可持续的稳定性指示光谱处理技术同时定量格列齐特及其可能的碱性降解产物杂质A：多色分析轮廓评估

《Scientific Reports》：Sustainable stability-indicating spectra manipulations for the concurrent quantification of gliclazide and its impurity A as the possible alkaline degradation product: Multi-Color Analytical Profile Assessment

　　

研究人员设计并优化了一种绿色、稳定性指示的紫外-分光光度法，用于定量测定格列齐特（GLI）——一种广泛用于2型糖尿病（T2DM）管理的第二代磺脲类药物。该方法整合了一阶导数分光光度法（D¹）和傅里叶自去卷积（FSD），无需预先分离即可解决GLI与其碱性降解产物（格列齐特杂质A）之间的广泛光谱重叠。该测定对GLI在2.5–25 μg/mL范围内、对其降解产物在2.5–15 μg/mL范围内展现出优异的线性关系。两种分析物的检测限（LOD）范围为0.31至0.43 μg/mL，定量限（LOQ）范围为0.94至1.31 μg/mL。使用乙醇作为绿色无毒溶剂进一步增强了该方法的环境可持续性。根据ICH Q2(R1)指南进行的方法验证确认了其选择性、重现性、稳健性和准确性，D¹和FSD方法中GLI的平均回收率分别为99.48 ± 0.83%和100.87 ± 1.52%。碱性胁迫下的综合强制降解研究验证了该程序的稳定性指示能力，能够在存在降解产物的情况下可靠定量GLI。使用分析生态尺度（Analytical Eco-Scale）、绿色分析程序指数（GAPI）、分析绿色度（AGREE）、国家环境方法指数（NEMI）、环境-性能-实用性指数（EPPI）、分析绿色可持续性评估（AGSA）和现代化绿色分析程序指数（MOGAPI）等工具的绿色度评估共同确认了该方法的环保性和可持续性。此外，该分析策略还使用多维工具进行了全面评估，包括用于分析性能和可靠性的红色分析性能指数（RAPI）和分析方法可靠性指数（AMRI）、用于碳足迹减少的碳足迹减少指数（CaFRI）、用于分析实用性的点击分析化学指数（CACI）以及用于综合多色分析轮廓的RGB 12模型。总之，所开发的方法为原料药和剂型中格列齐特的常规质量控制与绿色药物分析提供了一种高效、环保且具有分析效力的替代传统色谱技术的方案。

**论文主体解读**

**研究背景与意义**
格列齐特（GLI）是第二代磺脲类口服降糖药物，自1970年代起用于治疗2型糖尿病（T2DM），通过关闭ATP敏感性钾通道刺激胰腺β细胞分泌胰岛素，并兼具血管保护与抗氧化特性。其分子中含有磺酰脲特征结构，在碱性条件下易发生水解降解，生成官方认定的降解产物格列齐特杂质A（IMP A）。磺脲类药物的降解会直接影响药效、安全性与制剂货架期，因此建立稳定性指示分析方法（SIAMs）以区分原形药物与降解产物至关重要。现有的HPLC、LC-MS/MS、毛细管电泳等检测方法虽然灵敏，但成本高、耗时长、资源密集，且使用大量有毒有机溶剂，不符合当前绿色分析化学（GAC）的发展要求。目前尚缺乏能够在无色谱分离条件下选择性分辨GLI与其碱性降解产物的稳定性指示紫外分光光度法，且已有格列齐特研究对绿色度评估工具的整合不足。为此，研究人员开展了本项研究，论文发表在《Scientific Reports》。

**研究内容与结论**
研究人员以乙醇为绿色溶剂，建立了基于一阶导数分光光度法（D¹）和傅里叶自去卷积（FSD）的稳定性指示UV分光光度法，实现了GLI与IMP A的同时定量测定而无需预先分离。方法验证遵循ICH Q2(R1)指南，并通过七种绿色度评估工具和多种多维分析工具全面评价了方法的可持续性与分析性能。研究证实所建立的方法可作为一种高效、环保且可靠的传统色谱替代方案，适用于格列齐特原料药和制剂的常规质量控制。

**关键技术方法**
研究采用的主要关键技术包括：紫外-可见分光光度法结合一阶导数（D¹）与傅里叶自去卷积（FSD）光谱信号处理；碱性强制降解（1 N乙醇NaOH，100°C回流1小时）制备IMP A；薄层色谱（TLC）监测降解进程，红外光谱（IR）与质谱（MS）鉴定降解产物结构；依据ICH Q2(R1)指南进行方法学验证；采用NEMI、AGREE、GAPI、Analytical Eco-Scale、EPPI、AGSA和MOGAPI七种工具评估绿色度；应用RAPI、AMRI、CaFRI、CACI与RGB 12模型进行多维度分析轮廓评估。GLI原料药（纯度99.80%）由埃及开罗Amoun制药公司提供，Diamicron片剂（标示含60 mg GLI，批号15GG407X）由埃及开罗Servier制药公司提供。

**研究结果**

*GLI碱性降解产物（IMP A）的鉴定*
通过TLC分析显示IMP A（Rf=0.50）与GLI（Rf=0.75）分离清晰。IR光谱显示1650 cm^-1处羰基伸缩振动带消失，MS谱显示m/z 172的分子离子峰，确证GLI酰胺部分羰基经碱性水解生成了IMP A。STABLE评估得分为25，证实GLI在碱性条件下高度易降解。

*方法优化*
D¹方法在243 nm（IMP A零交叉点）处测定GLI，在227 nm（GLI零交叉点）处测定IMP A。FSD方法采用半峰全宽（FWHM）为50的滤波参数，在235 nm和224 nm处分别定量GLI与IMP A。FSD较D¹展现出更宽的GLI线性范围（2.5–25 μg/mL对比2.5–15 μg/mL）及更低的日内和日间RSD值，表明FSD