《Virchows Archiv》：Pathologic and multi-omic characterization of de novo neuroendocrine carcinoma of the prostate: A single center experience
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原发性前列腺神经内分泌癌（NECa）是一种罕见、侵袭性强的恶性肿瘤，与治疗相关类型不同，其在分子层面仍缺乏充分表征。研究人员分析了六例病例，包括纯神经内分泌癌和与腺癌混合的形式，使用组织病理学、免疫组化、二代测序（NGS）和全基因组DNA甲基化谱分析。形态学上
原发性前列腺神经内分泌癌（NECa）是一种罕见、侵袭性强的恶性肿瘤，与治疗相关类型不同，其在分子层面仍缺乏充分表征。研究人员分析了六例病例，包括纯神经内分泌癌和与腺癌混合的形式，使用组织病理学、免疫组化、二代测序（NGS）和全基因组DNA甲基化谱分析。形态学上，神经内分泌癌显著的导管内延伸是一个常见且突出的特征。在混合肿瘤中，神经内分泌癌和腺癌成分共享致病性遗传改变和高度一致的DNA甲基化谱。研究人员观察到肿瘤抑制蛋白p53、RB和PTEN/AKT的频繁异常，反映了在治疗相关性神经内分泌癌中描述的分子特征，并与肿瘤行为相关。值得注意的是，p53免疫反应性的缺失模式代表了主要的异常表达模式。此外，在一例病例中检测到先前未报道的NRAS突变。总的来说，研究人员描述了六例原发性前列腺神经内分泌癌的形态学、遗传学和表观遗传学特征。这些发现如果在更大的患者队列中得到验证，将为原发性前列腺神经内分泌癌的生物学和组织发生提供新的见解，并可能为未来的诊断和治疗策略提供信息。
**论文解读：原发性前列腺神经内分泌癌的病理学与多组学特征**
**研究背景与问题**
前列腺癌（PCa）是男性第二大常见癌症，其中腺癌（AdCa）占95%以上，而神经内分泌癌（NECa）极为罕见（<1%），且多为治疗相关性（t-NECa），常见于雄激素剥夺治疗或新型雄激素受体（AR）靶向治疗后，作为肿瘤进展和耐药机制出现。原发性（de novo）NECa更为罕见，其发生率、临床病理特征及分子谱数据有限。目前，de novo NECa在分子层面仍缺乏充分表征，与t-NECa的生物学差异尚不明确，诊断准确性及治疗策略均受限于认知不足。为此，研究人员开展本研究，旨在通过多维度分析探索de novo NECa的形态学、遗传学及表观遗传学特征，为理解其组织发生和临床管理提供依据。该论文发表在《Virchows Archiv》。
**主要技术方法**
研究人员回顾性收集了2009年至2024年希腊Patras大学医院病理科电子档案中的前列腺癌病例，筛选出6例de novo NECa（占所有病例的0.2%），包括3例纯NECa和3例混合NECa/AdCa。主要技术方法包括：组织病理学评估（HE染色及免疫组化IHC，检测synaptophysin、chromogranin、CD56、AR、PSA、p53、Ki-67、PTEN、RB等标志物）；二代测序（NGS，采用Ion AmpliSeq? Colon and Lung Panel v2靶向热点区域，独立分析NECa与AdCa成分）；全基因组DNA甲基化分析（Illumina Infinium MethylationEPIC V2 BeadChip阵列，覆盖约935K CpG位点，经生物信息学流程进行质控和层次聚类）。样本来源于该院病理科存档石蜡包埋组织。
**研究结果**
**Clinical features**：6例患者平均年龄68岁，血清PSA均值3.0 ng/mL（纯NECa中仅1.1 ng/mL），多数病例为晚期（pT3bN1），提示侵袭性临床过程。
**Histological findings**：纯NECa中1例为大细胞神经内分泌癌（LCNECa），2例为小细胞癌（SCC）；混合肿瘤中2例为SCC伴AdCa，1例为SCC/LCNECa混合伴AdCa。所有AdCa成分均为高级别（ISUP PGG 4或5）。
**Morphological features**：NECa呈片状和结节状生长，SCC典型形态（中等大小核、细颗粒染色质、胞质稀少）及LCNECa特征（大核、不规则核膜、显著核仁）均被观察到。值得注意的是，5/6例出现NECa的导管内延伸（intraductal extension），表现为实性/筛状结构填充腺腔>50%，部分伴坏死。这提示导管内浸润可能比以往认知更常见。
**Immunohistochemistry**：所有NECa均表达synaptophysin（均值90%）、chromogranin（76%）、CD56（99%）及AMACR（46%）。AR表达仅见于3/6例（均值15%），PSA仅1例阳性。Ki-67增殖指数高（均值86%）。p53异常表达见于3/6例，其中2例为完全缺失（null pattern），即肿瘤细胞无染色而内部对照（间质细胞）阳性；1例为弥漫强阳性（>95%）。PTEN和RB评估5例，其中3例出现至少两种肿瘤抑制蛋白（p53、RB、PTEN）丢失。AdCa成分中，神经内分泌标志物表达局限性，AR和PSA强阳性，Ki-67指数低（均值10%），p53异常模式与NECa成分一致。
**Next generation sequencing**：NGS分析5例NECa和2例AdCa成分。在混合病例中，NECa与AdCa成分的TP53突变状态一致（1例共有一个TP53 exon7突变，另1例均无突变）。其他发现包括：1例NECa存在TP53移码突变（exon5 c.455_456insC），对应IHC的null模式；2例存在RB1突变（其中1例混合病例中AdCa和NECa成分携带不同RB1突变）；1例同时携带AKT1突变；1例检测到NRAS突变（exon3 c.181C>A，p.Gln61Lys），该突变在NECa中既往未报道。总体而言，5例可评估NECa中3例出现至少两个肿瘤抑制基因（TP53、RB1、PTEN）异常。
**Methylation analysis**：4例样本进行甲基化分析。层次聚类显示，每个混合病例内的NECa与AdCa成分在约300,000个基因相关CpG位点的甲基化谱上高度一致，紧密聚类。AR基因启动子区域平均β值0.15-0.29，呈低甲基化状态，提示启动子高甲基化并非AR蛋白表达丢失的机制。
**Clinical follow-up**：5例患者有随访，4例在6-36个月（中位18个月）内出现骨和内脏转移，符合NECa的侵袭性病程。1例LCNECa（保留TP53、RB1、PTEN表达）对化疗显著响应，24个月仍存活。
**讨论与结论**
讨论部分指出，本研究初步证据支持de novo NECa与AdCa可能具有共同克隆起源：混合病例中两种成分共享TP53突变、ERG表达（TMPRSS2:ERG融合替代标志物）及高度一致的DNA甲基化谱，提示可能来源于一个具有干细胞样特征的肿瘤克隆，并通过谱系可塑性/转分化过程演变，类似于t-NECa，尽管缺乏AR靶向治疗的选择压力。形态学上，存在SCC、LCNECa及中间形态的“过渡”肿瘤，以及部分病例保留AR信号（AR、PSA、ERG表达），支持从腺癌向NECa逐步转化的假说。p53表达方面，null模式（完全缺失）是本研究发现的异常表达形式之一，在以往前列腺癌研究中常被忽视，需注意与假阴性鉴别。导管内NECa的高频出现（5/6例）提示其可能为逆行性导管内播散，但生物学意义需进一步验证。肿瘤抑制基因（TP53、RB1、PTEN）的联合丢失与侵袭性表型相关，其中1例保留所有三种蛋白的患者对化疗反应良好，提示该分子特征可能具有预后价值。NRAS突变的发现为罕见事件，需在更大队列中评估其频率。
**研究结论翻译**：研究人员呈现了6例原发性前列腺神经内分泌癌（de novo NECa）的临床、组织学和分子特征。研究人员描述了混合肿瘤中神经内分泌癌（NECa）与腺癌（AdCa）成分共有的突变和甲基化模式，存在中间形态区域及保留雄激素受体（AR）信号，以及本系列中肿瘤抑制基因TP53、RB1和PTEN的频繁丢失。这些发现虽然具有探索性质且受限于小样本量，但可能支持以下假说：与治疗相关性神经内分泌癌（t-NECa）类似，原发性前列腺神经内分泌癌可能通过转分化/谱系可塑性过程从常规腺癌演变而来，涉及中间表型和关键分子改变的逐步积累，尽管缺乏来自雄激素受体靶向治疗的选择压力。需要更大队列的进一步研究来验证这些观察结果并阐明其潜在机制。
