通过使用CD45和CD56表面标志物耗尽母体免疫细胞来富集滋养层细胞：从宫颈获取和分离滋养层细胞（TRIC）的方法

《Diagnostics》：Trophoblast Enrichment by Maternal Immune-Cell Depletion Using CD45 and CD56 Surface Markers in Trophoblast Retrieval and Isolation from the Cervix (TRIC)

　　

摘要

背景：从宫颈获取并分离滋养层细胞（TRIC）已成为一种有前景的替代性方法，可用于非侵入性的产前诊断。然而，母体免疫细胞的污染仍然是一个主要问题，可能会影响滋养层细胞的纯度以及后续胎儿基因分析的可靠性。 方法：通过使用针对CD45或CD56的抗体进行免疫磁分离，选择性地去除母体免疫细胞。随后，利用CD45、CD56、HLA-G、细胞角质蛋白7（CK7）和β-人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）对剩余细胞进行HLA-G阳性的滋养层细胞富集，并通过免疫荧光和基因表达分析对其进行鉴定。 结果：与CD45介导的去除方法相比，CD56介导的去除方法能更有效地清除母体免疫细胞，这一点从CD56表达的显著降低中可以看出。CD56去除后，CK7的表达呈现上升趋势，而β-hCG的表达基本保持不变。免疫荧光分析进一步显示，在CD56去除后，CK7⁺/β-hCG⁺滋养层细胞的比例显著增加。 结论：在评估的各项去除策略中，CD56介导的去除方法在维持滋养层细胞特性方面具有更优的优势，这表明它有助于进一步优化基于TRIC的非侵入性产前基因检测中的滋养层细胞分离技术。