《Current Issues in Molecular Biology》：Preclinical In Vitro Evaluation of an Innovative Nutraceutical Mixture Modulating the Histamine H1 Receptor—Preliminary Data
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I型超敏反应的主要致病机制涉及组胺介导的H1受体（H1R）激活及随后的磷脂酶Cβ-肌醇三磷酸（PLCβ-IP3）通路信号传导。本研究评估了一种新型保健食品混合物——槲皮素（Quercetin）、紫苏（Perilla frutescens）、乳香（Boswell
I型超敏反应的主要致病机制涉及组胺介导的H1受体（H1R）激活及随后的磷脂酶Cβ-肌醇三磷酸（PLCβ-IP3）通路信号传导。本研究评估了一种新型保健食品混合物——槲皮素（Quercetin）、紫苏（Perilla frutescens）、乳香（Boswellia serrata）、黑加仑（Blackcurrant）、小白菊（Parthenium）、蜡菊（Helichrysum）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus, L. acidophilus）和动物双歧杆菌（Bifidobacterium animalis, B. animalis）——在调节HRH1基因表达和细胞内第二信使肌醇三磷酸（IP3）激活方面的体外功效。定量PCR（qPCR）分析显示，与对照组相比，该混合物使HRH1表达下调约33%（p < 0.05）。此外，ELISA检测表明，该混合物使IP3释放显著减少10.30%（p < 0.05 vs. 阳性对照）。这些结果表明，该保健食品混合物通过降低H1受体基因表达和IP3释放来调节H1R-PLCβ-IP3通路发挥作用。这些发现提示了一种涉及组胺H1受体调节的潜在作用机制。因此，该混合物成为进一步研究H1R-IP3激活级联反应的有前景候选物。
**论文解读文章**
**研究背景**
过敏性疾病（如过敏性鼻炎、哮喘、特应性皮炎等）在全球范围内发病率持续上升，已成为重大公共卫生问题。I型超敏反应的核心病理机制是组胺（histamine）通过激活H1受体（H1R）及下游磷脂酶Cβ-肌醇三磷酸（PLCβ-IP3）信号通路，引发平滑肌收缩、血管通透性增加、瘙痒等临床症状。传统抗组胺药物虽有效，但存在镇静、认知障碍等副作用，且部分患者疗效不佳。因此，开发具有调节H1R通路活性的天然补充剂作为辅助疗法具有重要意义。此前研究已证实，由槲皮素（Quercetin）、紫苏（Perilla frutescens）、乳香（Boswellia serrata）、黑加仑（Blackcurrant）、小白菊（Parthenium）、蜡菊（Helichrysum）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）和动物双歧杆菌（Bifidobacterium animalis）组成的保健食品混合物在体外可减少肥大细胞脱颗粒（35.1%）并降低TNF-α水平，在体内可缩小组胺诱导的风团直径（30%），但其分子机制尚未完全阐明。本研究旨在进一步探讨该混合物对H1R-PLCβ-IP3通路的直接调节作用，为开发新型抗过敏天然产品提供依据。论文发表在《Current Issues in Molecular Biology》。
**主要关键技术方法**
研究人员采用人角质形成细胞系（HaCaT，购自CLS Cell Lines Service）作为实验模型。主要技术方法包括：定量PCR（qPCR）检测HRH1基因表达，以18S和ACTB为内参基因，采用2
-ΔΔCt法计算相对表达量；ELISA法检测细胞培养上清中肌醇三磷酸（IP3）浓度。实验设置阴性对照（未处理细胞）、阳性对照（仅组胺处理）及基准对照（组胺+已知H1受体拮抗剂bilastine）。所有实验均进行生物学三重复。
**研究结果**
**3.1 HaCaT细胞系中H1受体基因表达的下调**
通过qPCR分析，与阴性对照组相比，经混合物处理24小时后，HaCaT细胞中HRH1基因表达下降约33%（p < 0.05）。以两个内参基因（18S和ACTB）分别归一化后，下降幅度分别为32.2%和32.5%，结果一致且具有统计学显著性。该结果表明混合物能在转录水平直接抑制H1受体的表达。
**3.2 HaCaT细胞系中肌醇三磷酸（IP3）的定量**
通过ELISA检测，组胺处理（阳性对照）显著增加HaCaT细胞IP3释放水平。基准对照（bilastine）使IP3释放减少48.42%（p < 0.0001 vs. 阳性对照），证实了有效的受体阻断作用。混合物处理组使IP3释放减少10.30%（p < 0.001 vs. 阳性对照），虽幅度小于基准对照，但差异具有统计学意义。该结果提示混合物可能通过部分抑制H1R活性来减少下游IP3信号。
**总结讨论与结论**
讨论部分指出，组胺通过H1R激活PLCβ-IP3通路是过敏症状发生的关键环节。本研究结果初步表明，该保健食品混合物具有双重作用：一方面下调H1R基因表达（约32%），另一方面减少组胺刺激后的IP3释放（约10%），从而干扰H1R-PLCβ-IP3信号级联。结合前期研究，该混合物在体外表现出类肥大细胞稳定作用和抗组胺样活性，而当前数据揭示了其分子机制涉及H1R表达调控和下游信号抑制。然而，混合物对IP3的抑制效应弱于经典拮抗剂bilastine，提示其可能通过非竞争性调节或部分激动/拮抗作用实现。研究结论翻译如下：该体外研究表明，创新的保健食品混合物——包含槲皮素、紫苏、乳香、黑加仑、小白菊、蜡菊、嗜酸乳杆菌和动物双歧杆菌——可能通过调节HaCaT细胞中的组胺H1受体通路发挥作用。处理显著下调HRH1基因表达并减少组胺处理细胞中的IP3释放，提示其干扰了H1R-PLCβ-IP3信号。当与先前关于该特定配方的研究结合时，当前结果有助于更全面地理解其体外药理学特征。然而，将这些发现转化为体内系统仍需进一步探索。未来研究应优先开展随机临床试验，以评估过敏患者的症状疗效、生物利用度和长期免疫调节效应。
