摘要
神经损伤是复杂的口腔和颌面外科手术的常见并发症，尤其是在进行广泛肿瘤切除后。基于分泌组的无细胞疗法，源自间充质基质细胞，已成为有前景的再生治疗方法；然而，要实现这种疗法的可靠生产，必须确定能够保证产品效力和一致性的关键质量属性（CQAs）。目前尚未明确体外扩增过程中的复制性衰老对颌骨骨膜来源的间充质基质细胞（JPC）分泌组质量的影响。本研究探讨了JPC的扩增状态是否会影响其分泌组的组成及其神经支持能力。从四个独立的JPC供体中分别收集早期和晚期的分泌组，在每个扩增阶段将其合并，然后应用于由人类诱导多能干细胞衍生的神经元。通过评估神经元存活率、突起生长和神经元标记物的表达来评价其功能效果。通过定量蛋白质组学和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测选定的与衰老相关的分泌表型（SASP）因子来表征分泌组的组成。来自早期扩增阶段的JPC分泌组显著增强了神经元的存活率和突起生长，而晚期扩增阶段的分泌组则表现出较差的神经支持活性。蛋白质组学分析显示，这些分泌组向炎症和应激相关信号通路发生了明显偏移；进一步的ELISA实验证实了分泌组的衰老相关重塑，尤其是晚期扩增组中SASP相关因子的含量增加。这些发现表明，长时间的体外扩增会显著影响JPC分泌组的组成和生物学活性。总体而言，本研究将JPC的与扩增阶段相关的衰老表型确定为分泌组质量的关键决定因素，并支持将其作为JPC衍生分泌组产品生产和标准化的关键质量属性。因此，监测和控制JPC的扩增状态对于确保基于分泌组的再生疗法的一致性、效力和临床应用至关重要。
