《Acta Neuropathologica Communications》：Overactivation of SHH signaling induces a cascade of dedifferentiation and oncogenesis in a new mouse model for choroid plexus carcinoma
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脉络丛（Choroid Plexus, CP）肿瘤占婴儿期脑肿瘤的10–20%，其中脉络丛癌（Choroid Plexus Carcinoma, CPC）高度侵袭且生存率低。除TP53高频突变与染色体不稳定性外，肿瘤起始与致癌事件知之甚少。研究人员构建了hGF
脉络丛（Choroid Plexus, CP）肿瘤占婴儿期脑肿瘤的10–20%，其中脉络丛癌（Choroid Plexus Carcinoma, CPC）高度侵袭且生存率低。除TP53高频突变与染色体不稳定性外，肿瘤起始与致癌事件知之甚少。研究人员构建了hGFAP-cre::lsl-MYCN::lsl-Gli2(N)::Tp53fl/fl小鼠，自胚胎第13.5天（E13.5）起于中枢神经系统（Central Nervous System, CNS）细胞启动重组，实现MYCN与Gli2激活及TP53失活。84%小鼠于出生后18天内发生脑室肿瘤，组织学与标志物表达酷似人CPC。研究人员通过组织学与分子表征及体外药敏实验证明：胚胎CP发育中异常 Sonic Hedgehog（SHH）信号触发去分化级联，使成熟上皮逆转为前体样状态；空间转录组揭示分化细胞脱落分泌身份、获得恶性前体态，由表达成熟分泌标志的多纤毛上皮向高增殖、单纤毛、SOX2阳性前体转换。该重编程再激活胚胎发育程序，致细胞周期与DNA修复通路依赖；体外培养肿瘤细胞对ATR与CDK抑制敏感。
研究背景：脉络丛肿瘤（CPT）是罕见儿童肿瘤，占1岁内脑肿瘤10–20%，其中CPC侵袭性极强，20–60%初诊即转移，5年无进展生存仅约50%，且无靶向疗法。已知TP53突变约占50%，但分子机制不清，既有小鼠模型存在致死或非早发局限。SHH、Wnt、Notch通路参与胚胎CP发育，Gli2为SHH关键效应因子，MYCN为神经系强效癌基因，因此研究人员假设SHH激活（Gli2+MYCN）+TP53缺失足以驱动CPC。该研究发表于《Acta Neuropathologica Communications》，构建了hGFAP-cre::Tp53fl/fl::lsl-MYCN::lsl-Gli2新基因工程小鼠，自E13.5于放射状胶质启动重组，出生22.7%带突变基因型，84%（42/50）于P18前生第四脑室肿瘤，组学与人CPC（pedB甲基化亚群）一致，为致死性疾病提供早发平台。
主要关键技术方法：使用hGFAP-cre驱动的Tp53fl/fl::lsl-MYCN::lsl-Gli2小鼠（突变型）及同窝对照；取P1–P18脑与体外原代肿瘤球（NSC培养基）作材料；10X Visium CytAssist FFPE空间转录组（4鼠6瘤样，匹配前后脑）；Seurat/Harmony整合、monocle3轨迹、CellChat互作、InferCNV拷贝数、跨种（人GSE264154等）UMAP；体外药敏用CellTiter-Glo测BKM-120、Dinaciclib、Tuvusertib剂量反应；谱系示踪用hGFAP-cre::lsl-R26td-RFP；组化用Ki67、SOX2、TTR、AQP1、OTX2、Arl13b、Kir7.1等。
研究结果：
Alteration of Tp53, MycN, and Gli2 drive CPC formation in mice：突变鼠P8起出现症状，84%外显率，肿瘤位于第四脑室延续正常CP，失去乳头状结构、核异型、Ki67高、多纤毛变单纤毛（Arl13b）、保留E-Cadherin与Kir7.1，12%有三叉神经节转移，模拟人CPC组织学与转移模式。
Tumors arise from a stepwise dedifferentiation which matches embryonic processes：P1标志物正常；P7起SOX2升、TTR丢失、染色质密度增高；P10失AQP1、OTX2，架构崩解；轨迹证实多纤毛分泌细胞→单纤毛SOX2前体样恶性态。hGFAP-cre谱系示踪显示瘤源为菱脑源性（rhombomere 2–8）CP前体而非侧脑室；同驱动在前脑产生胼胝体下区（Subcallosal Zone, SCZ）MYCN阳性神经前体样链状病变（DCX阴性、Kir7.1阴性）。
Transcriptomic signature of tumor cells matches embryological ChP and human CPCs：空间转录组38簇中瘤簇（2/34/38/13）表达胚胎CP标记Lmx1a、Wnt1，SCZ样评分高；细胞周期评分G2/M为主；跨种UMAP中鼠CPC紧邻人CPC，鼠MB-SHH对照紧邻人MB-SHH；前脑病变富集神经元分化早期通路。
Stepwise differentiation and tumor development process is visible in transcriptomic data：重聚类见健康CP集成于簇7；瘤内异质：小病变（簇5/6/9）Sox2低、Ttr留；大病变簇0 Sox2高。monocle3伪时间根于健康CP，顺序再现Ttr↓→Sox2↑→Aqp1/Otx2↓。Wnt/BMP/Notch与胶原、Igf2、Pleiotrophin为瘤内互作；KEGG显示Hedgehog（GLI2驱动）、Wnt、PI3K-Akt、DNA代谢上调。
Tumor derived cultivated cells are growing in vitro and are sensitive to ATR and CDK inhibitors：原代球在NSC介质持续增殖、保留单纤毛与SOX2，可分化为GFAP/TUBB3阳性；药敏中Dinaciclib（CDK1/2/5/9）与Tuvusertib（ATR）的IC50/AUC显著低于对照神经干细胞（p<0.001/p<0.05），BKM-120（PI3K）亦抑生长。
讨论与结论翻译：研究人员指出，并发SHH信号激活（Gli2+MYCN）与TP53失活足以在胚胎CP前体中启动早发CPC，该过程并非单纯增殖，而是由异常SHH触发的发育程序逆转——成熟多纤毛分泌上皮去分化为单纤毛SOX2前体样恶性状态，再激活胚胎Wnt/Hedgehog轴并强加细胞周期与DNA修复依赖。新模型外显率高、潜伏期短（P18内）、定位第四脑室、伴脑膜与三叉神经转移，转录组与人pedB CPC交叉印证，弥补既往c-Myc模型晚发局限。体外原代细胞对CDK与ATR抑制的敏感性为CPC提供可转化靶点，PI3K-Akt同步富集提示联合阻断可能。该工作将CPC起源定位于胚胎CP前体去分化而非单纯累积突变，确立SHH-Gli2-MYCN-TP53轴为驱动核心，并提供早发、可药筛的小鼠平台。
