合成微生物组驱动多组学响应修复 1,4-二硫杂环己烷污染土壤并同时抑制抗生素耐药基因

《Journal of Hazardous Materials》:A synthetic microbiome drives a multi-omics response to remediate 1,4-dithiane–contaminated soil and simultaneously suppresses antibiotic resistance genes

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年08月21日 来源:Journal of Hazardous Materials 10.6

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   摘要1,4-二硫六环是废弃日本化学武器的一种降解产物,是一种具有生态风险的持久性有机污染物。通过污染胁迫筛选和比例优化,构建了一个合成微生物组 (SM),由 Shinella sp.、Alcaligenes faecalis、Sphingomonas sp. 和 Stenot

  

摘要

1,4-二硫六环是废弃日本化学武器的一种降解产物,是一种具有生态风险的持久性有机污染物。通过污染胁迫筛选和比例优化,构建了一个合成微生物组 (SM),由 Shinella sp.、Alcaligenes faecalis、Sphingomonas sp. 和 Stenotrophomonas sp. 以 1: 1: 2: 2 的最佳比例组成。SM 实现了 95.2% 的 1,4-二硫六环降解率,并减少了中间体的积累。土壤修复实验表明,在 60 天内完全去除了污染物,同时土壤健康得到改善:重金属 (Cu, Zn, Cd) 的生物有效性降低,pH 值升高 (6.47 至 6.95),有机质和酶活性增加,盐度和氧化还原电位降低。整合离子组学、16S 测序、宏基因组学、代谢组学和 HT-qPCR 显示,SM 定殖重塑了微生物群落结构,抑制了携带 ARGs 的细菌 (如 Pseudomonas),并激活了核心途径 (氧化磷酸化和谷胱甘肽代谢),增强了代谢活性和氧化应激耐受性。因此,土壤 ARGs 和可移动遗传元件的多样性、丰度和扩散潜力显著降低。这些发现为同时实现有机污染控制和土壤生态风险管理提供了微生物解决方案和理论基础。

引言

以 1,4-二硫六环为代表的持久性有机污染物,对土壤生态安全和公共健康构成了严重挑战。作为芥子气的稳定转化产物,1,4-二硫六环由废弃日本化学武器降解产生,由于其含硫杂环结构,表现出环境持久性、潜在毒性和生物累积风险 [1], [2], [3]。这种新兴污染物长期残留在废弃武器存放地的土壤中,直接破坏土壤微生物群落的结构和功能,同时通过抗生素抗性基因 (ARGs) 的传播和富集等不可预测的负面生态效应,提高了全球健康风险 [4], [5], [6]。因此,开发针对武器相关污染物的高效绿色修复技术,并系统评估其去除的综合环境效益,已成为环境修复领域的关键科学问题 [7]。
微生物修复是一种广泛研究的方法,因其环境友好和可持续性而备受关注。最近的研究表明,使用合成微生物组 (SM) 而非单一微生物菌株,在降解复杂污染物和增强生态稳定性方面具有更大的优势,因为 SMs 利用了多种微生物的协同作用 [8], [9]。然而,基于 SM 的 1,4-二硫六环微生物修复研究仍处于起步阶段。此外,大多数修复评估主要集中在污染物去除效率本身,往往忽略了修复过程对多维土壤生态系统的深远影响 [10], [11]。
虽然修复活动去除了目标污染物,但它们可能会破坏其他污染物(如重金属)的生物地球化学行为,同时也会改变土壤的物理化学性质、营养循环和微生物相互作用网络。这些潜在的二次效应会影响 ARGs 的丰度和传播,这与修复技术的长期安全性和生态可持续性直接相关。然而,这些效应很少在系统研究中进行探索。但是,最近多组学技术(如宏基因组学、代谢组学和离子组学)的融合,现已为在分子和系统水平上全景分析修复修复过程的生态效应提供了强大的工具 [12], [13]。
组学技术通过提供多维信息,如土壤功能基因、微生物代谢活性和矿物元素迁移,揭示了污染物去除、环境因素变化、微生物群落反应和抗性基因进化之间的内在关系。例如,现有的研究证据支持重金属(如 Cu, Zn 和 Cd)和抗生素施加的共选择压力,即土壤中重金属的增加可以促进 SM 中重金属抗性基因和 ARGs 的进化,而重金属生物有效性的降低则减少这些基因 [14], [15]。然而,将特定有机污染物的修复作为污染控制策略与降低 ARGs 健康风险之间的联系,仍然是当前研究中的一个重大空白。因此,本研究旨在利用 SM 从污染物去除和抑制 ARGs 的角度检查系统性风险管理。
在本研究中,我们利用污染物胁迫筛选和构建了一种针对 1,4-二硫六环的高效 SM,并进行了土壤微宇宙修复实验以验证 SM 的降解效率。这是首次整合包括土壤物理化学分析、离子组学、16S rRNA 基因测序、宏基因组学和代谢组学在内的多维技术,对以下内容进行系统探索:1) SM 修复后基本土壤生态功能的恢复;2) 关键重金属的转化和钝化;3) 土壤微生物群落结构和功能基因的表达(包括重金属抗性基因和 ARGs 的协同反应)以及可移动遗传元件 (MGEs);以及 4) 关键微生物代谢途径 (如氧化应激相关谷胱甘肽代谢) 发生的适应性变化。所得的多组证据关联链确定了 1,4-二硫六环污染场地修复的高效生物策略和菌株资源,同时阐明了 SM 如何实现污染物的同时修复和土壤抗性基因的减少。抗逆性和污染物控制的双重机制为评估和开发下一代环境友好型生物修复技术提供了新的理论框架和科学依据。

章节片段

土壤污染暴露及高效降解菌株筛选

测试土壤取自未受污染农田的表层 (0–20 cm),其本身含有作为天然土壤成分的背景水平重金属 (包括 Cu, Zn 和 Cd)。这些金属不是人为引入的,而是整个污染暴露和修复过程中持续存在的本土成分。1,4-二硫六环以 100 mg·kg-1 的浓度与土壤均匀混合,并放置在恒温恒湿培养箱中

高效降解菌株筛选、SM 构建及降解特性评估

通过土壤污染暴露和定向富集 (图 S1),分离出以下四种高效 1,4-二硫六环降解细菌:Shinella sp. (M1), Alcaligenes faecalis (M2), Sphingomonas sp. (M3), 和 Stenotrophomonas sp. (M4)。所有四种菌株均形成圆形、浅黄色菌落 (图 S2)。(序列信息见附件 S1。) SM 的最佳接种比例通过 OFAT 优化确定为 M1: M2: M3: M4 = 1: 1: 2: 2。
SM 具有优势

讨论

本研究克服了传统生物修复方案仅关注污染物去除效率的关键局限性,而是从涉及污染物去除和环境风险防控的综合视角看待修复。SM 的成功构建和部署验证了 1,4-二硫六环的高效降解和土壤 ARGs 风险的降低。多组学技术的整合提供了全景式

结论

本研究成功构建了一种针对 1,4-二硫六环的高效 SM,并确定了其最佳比例 (1: 1: 2: 2)。所得 SM 显示出显著的协同降解优势。整合多组学分析表明,SM 修复实现了目标污染物 (1,4-二硫六环及其主要中间体 1,4-二硫六环 -1-氧化物降至检测限以下) 的有效消除,同时通过推动改善系统地重塑了土壤微生态系统

环境意义

这些结果为协同实现有机污染控制和土壤生态风险管理提供了创新的微生物解决方案和理论基础。

CRediT 作者贡献声明

吉晓辉: 监督,概念化。李晨: 撰写 – 初稿,验证,软件。杨旭: 撰写 – 回顾与编辑,撰写 – 初稿,验证,调查,形式分析,数据整理,概念化。罗学刚: 资源。张升瑞: 软件,项目管理。赖金龙: 监督,项目管理。

利益冲突声明

作者声明,他们没有已知的竞争性经济利益或个人关系,可能会影响本文报告的工作。

致谢

本研究得到了“陕西理工大学秦巴生物资源与生态环境共建国家重点实验室 (培育) 重大科学研究开放基金项目 (No.SLGPT2019KF04-01)"、“陕西理工大学国家自然科学基金培育项目 (SLGGZRPY25)"、“陕西省教育厅科学研究计划项目 (25JK0372)"、“陕西省‘校企合作’
杨旭 | 吉晓辉 | 李晨 | 张升瑞 | 赖金龙 | 罗学刚
陕西省催化重点实验室,陕西理工大学化学与环境科学学院,中国陕西汉中 723001
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