超声引导下的纳米气泡破坏可诱导巨噬细胞中的Ccl8表达，从而抑制调节性T细胞（Treg细胞）的功能，进而提升结直肠癌（CRC）免疫治疗的疗效

《Cell Communication and Signaling》：Ultrasound-targeted nanobubble destruction induces Macro Ccl8 to suppress treg function and enhance immunotherapy efficacy in CRC

　　

摘要

背景

由于具有免疫抑制性的肿瘤微环境（TME），微卫星稳定型（MSS）结直肠癌（CRC）对免疫检查点阻断疗法具有很强的抗性。超声引导下的纳米气泡破坏（UTND）提供了一种局部物理递送方法，但其主动的免疫调节机制仍需进一步研究。

方法

制备并表征了负载有CTLA-4抗体（PF4）的超声响应纳米气泡（NBs）。使用CT26小鼠CRC模型评估了四种治疗组的抗肿瘤效果。通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析了TME中的细胞变化。 Western blot分析、qPCR和免疫荧光染色验证了NF-κB通路的激活情况。利用流式细胞术、共聚焦显微镜和酶免疫测定法检测了细胞内活性氧（ROS）的产生情况。此外，还通过流式细胞术、qPCR和Western blot研究了Ccl8对调节性T细胞（Treg）的影响。

结果

UTND与抗CTLA-4联合治疗相比单一药物治疗更能抑制肿瘤生长。scRNA-seq鉴定出一种在高组中更为丰富的表达CCL8的巨噬细胞亚群（Macro Ccl8）。UTND促进ROS的产生，激活NF-κB信号通路并增加Ccl8的转录。Macro Ccl8分泌的CCL8通过Ccl8-Ccr2轴调节Treg的功能。结合直接的CTLA-4检查点抑制作用，这一系列机制共同提升了CD8+ T细胞的活性。

结论

在CT26小鼠模型中，UTND与CTLA-4抗体联合作用不仅通过直接阻断CTLA-4检查点，还通过ROS–NF-κB–Ccl8轴诱导Macro Ccl8的产生，从而部分调节了免疫抑制性的TME。这种双重机制削弱了Treg的功能并增强了抗肿瘤免疫力，为将基于超声的物理干预与免疫疗法结合用于MSS CRC提供了临床前依据。

背景

由于具有免疫抑制性的肿瘤微环境（TME），微卫星稳定型（MSS）结直肠癌（CRC）对免疫检查点阻断疗法具有很强的抗性。超声引导下的纳米气泡破坏（UTND）提供了一种局部物理递送方法，但其主动的免疫调节机制仍需进一步研究。

方法

制备并表征了负载有CTLA-4抗体（PF4）的超声响应纳米气泡（NBs）。使用CT26小鼠CRC模型评估了四种治疗组的抗肿瘤效果。通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析了TME中的细胞变化。通过Western blot分析、qPCR和免疫荧光染色验证了NF-κB通路的激活情况。利用流式细胞术、共聚焦显微镜和酶免疫测定法检测了细胞内活性氧（ROS）的产生情况。此外，还通过流式细胞术、qPCR和Western blot研究了Ccl8对调节性T细胞（Treg）的影响。

结果

UTND与抗CTLA-4联合治疗相比单一药物治疗更能抑制肿瘤生长。scRNA-seq鉴定出一种在高组中更为丰富的表达CCL8的巨噬细胞亚群（Macro Ccl8）。UTND促进ROS的产生，激活NF-κB信号通路并增加Ccl8的转录。Macro Ccl8分泌的CCL8通过Ccl8-Ccr2轴调节Treg的功能。结合直接的CTLA-4检查点抑制作用，这一系列机制共同提升了CD8+ T细胞的活性。

结论

在CT26小鼠模型中，UTND与CTLA-4抗体联合作用不仅通过直接阻断CTLA-4检查点，还通过ROS–NF-κB–Ccl8轴诱导Macro Ccl8的产生，从而部分调节了免疫抑制性的TME。这种双重机制削弱了Treg的功能并增强了抗肿瘤免疫力，为将基于超声的物理干预与免疫疗法结合用于MSS CRC提供了临床前依据。