力学及肠道短链脂肪酸（SCFA）的调节。论文发表在《Biomedicine》。
**2. 主要关键技术方法**
研究人员采用雄性BALB/c小鼠（来源：印度NIPER Guwahati中央动物设施），通过CUMS暴露10周建立抑郁模型，随后分组给予香叶木素（10、20、40 mg/kg，口服）治疗4周。关键方法包括：神经行为学测试（尾悬吊实验、强迫游泳实验、糖水喷雾实验、皮毛状态评分、T-迷宫实验）；活体光声-超声双模态成像（Vevo 3100 LAZR-X，评估脑氧饱和度（sO?）、光声信号强度和血红蛋白含量）；脑组织（前额叶皮层和海马）及结肠组织的生化检测（ROS、亚硝酸盐、GSH）；分子表达分析（ELISA检测TNF-α和IL-1β；Western blot检测NRF2、HO-1、BDNF、细胞色素c、裂解的caspase-3、iNOS、NLRP3）；组织学分析（H&E染色）；粪便SCFA谱分析（LC-MS/MS）。
**3. 研究结果**
**3.1 香叶木素改善CUMS诱导的神经行为缺陷**
与对照组相比，CUMS组小鼠在尾悬吊实验和强迫游泳实验中不动时间显著延长（P<0.001），糖水喷雾实验中理毛潜伏期延长、频率和持续时间减少（P<0.001），皮毛状态评分升高（P<0.001），T-迷宫自发交替率降低（P<0.001）。香叶木素中、高剂量（20、40 mg/kg）显著逆转上述行为异常（P<0.05至P<0.001），表明其改善抑郁样行为和认知障碍。
**3.2 香叶木素改善CUMS诱导的脑血流动力学降低**
光声成像显示，CUMS组小鼠脑氧饱和度（sO?）和光声信号强度显著低于对照组（P=0.04和P=0.006），血红蛋白含量虽下降但未达统计学意义。香叶木素高剂量显著提高sO?（P=0.03）和光声信号强度（P=0.01），提示其改善脑灌注和氧合作用。
**3.3 香叶木素逆转脑内氧化应激标志物**
CUMS组前额叶皮层和海马中ROS和亚硝酸盐水平显著升高（P<0.001），GSH水平显著降低（P<0.001），抗氧化蛋白NRF2和HO-1表达下调（P<0.05至P<0.01）。香叶木素中、高剂量显著降低ROS和亚硝酸盐，升高GSH，并上调NRF2和HO-1表达（P<0.05至P<0.001），表明其激活NRF2/HO-1抗氧化通路。
**3.4 香叶木素逆转脑内促炎反应并恢复神经营养信号**
CUMS组前额叶皮层和海马中IL-1β和TNF-α水平显著升高（P<0.05至P<0.001），NLRP3和iNOS蛋白表达上调（P<0.05至P<0.001），BDNF水平显著降低（P<0.01）。香叶木素各剂量（尤其是高剂量）显著降低IL-1β、TNF-α、NLRP3和iNOS水平，并上调BDNF表达（P<0.05至P<0.001），表明其抑制NLRP3炎症小体通路和神经炎症，恢复神经营养支持。
**3.5 香叶木素减轻脑内神经元凋亡**
CUMS组前额叶皮层和海马中细胞色素c和裂解的caspase-3蛋白表达显著升高（P<0.05至P<0.01）。香叶木素各剂量显著降低细胞色素c水平（P<0.05至P<0.01），中、高剂量降低裂解的caspase-3水平（P<0.05至P<0.001），表明其抑制线粒体介导的凋亡通路。
**3.6 香叶木素改善脑组织病理学改变**
H&E染色显示，CUMS组皮层和海马齿状回出现大量退化神经元和固缩核。香叶木素治疗（尤其是高剂量）后退化神经元和固缩核显著减少，提示神经元结构保护。
**3.7 香叶木素减轻结肠氧化应激、组织病理学改变并恢复SCFA谱**
CUMS组结肠组织中ROS和亚硝酸盐显著升高（P<0.001），GSH显著降低（P=0.01），H&E染色显示黏膜结构破坏和中性粒细胞浸润。香叶木素中、高剂量显著降低ROS和亚硝酸盐，高剂量升高GSH（P<0.05至P<0.001），并改善组织学损伤。SCFA分析显示，CUMS组粪便中甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、丁酸、2-乙基丁酸和己酸水平显著降低（P<0.01至P<0.001），香叶木素各剂量（尤其是中、高剂量）显著恢复上述SCFA水平（P<0.05至P<0.001）。Spearman相关性分析表明，SCFA水平与尾悬吊实验和强迫游泳实验的不动时间呈负相关，与T-迷宫表现呈正相关（P<0.05至P<0.001），提示SCFA恢复与行为改善相关。
**4. 讨论与结论**
讨论部分指出，香叶木素通过多通路协同作用发挥抗抑郁样效应：激活NRF2/HO-1抗氧化通路，抑制NLRP3炎症小体介导的神经炎症，减少线粒体凋亡（细胞色素c/裂解的caspase-3），恢复BDNF神经营养信号，并改善脑血流动力学。此外，香叶木素减轻结肠氧化应激和组织损伤，恢复SCFA水平，提示肠-脑轴参与其抗抑郁作用。本研究的局限性包括仅使用雄性小鼠、缺乏标准抗抑郁药对照、样本量较小、分子分析采用混合样本而非独立生物学重复，以及未进行微生物组分析和通路特异性干预。结论部分翻译如下：
总之，香叶木素在CUMS暴露小鼠中表现出显著的抗抑郁样作用，并与氧化应激、神经炎症、凋亡和SCFA改变的改善相关，支持其作为应激诱导的神经生物学功能障碍的多靶点候选治疗药物的潜力。
