TP53突变型CHIP界定促炎表型并预测CAR T细胞治疗后不良预后

《Leukemia》：TP53-mutant CHIP defines a pro-inflammatory phenotype and predicts adverse outcomes after CAR T-cell therapy

　　

在不限潜能克隆性造血（CHIP）接受化疗与造血细胞移植患者中的特征已被充分描述，然而其免疫学相关性及在调节嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗相关毒性、炎症与临床结局中的潜在作用仍不完全明确。在此项针对104例CAR-T受者的探索性研究中，研究人员探讨了既有CHIP克隆对毒性与生存的预测影响，并利用纵向血清样本检视了CHIP相关炎症蛋白组学特征。总体CHIP状态与炎症性毒性、结局或系统性炎症谱无关。克隆动态分析揭示TP53-与ASXL1突变克隆为输注后主导性扩增CHIP克隆，而DNMT3A-与PPM1D突变克隆随时间克隆丰度降低。值得注意的是，TP53突变CHIP与较低血小板和血红蛋白水平、较高基线CAR-HEMATOTOX评分、劣效临床结局及独特炎症特征相关。这些发现确定TP53突变CHIP在CAR-T治疗患者中相较于其他CHIP突变为高危CHIP基因型。重要的是，于CAR T细胞治疗后发生治疗emergent髓系肿瘤的患者展现出独特的克隆扩增与炎症谱模式。综上，这些发现支持一种风险适应性策略，优先对TP53突变CHIP进行纵向监测，尤其在具高CAR-HEMATOTOX评分且发生血细胞减少的患者中。

研究背景：嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法已改善多种难治B细胞恶性肿瘤生存，但超半数受者未能获得持久应答，且细胞因子释放综合征（CRS）、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）与免疫效应细胞相关血液毒性（ICAHT）等毒性显著贡献发病与死亡。不限潜能克隆性造血（CHIP）定义为骨髓或血液中变异等位基因频率≥2%的髓系相关体细胞突变且无非典型髓系肿瘤诊断特征，既往在化疗与自体造血细胞移植（auto-HCT）后淋巴瘤及多发性骨髓瘤（MM）中报道率30%–56%，并与劣效生存及治疗后髓系肿瘤（MN-pCT）相关；其中TP53突变CHIP在CAR-T人群中最常见且可能塑造免疫抑制微环境，但CHIP在CAR-T语境下的免疫学与预后作用既往研究异质性大，具体炎症模式未知。为此，研究人员在LMU大学医院开展观察性研究，纳入2019年1月至2025年3月104例接受标准CD19或BCMA导向CAR-T的r/r NHL或MM患者，探讨CHIP对毒性、生存与炎症的影响。

主要技术方法：研究人员收集淋巴清除期及输注后1、3、6、12月外周血单个核细胞（PBMC），以覆盖74个髓系/淋系基因的靶向测序面板（Haloplex+MiSeq，VarScan2/Pindel，VAF≥1%纳入）纵向检测CHIP；对83例患者按预设时间点（0、2–7、14、28、90、180、360天）血清行Olink Immuno Oncology 92蛋白邻近延伸 assay 蛋白组学；临床毒性按ASTCT（CRS/ICANS）与EHA/EBMT（ICAHT）分级，生存按Lugano/IMWG评估并以Kaplan-Meier与log-rank检验；基线风险评分由年龄>65岁与CAR-HEMATOTOX（HT）评分≥2各计1点构成，以ROC与Gray检验等分析。

研究结果：

CHIP与年龄相关且在多发性骨髓瘤中更常见——104例中39例（37.5%）输注前检出CHIP，随龄增高（80–89岁组75%），MM亚组52.6%高于B-NHL 34.1%；最常见DNMT3A（n=19）、TP53（n=8）、ASXL1（n=7）。总体CHIP状态未关联CAR-T毒性或PFS/OS，但MCL亚组CHIP者生存更差，CHIP组2年非复发死亡（NRM）21.9% vs 8.1%（p=0.055）。

总体CHIP状态未关联CAR-T毒性或临床结局——CRS、ICANS、早/晚ICAHT、中性粒恢复无差异；Olink仅CD8A在无CHIP组上调；基线血细胞计数与CAR-T扩增AUC无组间差。

CHIP克隆展现独特时间动态——纵向NGS示TP53（8/10）与ASXL1克隆倾向扩增，PPM1D（4/5）与DNMT3A（11/14）克隆VAF降低；克隆扩增者WBC恢复差但PFS/OS数值较长。

TP53突变CHIP关联全血细胞减少与独特炎症谱——TP53^mut CHIP（n=8）基线血小板91 vs 207×10⁹/L、血红蛋白8.85 vs 10.3 g/dL、CRP 2.3 vs 0.3 mg/dL、铁蛋白1256 vs 236 ng/mL、HT评分3 vs 1；蛋白组示IL-18、PGF、IL12RB1、CD40、TNFRSF21、TNFRSF12A、PD-L1、Gal-9、CSF-1、MIC-A/B上调，DNMT3A^mut则呈反向特征；TP53^mut CHIP组CAR-T扩增AUC 144 vs 766 cells/μL（p=0.02），PFS/OS缩短（中位PFS 2.9 vs 9.3月，OS 9.9 vs 20.1月）。

高龄与高CAR-HEMATOTOX评分可分层TP53突变CHIP——年龄AUC 0.67，HT评分AUC 0.80，联合评分（>65岁+HT≥2）AUC 0.80，评分2分时敏感性62.5%、特异性84.4%，TP53^mut组中62%得2分 vs TP53^wt组16%。

MN-pCT患者具独特TP53突变克隆扩增与炎症谱——3例（MDS-pCT 1例、AML-pCT 2例）于CAR-T后1.7–4.6年发病，均伴TP53突变克隆扩增（VAF最高70%–71.5%）及后续NRAS/BCOR共突变；炎症谱中IL-18、ADGRG1、IFNγ、MIC-A/B、IL-8、CXCL5上调，TNFRSF9、CCL23、EGF、TWEAK、TNFSF14、CD5、IL-12、LAG3等下调。

讨论与结论翻译：研究人员发现总体CHIP状态不与CAR-T结局或炎症模式相关，但TP53^mut CHIP关联基线血细胞减少、高CAR-HEMATOTOX评分、独特炎症特征及CAR-T扩增受损；克隆动态中DNA损伤反应基因（TP53/ASXL1）选择性扩增而表观调控基因（DNMT3A/PPM1D）收缩，符合CAR-T炎症应激下的突变特异性选择；TP53^mut CHIP通过慢性炎症微环境（IL-18、Gal-9、PD-L1、MIC-A/B）促进T细胞耗竭与造血抑制，并可能奠基MN-pCT发生。结论为：总体CHIP不预测CAR-T毒性与生存，TP53^mut CHIP定义促炎高危亚型，建议对>65岁且HT≥2者行基线靶向测序与远期造血监测。该文发表于《Leukemia》。