《Veterinary Research Communications》:Pyogranulomatous pneumonia associated with Actinomyces hyovaginalis infection in a free-ranging Brazilian wild boar
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阴道放线菌(Actinomyces (A.) hyovaginalis)是一种革兰氏阳性、杆状、多形性细菌。在家猪中,该感染典型表现为脓性肉芽肿性肺炎。在野猪中,此前从未有该感染与此种病变相关的报道。研究人员报告了一例自由放养野猪因A. hyovaginali
阴道放线菌(Actinomyces (A.) hyovaginalis)是一种革兰氏阳性、杆状、多形性细菌。在家猪中,该感染典型表现为脓性肉芽肿性肺炎。在野猪中,此前从未有该感染与此种病变相关的报道。研究人员报告了一例自由放养野猪因A. hyovaginalis感染所致脓性肉芽肿性肺炎的大体、组织病理学与细菌学发现。猎人送检一头野猪的肺、淋巴结与心脏片段用于组织病理学分析,初步怀疑为结核病。大体上,肺内见多发结节,直径0.1至0.8 cm,中心为浅黄、不透明、脆性的坏死物。组织学上,结节由凝固性坏死构成,含大量无定形至颗粒状嗜酸性物质、中性粒细胞炎性浸润、细胞碎片、多灶性矿化,以及坏死中心内大量病灶内胞外球杆菌状嗜碱性菌落。周围为同心层状显著炎性浸润,含淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞、类上皮细胞与中性粒细胞。Brown-Hopps染色显示病灶内革兰氏阳性杆菌。细菌培养于5%绵羊血琼脂上见小而白、部分溶血菌落。分离菌经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定为A. hyovaginalis。依据大体、组织病理学与细菌学发现,确诊A. hyovaginalis所致脓性肉芽肿性肺炎。尽管此前未在该猪科物种中报道,该感染应作为野猪脓性肉芽肿性肺部病变的鉴别诊断之一。
研究背景与立项依据
阴道放线菌(Actinomyces (A.) hyovaginalis,部分分类学文献建议归入Schaalia属)为革兰氏阳性、杆状、多形性、触酶阴性、生长缓慢、非抗酸细菌。该菌最初从家猪(Sus scrofa domesticus)脓性阴道分泌物、流产胎儿及多组织样本中分离,在家猪中典型关联散发性播散性脓性肉芽肿性肺病变伴广泛坏死中心,亦见于干酪样淋巴结炎、乳腺炎、流产及下颌骨骨髓炎等。在其他动物如绵羊、山羊、骆驼科、长颈鹿中亦有分离报道。野猪(Sus scrofa)中仅有一次既往分离记录,且该次为混合感染(同时见大肠杆菌、产色葡萄球菌与α溶血链球菌),并非单纯由A. hyovaginalis直接致化脓性肉芽肿肺炎。野猪常见细菌性肺炎病原(如猪支原体Mycoplasma hyopneumoniae、多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida、2型链球菌Streptococcus suis serotype 2、胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae、副猪格拉泽菌Glaeserella parasuis、鼻支原体M. hyorhinis)均不典型诱发脓性肉芽肿反应;而能诱发此类反应的主要是牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)所致结核病变。因此,在自由放养野猪中发现单纯由A. hyovaginalis引起的脓性肉芽肿性肺炎,此前属知识空白,且因病变肉眼近似结核,易造成误诊并影响狩猎后肉品处理与One Health风险评估,故有必要报道并确立其作为鉴别诊断的地位。该研究发表于《Veterinary Research Communications》。
主要技术方法概述
研究人员采用猎人送检的自由放养成年巴西野猪肺、心及未指定胸内淋巴结样本队列(因疑诊结核由南里奥格兰德州官方兽医服务转交)。关键技术包括:10%中性缓冲福尔马林固定、石蜡包埋、3 μm切片后行苏木精-伊红(HE)、Brown-Hopps改良革兰、齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)抗酸及Grocott-Gomori六胺银(GMS)染色;细菌学方面取4 ℃保存4 h肺组织接种5%绵羊血琼脂与麦康凯琼脂,需氧与微需氧37 ℃培养48 h,革兰氏染色初筛,最终以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定菌种。
研究结果
背景(Background)
综述文献确认A. hyovaginalis在家猪致脓性肉芽肿肺炎的模式,野猪中仅见混合感染先例,且野猪原发性该病变未获描述;指出本研究旨在填补野猪单纯感染诊断空白。
病例展示(Case presentation)
大体检查:肺内多发常融合的0.1–0.8 cm结节,浅黄不透明脆性坏死中心;余肺实质多灶苍白实变不塌陷;淋巴结与心无大体病变。组织学:肺实质多灶凝固性坏死,含嗜酸性无定形/颗粒物质、退变中性粒细胞、细胞碎片、多灶粗大颗粒状强嗜碱性矿化物质及2–3 μm球杆菌状嗜碱性菌落;坏死灶外围同心层淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞、类上皮细胞、中性粒细胞浸润,偶见巨噬细胞栅栏状排列,坏死区绕以中度纤维增生,无Splendore-Hoeppli现象;邻接肺组织见肺泡巨噬细胞增多、中性粒细胞浸润与纤维素性水肿。Brown-Hopps证实质内革兰氏阳性球杆菌;Ziehl-Neelsen与GMS分别排除抗酸杆菌及真菌。细菌培养:血琼脂需氧/微需氧均长出小而白、部分溶血纯菌落,无麦康凯生长,革兰氏阳性多形球杆菌,MALDI-TOF MS(得分2.6)鉴定为A. hyovaginalis。
讨论(Discussion)
研究人员依据三联证据确诊野猪A. hyovaginalis脓性肉芽肿肺炎,与家猪已知模式一致。排除结核依据为革兰氏阳性菌落、抗酸染色阴性、淋巴结未受累;排除金黄色葡萄球菌栓塞性化脓肺炎依据为病变呈脓性肉芽肿而非单纯化脓且培养非金葡;排除胸膜肺炎放线杆菌肉芽肿型(伴Splendore-Hoeppli现象)及Rhodococcus equi肺炎依据为纯培养鉴定结果。感染源不明,鉴于该菌可能属家猪生殖/鼻腔/扁桃体共生菌,野猪同源,推测免疫抑制因素(如PCV2或Metastrongylus肺虫)可能促发,但本例淋巴结与肺无PCV2病变、未见肺虫成虫及相应组织学改变,故未证实。研究强调野猪作为入侵种及潜在病原库,猎人送检组织做病理微生物分析对监测循环病原具实践价值;A. hyovaginalis无人源感染报道,人畜共患风险低,但需与结核等可食用猎肉相关人畜共患病原鉴别。
结论翻译与浓缩
该研究描述自由放养野猪首例单纯A. hyovaginalis脓性肉芽肿肺炎,通过大体、组织病理与MALDI-TOF MS细菌学三联确诊;结论为:尽管野猪中既往未报道,A. hyovaginalis感染应作为该猪科动物脓性肉芽肿性肺病变的鉴别诊断之一,如同在家猪中那样;进一步跨种群传播评估与共生/机会致病机制需后续研究,但本例本身不支持其作为野猪向家猪显著传播性病原。