在哥斯达黎加沿海疫点同时检测犬体内的 Leishmania infantum 和家屋周围沙蝇池样本中的 Leishmania DNA

《Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports》:Concurrent detection of Leishmania infantum in dogs and Leishmania DNA in peridomestic sand fly pools from a coastal focus in Costa Rica

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年08月24日 来源:Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports 1.4

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   摘要由婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)引起的犬内脏利什曼病最近已确认在哥斯达黎加为本土发病,但来自房前屋后环境的分子证据仍然有限。我们调查了临床上疑似利什曼病的犬只,并筛查了 2025 年 3 月至 10 月在塔马里恩多(瓜纳卡斯特省)同一犬只疫源地收

  

摘要

由婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)引起的犬内脏利什曼病最近已确认在哥斯达黎加为本土发病,但来自房前屋后环境的分子证据仍然有限。我们调查了临床上疑似利什曼病的犬只,并筛查了 2025 年 3 月至 10 月在塔马里恩多(瓜纳卡斯特省)同一犬只疫源地收集的白蛉科沙蝇。十只犬只使用快速血清学检测和针对锥虫基质小环 DNA (kDNA) 的实时 PCR (qPCR) 进行了测试;qPCR-阳性样本进一步通过针对内转录间隔区 1 区域 (ITS-1 PCR) 的 PCR 和测序进行物种确认。同时,雌性沙蝇经过形态学鉴定,按种类/地点/吸血状态(每池 2–11 只)进行分组,并通过 kDNA qPCR 进行筛查;选定的阳性池通过数字液滴 PCR (ddPCR) 进行评估,以确证低水平检测。使用宿主 DNA 标记物调查了 qPCR 阳性池中的血餐来源。四只犬只血清学阳性和 qPCR 阳性,ITS-1 测序在两例中确认了 L. infantum,而其他 qPCR 阳性的犬只样本未产生 ITS-1 扩增子,这与低寄生虫 DNA 载量一致。收集了四十五只雌性沙蝇并分为 13 个池;三个池(均由 serrana 卢氏沙蝇(Lutzomyia serrana)组成)在接近检测限处呈 qPCR 阳性,包括一个未饱食池,经 ddPCR 确证。血餐分析在一个阳性池中检测到犬类 DNA,在其他池中检测到禽类 DNA。这些发现记录了在同一地点同时检测到犬只 L. infantum 感染和房前屋后沙蝇池中的 Leishmania DNA。尽管由于寄生虫 DNA 载量低且缺乏沙蝇物种水平的确认,昆虫学发现应谨慎解读,但结果提供了符合当地 Leishmania 循环的初步证据,并支持在哥斯达黎加需要整合犬只和媒介的"One Health"监测。

引言

内脏利什曼病 (VL) 是一种重要的地方性人畜共患疾病,具有全球公共卫生重要性,被世界卫生组织归类为被忽视的热带病 (WHO, 2023)。在美洲,VL 主要由婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)引起,这是一种由白蛉科沙蝇传播的原生动物,其传播传统上与长须卢氏沙蝇复合种(Lutzomyia longipalpis)相关 (Maingon et al., 2008; Rêgo and Soares, 2021)。家犬(Canis familiaris)是人畜共患循环中的主要储存宿主,并能在房前屋后环境中维持寄生虫循环,使犬只监测成为预防和控制策略的核心 (Dantas-Torres, 2024)。
犬内脏利什曼病 (CVL) 呈现广泛的临床谱,从亚临床感染到严重的多系统疾病。临床表现通常是非特异性的,可能包括发热、体重减轻、淋巴结肿大、皮肤和眼部病变、鼻出血、溃疡性病变以及贫血或全血细胞减少等血液学异常,以及其他系统性改变 (Morales-Yuste et al., 2022)。在其他媒介传播感染常见的地区,CVL 可能在临床上与蜱传疾病(例如埃利希体病)重叠,这可能导致漏诊,并突显了在日常兽医实践中进行分子确认的价值 (Solano-Gallego et al., 2011; Montenegro et al., 2026)。
在拉丁美洲,从墨西哥到乌拉圭,VL 均为地方病,其中巴西承担最高的人类病例负担;犬只感染通常在受累地区先于或伴随人类疾病出现 (PAHO, n.d.)。虽然传播动力学已在多个国家得到充分记录,但与皮肤利什曼病 (CL) 相比,L. infantum 在哥斯达黎加的流行病学状况历来被认为是有限的,而 CL 是地方病且广泛报道 (Jaramillo-Antillón et al., 2009; Ministerio de Salud, 2022)。国家监测表明,皮肤利什曼病 (CL)(当地称为"papalomoyo")主要由巴拿马利什曼原虫(Leishmania (Viannia) panamensis)引起(约占报告病例的 75%),而其余病例(约占 25%)归因于其他物种,包括巴西利什曼原虫(L. braziliensis),以及最近发现的圭亚那利什曼原虫(L. guyanensis) (Ministerio de Salud, 2022)。相比之下,支持哥斯达黎加存在 L. infantum(和内脏利什曼病)的证据历来稀少且零散,仅随时间有零星报告,特别是在人类中,且在最近的分子确认之前,犬只中的记录有限 (Carrillo et al., 1999; Ministerio de Salud, 2022)。
最近,Montenegro 等人 (2026) 使用多模态诊断确认了哥斯达黎加犬只中本土 L. infantum 感染,并强调需要在“One Health"框架下加强常规犬只检测并扩大昆虫学监测,以表征当地传播风险。这一新证据表明,哥斯达黎加在某些地区可能正在经历犬只感染条件的变化,这加强了整合评估储存宿主和媒介的综合方法的重要性。
尽管最近确认了犬只感染,但来自哥斯达黎加犬只疫源地房前屋后环境的昆虫学分子证据仍然稀少,限制了对储存宿主 - 媒介界面当地循环的推断。因此,这项探索性研究旨在调查塔马里恩多(瓜纳卡斯特省)临床上疑似利什曼病的犬只,使用血清学和 kDNA qPCR 及 ITS-1 测序进行物种确认,并筛查在同一房前屋后疫源地收集的白蛉科沙蝇池中的 Leishmania DNA (qPCR 和 ddPCR),包括血餐来源鉴定。通过在局部规模整合犬只和昆虫学分子筛查,本研究提供了初步的操作证据,以指导新兴地区的针对性"One Health"监测。

章节片段

伦理声明

犬只血液样本作为常规兽医护理的一部分提交实验室用于诊断目的。所有程序均符合国家法规,并在许可 R-CM-UNA-002-2024-OT-CONAGEBIO 下获得批准。经 ITS-1 测序确认的 Leishmania infantum 病例已根据国家报告要求报告给国家动物卫生机构 (SENASA)。

研究区域

研究在塔马里恩多进行,这是...县的一个沿海区

犬只的血清学和分子结果

表 1 总结了十只评估犬只的临床、流行病学、血清学和分子发现。提供了采样日期以指示病例检测和家庭随访采样的时间顺序。对犬只进行评估是因为它们出现了与犬利什曼病相容的临床症状,或者因为它们与疑似或先前诊断的病例共享家庭。受累犬只的临床发现包括发热、鼻出血、脱发

讨论

本研究记录了在瓜纳卡斯特省塔马里恩多的家犬中分子确认的 Leishmania infantum 感染,以及在房前屋后环境中收集的共生白蛉科沙蝇池中检测到 Leishmania DNA。这些发现共同增加了符合哥斯达黎加西北部沿海地区当地 Leishmania spp. 循环的证据,并补充了表明该国存在本土犬只感染的最新数据 (Montenegro et al., 2026)。

结论

这项探索性研究确认了塔马里恩多的犬只 Leishmania infantum 感染,并在同一地点收集的房前屋后白蛉科沙蝇池中检测到 Leishmania DNA。尽管这些发现符合当地 Leishmania 循环,但基于现有数据,无法明确确定每例犬只感染的本土起源以及当地沙蝇物种在传播中的作用。昆虫学发现应谨慎解读,

CRediT 作者贡献声明

María José Zuniga-Moya: 写作 – 审查与编辑,写作 – 原始稿,方法论,调查,形式分析,数据整理,概念化。Ana E. Jiménez-Rocha: 写作 – 审查与编辑,资源,方法论,调查,资金获取,形式分析。Cielo Barrantes-Cordero: 写作 – 审查与编辑,写作 – 原始稿,方法论,调查,形式分析,数据整理,概念化。Mirna Pla: 方法论,调查,形式分析。

写作过程中生成式 AI 和 AI 辅助技术的声明

在准备本手稿期间,作者使用 ChatGPT (OpenAI) 协助进行英语语言编辑以及清晰度和可读性的改进。作者根据需要审查和编辑了内容,并对出版物的内容承担全部责任。

资金

这项工作得到了 FUNDAUNA 项目 054530(“群体和生态医学诊断与研究”)和 Nacional 大学研究副校长的支持。

利益冲突声明

作者声明,他们没有任何已知的竞争性财务利益或个人关系可能会影响本论文中报告的工作。

致谢

我们感谢犬只主人的合作以及同意将他们的动物纳入本研究。我们还感谢参与实验室活动并在调查期间支持数据收集的轮换实习学生(Universidad Nacional 兽医学院)。
María José Zuniga-Moya|Ana E. Jiménez-Rocha|Cielo Barrantes-Cordero|Mirna Pla|Marta C. Bonilla|Silvia Argüello-Vargas|Gaby Dolz
人畜共患病与昆虫学实验室,人群医学计划,兽医学院,国家大学,P.O. Box 86-40101,埃雷迪亚,哥斯达黎加
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