《Frontiers in Cell and Developmental Biology》：Emerging regulated cell death (cuproptosis, disulfidptosis, and PANoptosis) in ischemic stroke: research progress and translational prospects
缺血性卒中（IS）是全球残疾和死亡的主要原因之一。其病理机制涉及复杂的级联反应，包括能量代谢衰竭、兴奋性毒性、氧化应激、神经炎症以及多种形式的调节性细胞死亡（RCD）。近年来，铜死亡（cuproptosis）、二硫化物死亡（disulfidptosis）和PANoptosis作为三种新兴的RCD模式，在缺血性脑损伤中受到越来越多的关注。铜死亡由铜过载触发，通过脂酰化线粒体蛋白的异常寡聚化导致蛋白质毒性应激。二硫化物死亡发生在葡萄糖剥夺合并高SLC7A11表达的条件下，由NADPH耗竭和细胞内二硫化物应激驱动，导致肌动蛋白细胞骨架塌陷。PANoptosis通过PANoptosome——一种由先天免疫传感器（ZBP1、AIM2、NLRP3）与衔接蛋白（ASC、FADD）及效应分子（caspase-1/8、RIPK3、MLKL、GSDMD）组装而成的多蛋白平台——整合细胞焦亡、凋亡和坏死性凋亡，同时执行三种死亡程序并放大神经炎症损伤。这三种死亡模式在神经血管单元内的神经元、小胶质细胞、星形胶质细胞和内皮细胞中表现出显著的细胞类型异质性，并在氧化应激、线粒体功能障碍和炎症信号等共享枢纽上汇聚，形成复杂的通路间交互网络。本综述系统地总结了这三种新兴RCD在缺血性卒中中的分子机制、细胞特异性、时空动态以及通路间交互作用，并讨论了靶向和联合干预策略的临床转化前景——包括对治疗候选物从临床前到临床开发的分阶段分析——为新型神经保护剂的设计提供理论基础。
本文系统总结了缺血性卒中中三种新兴调节性细胞死亡（RCD）——铜死亡（cuproptosis）、二硫化物死亡（disulfidptosis）和PANoptosis——的研究进展与转化前景。以下按原文小标题顺序总结主体内容。
**1 引言**
缺血性卒中占所有卒中病例的70%–80%，其核心病理过程是脑血流中断导致氧-葡萄糖剥夺（OGD），进而引发神经血管单元（NVU）多组分的级联损伤。传统上认为坏死在缺血核心区占主导，而凋亡在半暗带中占优势，但近年研究揭示细胞焦亡（pyroptosis）、坏死性凋亡（necroptosis）、铁死亡（ferroptosis）和自噬性细胞死亡共同参与缺血性脑损伤的时空演变。2022年Tsvetkov等人首次报道了铜死亡——一种由铜离子直接诱导、依赖线粒体呼吸的新型RCD；2023年Liu等人揭示了二硫化物死亡——在葡萄糖饥饿条件下、高SLC7A11表达细胞中由二硫化物应激驱动的RCD；2020年Kanneganti团队提出了PANoptosis的概念，强调ZBP1、AIM2和NLRP3等先天免疫传感器组装PANoptosome以同时激活细胞焦亡、凋亡和坏死性凋亡。这三种新兴RCD在缺血性卒中中的研究尚处于起步阶段，但积累的证据表明它们深度参与脑缺血再灌注损伤（CIRI）的病理进程。
**2 缺血性卒中中的铜死亡**
**2.1 铜死亡的分子机制**
铜死亡是一种由铜过载触发的独特RCD形式，区别于凋亡、铁死亡和细胞焦亡。生理条件下，铜通过铜转运蛋白1（CTR1/SLC31A1）进入细胞，并由铜转运ATP酶（ATP7A/ATP7B）排出，维持细胞内铜稳态。铜过载时，FDX1（铁氧还蛋白1）将Cu
2+还原为毒性更强的Cu
+，同时FDX1和LIAS（硫辛酸合成酶）介导丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基（DLAT）的脂酰化。Cu
+结合脂酰化的DLAT，诱导其异常寡聚化并形成不溶性聚集体，产生蛋白质毒性应激。此外，FDX1抑制Fe-S簇蛋白合成，进一步破坏线粒体功能。
**2.2 缺血性卒中中的铜代谢紊乱**
临床研究显示，缺血性卒中患者血清铜水平显著升高，血浆铜与首次缺血性卒中风险正相关。CIRI期间，血脑屏障（BBB）破坏允许外周铜离子渗入脑实质，而缺血缺氧下调金属硫蛋白表达，削弱细胞内铜解毒能力。线粒体氧化应激为铜死亡创造条件，减少线粒体ROS产生和清除受损线粒体是减轻神经元氧化应激和铜死亡的重要措施。
**2.3 铜死亡相关基因的表达特征**
生物信息学分析揭示了铜死亡相关基因（CuRGs）在缺血性卒中中的表达谱。整合批量RNA-seq和单细胞RNA-seq数据，研究人员鉴定出FDX1、LIAS、LIPT1、DLD、DLAT、PDHA1、PDHB和GLS的差异表达。进一步研究发现，CuRG表达模式与梗死严重程度和临床结局相关，支持其作为诊断和预后指标的效用。CuRGs还参与缺血性卒中后的免疫缺陷，提示铜死亡可能通过调节免疫微环境间接影响脑损伤修复。
**2.4 铜死亡与神经炎症的相互作用**
铜稳态失衡与神经炎症密切相关。LIAS作为Fe-S簇蛋白，与氧化应激和炎症反应有关。LIAS过表达可减少促炎细胞因子，抑制NF-κB活性，增强NRF2介导的抗氧化防御，并保护线粒体功能。铜螯合剂如氯碘羟喹可显著减少免疫细胞浸润，包括CD4
+和CD8
+ T细胞，减轻脑炎发展。
**3 缺血性卒中中的二硫化物死亡**
**3.1 二硫化物死亡的分子机制**
二硫化物死亡的发生需要两个关键条件：高SLC7A11表达和葡萄糖剥夺。SLC7A11是System X
c?的催化亚基，以1:1比例介导胱氨酸内流和谷氨酸外排。在葡萄糖充足条件下，高SLC7A11表达促进胱氨酸摄取，通过NADPH依赖的硫氧还蛋白系统还原为半胱氨酸，进而合成谷胱甘肽（GSH）以抗氧化保护。但在葡萄糖剥夺下，磷酸戊糖途径（PPP）受抑制，NADPH生成急剧减少，高SLC7A11表达导致细胞内大量胱氨酸积累，缺乏足够NADPH还原胱氨酸，引发二硫化物应激。积累的胱氨酸与肌动蛋白细胞骨架蛋白（ACTB、FLNA、MYH10、PDLIM1、INF2、IQGAP1）形成异常二硫键，导致F-肌动蛋白收缩、细胞骨架塌陷和细胞死亡。该过程不能被常规的凋亡、坏死性凋亡、铁死亡或自噬抑制剂挽救，但可被二硫化物还原剂（TCEP、DTT、β-巯基乙醇）或SLC7A11抑制剂（柳氮磺吡啶、SAS）阻止。
**3.2 缺血性卒中中的触发因素**
缺血性卒中为二硫化物死亡提供了理想的病理环境。血管闭塞导致同时的葡萄糖和氧剥夺，损害线粒体氧化磷酸化并加剧生物能量应激。临床研究显示，卒中急性期血清同型半胱氨酸和半胱氨酸浓度显著升高。动物实验证实，缺血后8小时内海马和纹状体半胱氨酸水平增加10-13倍，主要来源于GSH分解。GSH衍生的半胱氨酸积累显著增加兴奋性毒性损伤，破坏GSH/GSSG平衡，加剧组织损伤。需注意，二硫化物死亡的直接触发因素是细胞内胱氨酸（氧化二硫形式），而非半胱氨酸本身；上述临床和动物观察提供了间接证据，表明在缺血后NADPH耗竭条件下，硫醇/二硫化物稳态被破坏，GSSG/GSH和胱氨酸/半胱氨酸比率可能发生偏移。直接体内定量缺血后脑内胱氨酸和NADP
+/NADPH比率仍是一项待解决的需求。
**3.3 二硫化物死亡相关基因及诊断价值**
研究人员通过结合单细胞测序、机器学习算法和体外实验，系统鉴定了缺血性卒中中二硫化物死亡相关基因（DRGs）。整合GSE16561和GSE58294数据集，发现SLC7A11在缺血性卒中组显著上调，而NDUFA11下调。利用LASSO回归、SVM-RFE和随机森林算法，筛选出五个关键DRGs（SLC7A11、RPN1、NUBPL、NDUFA11和NDUFS1）构建预测模型，具有高诊断准确性。单细胞分析显示这些DRGs主要分布在免疫细胞类型中，提示二硫化物死亡可能特异性地调节神经免疫相互作用。
**3.4 二硫化物死亡与铁死亡的交互作用**
SLC7A11是连接二硫化物死亡和铁死亡的关键节点。在铁死亡中，SLC7A11介导的胱氨酸摄取是GSH合成的限速步骤，而GSH是GPX4（谷胱甘肽过氧化物酶4）的必要辅因子。GPX4利用GSH将有毒脂质过氧化物还原为无毒脂质醇，从而抑制铁死亡。在缺血性卒中中，大量谷氨酸释放逆转System X
c?的生理转运梯度，严重损害胱氨酸摄取，导致细胞内半胱氨酸耗竭和GPX4失活，最终触发铁死亡。然而，当SLC7A11在葡萄糖剥夺下高表达时，同一转运体反而驱动二硫化物死亡。这种“双刃剑”效应表明，SLC7A11调控必须考虑代谢背景：在能量充足时，高SLC7A11表达是保护性的；在葡萄糖饥饿时，则成为致死性的。现有研究对发生这种转换的葡萄糖阈值浓度存在分歧：Liu等人（2023）的体外数据显示，在SLC7A11过表达细胞中，葡萄糖浓度低于约1 mM时触发二硫化物死亡；而体内缺血半暗带的葡萄糖浓度根据侧支灌注情况在0.2-2.5 mM之间——这一梯度可能解释为何二硫化物死亡在空间上受限而非均匀分布于缺血区域。因此，研究人员将现有证据解释为支持“代谢状态优先”模型：SLC7A11活性的净功能结果主要由细胞NADPH/NADP
+比率和葡萄糖通量决定，而非仅由表达水平决定。该解释性立场具有直接治疗意义，因为在急性期不加区分地抑制SLC7A11可能加剧半暗带的铁死亡。近期研究还发现，铜离子可直接结合GPX4的半胱氨酸残基（C107和C148），促进GPX4泛素化和自噬性降解，从而增强铁死亡敏感性，进一步揭示了铜死亡与铁死亡之间的相互作用。
**3.5 PRDX1与缺血后处理**
过氧化物酶1（PRDX1）是二硫化物死亡调控网络中的关键分子。研究发现，缺血后处理（IPostC）通过调节PRDX1介导的二硫化物死亡相关通路发挥神经保护作用。生物信息学分析结合孟德尔随机化证实，PRDX1与缺血性卒中共享因果变异位点rs17522918，且PRDX1相关的甲基化位点（cg02631906和cg08483560）与缺血性卒中风险存在因果关系。
**4 缺血性卒中中的PANoptosis**
**4.1 PANoptosis的概念与分子架构**
PANoptosis被定义为同时激活细胞焦亡、凋亡和坏死性凋亡的协同性细胞死亡。其独特特征是PANoptosome——一种整合三种死亡通路分子组分的多聚蛋白复合体，用于同步调控。PANoptosome的核心结构包括传感器（ZBP1、AIM2、NLRP3、RIPK1、NLRP12、NLRC5、RIG-I）、衔接蛋白（ASC、FADD）和效应分子（caspase-1/8、RIPK3、MLKL、GSDMD）。
**4.2 脑缺血中的ZBP1-PANoptosome**
ZBP1（Z-DNA结合蛋白1，亦称DAI）是PANoptosis的关键上游传感器。其N端含有两个识别Z-DNA/Z-RNA的Zα结构域，其RHIM结构域与含有RHIM的蛋白如RIPK1和RIPK3相互作用。CIRI期间，线粒体DNA（mtDNA）泄漏至胞质，形成Z型核酸，激活ZBP1。ZBP1通过RHIM结构域招募RIPK3，促进MLKL磷酸化，驱动坏死性凋亡；同时通过FADD-caspase-8轴激活凋亡，并通过ASC-NLRP3-caspase-1轴激活细胞焦亡。Caspase-6作为ZBP1-PANoptosome的重要组分，通过非酶学功能增强RIPK3与ZBP1的相互作用，促进PANoptosome高效组装。在视网膜缺血再灌注损伤模型中，VDAC1寡聚化调控PANoptosis，提示线粒体通透性转换孔（mPTP）可能作为连接能量危机与PANoptosis激活的桥梁。在脑缺血中，OGD导致ATP耗竭、Na
+/K
+-ATP酶失效、神经元去极化以及谷氨酸和ROS释放，进一步触发死亡配体-受体相互作用，激活FADD介导的凋亡或TRADD介导的坏死性凋亡。
**4.3 AIM2-PANoptosome与NLRP3-PANoptosome**
AIM2（黑色素瘤缺失因子2）是识别双链DNA的胞质传感器，在弗朗西斯菌和HSV-1感染期间形成AIM2-PANoptosome。AIM2与ZBP1合作招募ASC和caspase-1形成炎症小体，驱动GSDMD裂解和细胞焦亡；同时激活caspase-3/7介导的凋亡并诱导MLKL依赖的坏死性凋亡。在缺血性卒中中，受损神经元和胶质细胞释放的细胞外DNA可被AIM2识别，触发PANoptosis。NLRP3炎症小体是脑缺血中研究最广泛的炎症复合体。缺血再灌注后，线粒体ROS产生、K
+外流、溶酶体破裂和TXNIP去抑制共同激活NLRP3。NLRP3招募ASC和caspase-1，裂解GSDMD释放其N端结构域，在膜上形成孔道，驱动细胞焦亡和IL-1β/IL-18成熟。值得注意的是，NLRP3不仅是细胞焦亡的平台，还可通过PANoptosome与凋亡和坏死性凋亡通路相互作用。研究人员系统综述了PANoptosis与自噬在缺血性卒中中的相互作用，指出自噬可通过清除受损线粒体和炎症小体组分负调控PANoptosis，但过度自噬也可能通过Beclin-1/caspase-8相互作用促进死亡。
**4.4 缺血性卒中中PANoptosis的细胞特异性**
通过文献计量学、数据挖掘和多维分析，研究人员首次确认了CIRI中PANoptosis的存在。在OGD/R细胞模型和tMCAO动物模型中，TUNEL染色（DNA片段化，指示凋亡）、EthD-III和PI染色（均报告质膜完整性丧失，为坏死性凋亡和细胞焦亡的特征）共同证明了三种死亡程序特征的同时发生，并通过通路特异性抑制剂进一步解析。单独使用通路特异性抑制剂（Z-VAD-FMK、双硫仑、Nec-1s）仅部分减少细胞死亡，而三联抑制剂显著降低TUNEL阳性率（从40%降至15%），证实了PANoptosis的协同致死效应。在细胞水平，PANoptosis表现出显著异质性：（1）神经元：OGD后，神经元主要发生凋亡和坏死性凋亡，但当伴随NLRP3炎症小体激活和GSDMD裂解时，构成PANoptosis。坏死性凋亡和凋亡在卒中后依次激活，协同介导血管和神经病理。（2）小胶质细胞：缺血迅速激活小胶质细胞，M1型小胶质细胞高表达NLRP3、caspase-1和GSDMD，驱动细胞焦亡并释放IL-1β/IL-18，破坏BBB。小胶质细胞来源的TNF-α通过TNFR1/RIPK1通路介导内皮细胞坏死性凋亡，加剧BBB破坏。（3）星形胶质细胞：反应性星形胶质细胞通过Cx43半通道释放ATP和谷氨酸，激活小胶质细胞P2X7受体，维持炎症小体活性。CD73过表达通过A2b/NF-κB通路减轻GSDMD介导的星形胶质细胞焦亡。（4）内皮细胞：脑微血管内皮细胞（BMECs）在缺血后氧化应激和炎症攻击下发生细胞焦亡和坏死性凋亡，导致BBB通透性增加。
**4.5 PANoptosis与自噬的相互作用**
自噬与PANoptosis表现出复杂的双向调控。一方面，自噬通过线粒体自噬清除受损线粒体，减少mtDNA泄漏和ROS产生，抑制ZBP1/NLRP3激活和PANoptosome组装。另一方面，自噬相关蛋白（如Beclin-1、ATG5、ATG7）可通过非自噬功能参与死亡调控。Beclin-1与Bcl-2解离促进自噬，但caspase-3切割的Beclin-1片段可转位至线粒体触发凋亡。在缺血性卒中中，这种相互作用的净效应取决于损伤阶段和细胞类型：自噬在急性期可能具有保护作用，但在慢性期可能促进PANoptosis。
**5 新兴RCD之间的交互作用**
**5.1 铜死亡与铁死亡的相互作用**
铜死亡和铁死亡在氧化应激和线粒体代谢水平上深度交互。两者均依赖线粒体活性：铜死亡需要活跃的TCA循环产生脂酰化底物，而铁死亡依赖线粒体ROS驱动的脂质过氧化。GSH是共同的汇聚点：GSH可螯合游离铜离子以减少DLAT脂酰化诱导的蛋白质聚集，同时也是GPX4抑制铁死亡的必要辅因子。研究发现，铜离子载体elesclomol诱导的铜积累可通过Fenton反应产生大量ROS，同时促进SLC7A11降解和GPX4泛素化，增强铁死亡敏感性。FDX1作为铜死亡的核心调控因子，与自噬标志基因表达正相关，提示FDX1介导的铜死亡可能通过自噬与铁死亡相互作用。
**5.2 二硫化物死亡与铁死亡之间的代谢开关**
SLC7A11是二硫化物死亡与铁死亡之间的关键分子开关。在能量充足时，高SLC7A11表达促进胱氨酸摄取和GSH合成，维持GPX4活性，抑制铁死亡。但在葡萄糖剥夺下，相同的高SLC7A11表达导致NADPH耗竭和胱氨酸积累，驱动二硫化物死亡。需要承认，目前提出的时空分期模型——二硫化物死亡在亚急性期（3天至6周）占主导——是一个假设生成框架而非经验确定的时间线。所引用的证据仅提供间接时间支持，缺乏直接的在体纵向测量。这种代谢依赖性转换表明，在缺血性卒中的不同区域（核心区严重葡萄糖剥夺 vs. 半暗带相对保留）和不同时间窗口（急性能量危机 vs. 亚急性代谢恢复），SLC7A11可能发挥截然相反的作用。精确的SLC7A11活性时空调控，或联合靶向GPX4和NADPH代谢，可能是优化神经保护策略的关键。
**5.3 PANoptosis与铜死亡/二硫化物死亡的潜在相互作用**
目前直接证据有限，但存在多个潜在交互节点：（1）氧化应激汇聚：三种死亡模式均受ROS调控。铜死亡中Cu
+通过Fenton反应产生ROS；二硫化物死亡中NADPH耗竭削弱抗氧化能力；PANoptosis中mtROS激活NLRP3和ZBP1。（2）线粒体功能障碍：铜死亡直接破坏TCA循环和线粒体膜电位；二硫化物死亡中的细胞骨架塌陷可能间接影响线粒体动力学；mPTP开放和mtDNA释放对PANoptosome激活至关重要。（3）炎症放大：PANoptosis释放IL-1β/IL-18和DAMPs，进一步激活小胶质细胞，促进铜摄取蛋白或SLC7A11表达，形成正反馈环路。（4）Caspase-8枢纽：Caspase-8是PANoptosome的核心组分，参与凋亡和细胞焦亡调控。近期研究发现，caspase-8可切割GPX4促进铁死亡，提示其可能作为连接PANoptosis与铁死亡/铜死亡的桥梁。
**6 治疗策略与转化前景**
**6.1 抗铜死亡策略**
铜螯合剂是抑制铜死亡的最直接手段。四硫代钼酸铵（ATTM/TTM）是一种用于威尔逊病的铜螯合剂，已被证实具有硫化氢供体特性，在tMCAO大鼠模型中显著改善神经功能、减少梗死体积、增强抗氧化酶活性并减少氧化损伤。TTM通过抑制线粒体细胞色素c氧化酶、减少再灌注驱动的过度ROS产生实现“代谢调节”，而非完全抑制线粒体呼吸。此外，D-青霉胺和氯碘羟喹在神经退行性疾病中也显示出铜螯合潜力。但需注意，TTM和D-青霉胺均未在已发表的缺血性卒中患者临床试验中评估，其现有证据基础完全为临床前。TTM的BBB穿透性尚未完全表征，且铜螯合与必需金属耗竭之间的窄治疗窗口构成药代动力学挑战，需在临床转化前进行剂量优化研究。FDX1和LIAS调控代表更特异的策略。Elesclomol作为铜离子载体在癌症中诱导铜死亡，但其类似物可能被设计为FDX1抑制剂以阻断脂酰化过程。LIAS过表达增强抗氧化防御、减少促炎因子并保护线粒体功能。然而，这些靶点的脑递送和细胞特异性仍有待解决。
**6.2 抗二硫化物死亡策略**
SLC7A11抑制剂如柳氮磺吡啶（SAS）可阻断System X
c?活性，在体外显著挽救葡萄糖剥夺导致的细胞死亡。但在缺血性卒中中需谨慎使用，因为急性期抑制SLC7A11可能同时促进铁死亡。研究发现，SLC7A11表达抑制小胶质细胞M1极化并促进M2极化，提示抗炎效应。因此，SLC7A11调控必须考虑分期：急性期可能需要维持其功能以防止铁死亡，而亚急性期适度抑制可能阻断二硫化物死亡。NADPH补充策略包括2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG），这是一种葡萄糖类似物，可通过PPP产生NADPH以保护高SLC7A11细胞免受二硫化物死亡。烟酰胺核苷等NAD
+前体也可能通过增强NADPH再生提供保护。二硫化物还原剂如TCEP和DTT可直接还原异常二硫键，挽救肌动蛋白细胞骨架完整性。N-乙酰半胱氨酸（NAC）作为抗氧化剂和GSH前体，也可能通过维持氧化还原平衡减轻二硫化物死亡。
**6.3 抗PANoptosis策略**
NLRP3炎症小体抑制剂是研究最广泛的PANoptosis干预靶点。MCC950（CRID3）是一种高度选择性NLRP3抑制剂，已在多种脑损伤模型中显示神经保护作用。OLT1177（dapansutrile）是一种口服活性NLRP3抑制剂，已完成骨关节炎II期试验，其在卒中中的BBB穿透性正在评估中。CY-09直接结合NLRP3的NACHT结构域抑制其ATP酶活性。Caspase抑制剂包括VX-765（Belnacasan），一种口服caspase-1抑制剂，可减少IL-1β成熟和GSDMD裂解。Z-VAD-FMK是一种广谱caspase抑制剂，但可能因凋亡阻断增加坏死性凋亡风险，需与坏死性凋亡抑制剂联用。坏死性凋亡抑制剂包括Necrostatin-1s（Nec-1s，RIPK1激酶抑制剂）和GSK872（RIPK3抑制剂）。值得注意的是，单独抑制坏死性凋亡可能使细胞转向凋亡或细胞焦亡，因此联合靶向多个PANoptosome组分可能更有效。Gasdermin抑制剂如双硫仑可抑制GSDMD孔道形成，减少IL-1β释放和细胞裂解。Necrosulfonamide阻断GSDMD与MLKL的相互作用，可能同时抑制细胞焦亡和坏死性凋亡的执行。
**6.4 联合治疗与精准医学**
缺血性卒中的病理复杂性决定了单靶点干预的局限性。联合策略包括：（1）神经保护剂加再灌注：依达拉奉（自由基清除剂）联合静脉溶栓或血管内取栓在TASTE试验中改善了90天功能结局。（2）多RCD通路抑制：在OGD模型中，同时靶向凋亡（Z-VAD-FMK）、细胞焦亡（MCC950）和坏死性凋亡（Nec-1s）的三联组合相比单药治疗显著降低了细胞死亡率。（3）干细胞治疗加基因编辑：间充质干细胞（MSCs）和神经干细胞（NSCs）不仅提供细胞替代，还通过旁分泌效应调节免疫微环境。结合CRISPR/dCas9靶向神经保护基因如SIRT1，可增强内源性修复。hNPC01（iPSC来源的前脑神经祖细胞）已获得FDA和中国CDE临床试验批准。（4）纳米颗粒药物递送：工程化纳米载体（如PLGA纳米颗粒、外泌体）可实现BBB穿透和缺血区域靶向递送，提高药物生物利用度并减少全身副作用。
**6.5 临床转化的挑战与前景**
尽管新兴RCD为缺血性卒中治疗提供了丰富靶点，临床转化仍面临多重挑战：（1）时间特异性：急性期（0-72小时）、亚急性期（3天至6周）和慢性期（>6周）的主要死亡模式不同，需要开发分期适应性疗法。（2）细胞类型选择性：神经元、小胶质细胞、星形胶质细胞和内皮细胞对同一死亡通路的敏感性不同，需要细胞特异性靶向。（3）血脑屏障穿透：大多数小分子抑制剂的BBB通透性有限。例如，MCC950在未处理啮齿动物中的CNS/血浆比率估计低于0.1，其脑暴露量还随缺血后BBB破坏而变化（BBB破坏在24-72小时达到峰值，第7天部分恢复）。克服这一挑战的策略包括：表面功能化的工程化PLGA纳米颗粒用于受体介导的转胞吞作用、具有固有BBB穿越能力的外泌体载体，以及通过嗅/三叉神经通路绕过BBB的鼻内递送，后者在啮齿动物卒中模型中已显示出递送NLRP3抑制剂和caspase抑制剂的潜力。每种策略具有不同的药代动力学特征，在临床应用前必须在非人灵长类模型中验证。（4）生物标志物开发：血清铜水平、半胱氨酸/胱氨酸比率和IL-1β/IL-18水平可作为RCD激活的临床生物标志物，但实时脑内监测技术仍不成熟。（5）个性化医学：基于基因组学（如PRDX1多态性）和代谢组学的精准分型可指导个体化RCD靶向治疗。
**7 结论**
铜死亡、二硫化物死亡和PANoptosis作为三种新兴的调节性细胞死亡模式，在缺血性卒中的病理进程中发挥重要作用。铜死亡通过铜离子-脂酰化蛋白-线粒体功能障碍轴直接损伤神经元；二硫化物死亡通过缺血特征性葡萄糖剥夺微环境中的SLC7A11-NADPH-肌动蛋白细胞骨架塌陷机制杀死细胞；PANoptosis通过PANoptosome整合细胞焦亡、凋亡和坏死性凋亡，放大神经炎症和继发性损伤。这三种死亡模式并非孤立存在，而是通过氧化应激、线粒体代谢和炎症信号形成复杂的相互作用网络。未来研究应聚焦于：（1）利用单细胞多组学和空间转录组学解析不同卒中阶段NVU不同细胞的RCD谱特征；（2）开发具有BBB穿透性和细胞选择性的靶向药物；（3）建立基于RCD生物标志物的患者分层系统以实现精准干预；（4）探索同时靶向多种RCD的协同治疗策略。随着对新兴RCD机制理解的深入和转化医学技术的进步，靶向铜死亡、二硫化物死亡和PANoptosis有望为缺血性卒中的神经保护治疗开辟新途径。更进一步，研究人员提出，铜死亡、二硫化物死亡和PANoptosis在共享代谢和氧化枢纽——特别是线粒体ROS-NADPH-GSH轴——上的机制汇聚，支持开发一个统一的“代谢性细胞死亡”概念框架，将这些模式视为由实时细胞能量状态决定的动态互变状态，而非平行通路。验证这一整合模型应成为未来机制研究的明确优先事项。此外，空间分辨单细胞转录组学和活细胞代谢成像的出现，首次使得在缺血区域内单个神经血管单元中实时绘制这三种死亡程序的精确共现和顺序激活成为可能——这一方法学前沿预计将从根本上重新定义对卒中继发性损伤进展的理解，并催化下一代RCD靶向神经保护疗法。
