漆树（Rhus coriaria L.）皮肤抗炎作用的体内与体外研究

《Inflammopharmacology》：In vivo and in vitro investigation of skin anti-inflammatory effect of Sumac (Rhus coriaria L.)

　　

摘要
背景：漆树（Rhus coriaria L.，漆树科）果实作为潜在的营养保健品和化妆品成分正受到越来越多的关注。在中东国家，它既被用作香料，也被用作药物。从民族药理学研究中发现，将果实制剂应用于皮肤损伤的做法得到了少数关于伤口愈合的实验研究的支持。本研究基于先前在人角质形成细胞（HaCaT）中观察到的体外抗炎活性，旨在将漆树的体外效应转化为体内皮炎模型。
结果：研究人员通过巴豆油诱导的小鼠耳部皮炎模型，研究了两种极性漆树果实提取物（丙酮提取物ARC；乙醇提取物mERC）。在皮炎诱导后6小时和24小时，通过水肿、白细胞浸润和组织学特征评估了体内局部抗炎活性；还通过PCR阵列分析了炎症基因的表达。研究人员使用促炎介质刺激HaCaT细胞，在相同的暴露时间点（6小时和24小时）对体内识别的生物学靶点进行了体外验证。两种提取物均抑制了PMA诱导的HaCaT细胞中IL8的释放，但mERC显示出更低的IC₅₀（分别为18.68 μg/mL vs. 26.34 μg/mL）。根据体外效应，两种提取物（300–1000 μg/mL）在皮炎诱导后6小时和24小时均减轻了小鼠耳廓的水肿和中性粒细胞浸润，且活性相当。炎症耳组织中的基因表达谱提示TNF和IL4/IL13通路参与了ARC和mERC的抗炎活性。这一假设通过在HaCaT细胞上的进一步体外实验得到证实，其中两种提取物均抑制了TNF诱导的IL-8，IC₅₀低于1.5 μg/mL。同样，mERC再次显示出比ARC略低的IC₅₀（1.32 μg/mL vs. 1.63 μg/mL）。类似地，最具前景的提取物还抑制了IL-4诱导的CCL26释放，IC₅₀为1.06 μg/mL。
结论：本研究支持漆树果实对皮肤炎症的生物学特性的相关性。此外，与TNF和IL4/IL13通路相关的作用机制提示了进一步针对皮肤过敏和自身免疫疾病的具体研究。

**论文解读文章**

**研究背景与问题**
炎症性皮肤病是最常见的皮肤科疾病，其病理生理机制在过去几十年中已被深入研究。炎症生物标志物的发现推动了新型生物疗法的开发，如抗TNF-α（肿瘤坏死因子-α）、抗IL23（白细胞介素-23）和抗IL4（白细胞介素-4）抗体，在重症疾病中取得了突破性成果（Dubin等 2021；Singla等 2023）。对安全、创新治疗的需求也促使研究人员探索天然来源的化合物并开发新的合成小分子（Butala等 2023；Roy等 2023）。药用植物的传统用途仍为皮肤药理学研究提供灵感，是药物发现的重要信息来源（Fernandes等 2023）。漆树（Rhus coriaria L.）属于漆树科，其果实因作为中东烹饪传统中特有的酸味香料而广受欢迎。根据民族药理学数据，包括本研究团队在内的多项研究已探讨了漆树果实的生物活性和植物化学组成（Nozza等 2020；Martinelli等 2022；Khalilpour等 2019）。具体而言，高浓度的多酚（如黄酮类和没食子鞣质）与降血糖、抗炎、抗氧化和抗菌活性相关（Alsamri等 2021；Elagbar等 2020；Hashem-Dabaghian等 2022）。漆树在波斯传统医学中用于伤口愈合、代谢疾病和胃肠道疾病（Said等 2002；Calabro等 2023；Rodriguez-Castillo等 2025）。此外，该植物在中东多个国家长期用于皮肤损伤，包括烧伤、伤口和湿疹（Altundag和Ozturk 2011；Sezik等 1991）。然而，少数体内研究表明，漆树果实极性提取物的局部应用可能通过抗菌和促进胶原蛋白活性来促进伤口愈合（Alsarayreh等 2022；Gabr和Alghadir 2019）。研究人员先前已证明，果实乙醇浸渍提取物（mERC）是一种富含多酚的提取物，与水煎剂相比，在TNF-α刺激的人皮肤角质形成细胞（HaCaT）中表现出更强的体外抗炎作用（Khalilpour等 2019）。此外，研究人员将mERC与优先富含鞣质的丙酮提取物（ARC）在幽门螺杆菌诱导的炎症模型中进行了比较，显示出相当的生物活性（Martinelli等 2022）。据研究人员所知，漆树在皮肤层面的体内抗炎活性仍缺乏实验证据。为此，研究人员试图通过评估漆树提取物局部应用后抑制巴豆油诱导的小鼠耳部皮炎的能力，将体外发现转化为体内证据。巴豆油从巴豆种子中提取，含有佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯（PMA），一种蛋白激酶C激活剂，可影响多种细胞过程并触发炎症反应。该特性可被实验性地用于在皮肤中复制皮炎（Griswold等 1998；Ivetic Tkalcevic等 2012）。此外，研究人员采用暴露于PMA的HaCaT皮肤角质形成细胞的体外方法，以表征提取物对体内研究中确定的选定靶点的活性。

**研究内容与结论**
本研究通过体内和体外模型，证明了漆树（Rhus coriaria L.）果实提取物对皮肤炎症的疗效。研究结果表明，其作用机制可能涉及抑制TNF-α和IL13（白细胞介素-13）通路，这些通路在急性和慢性炎症中的白细胞募集过程中起关键作用。因此，本研究结果为未来阐明漆树提取物对慢性皮肤炎症以及过敏性和自身免疫性皮肤病的作用奠定了基础。论文发表在《Inflammopharmacology》。

**主要关键技术方法**
研究人员使用了巴豆油诱导的耳部皮炎小鼠模型（小鼠来源：Envigo RMS，意大利）进行体内研究，通过测量耳水肿（重量差）、髓过氧化物酶（MPO）活性评估中性粒细胞浸润，并进行组织学分析（苏木精-伊红染色）。基因表达分析采用PCR阵列（小鼠炎症细胞因子与受体RT2 Profiler，包含84个靶基因）对6小时后的耳组织进行检测。体外实验使用人角质形成细胞（HaCaT细胞系，德国），通过ELISA检测IL8和CCL26释放，并用MTT法评估细胞毒性。提取物制备采用乙醇浸渍（mERC）和丙酮提取（ARC）两种方法。植物化学分析采用液相色谱-高分辨质谱（LC-HRMS）对mERC进行靶向分析。

**研究结果**

**1. 漆树提取物对PMA诱导的HaCaT细胞IL8释放的抑制作用**
通过MTT法排除细胞毒性后，研究人员发现两种提取物（mERC和ARC）在6小时和24小时均抑制PMA诱导的IL8释放，但mERC的IC₅₀（24小时为18.68 μg/mL）低于ARC（26.34 μg/mL），表明mERC活性更强。

**2. 漆树提取物在巴豆油诱导的皮炎模型中的抗炎作用**
体内实验显示，两种提取物（300–1000 μg/cm²）在皮炎诱导后6小时和24小时均呈剂量依赖性地减轻耳水肿（mERC最高达31%–41%抑制，ARC最高达46%–55%抑制）和中性粒细胞浸润（MPO活性抑制：mERC为29%–39%，ARC为36%–49%），组织学分析也证实了抗炎效果。

**3. 漆树提取物抗炎靶点的体外验证**
PCR阵列分析表明，ARC和mERC在体内下调了IL13、TNFSF11、TNFSF11B和VEGFA等基因，提示TNF和IL4/IL13通路参与。体外验证显示，两种提取物均抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞中IL8释放（IC₅₀约1.5 μg/mL），mERC略优；mERC还抑制IL4诱导的CCL26释放（IC₅₀为1.06 μg/mL），证实了其对IL4/IL13通路的作用。

**4. LC-HRMS植物化学分析**
对mERC的靶向LC-HRMS分析初步鉴定出75种化合物，包括苹果酸及其糖基化形式、没食子酸、黄酮类（如杨梅素、山奈酚、槲皮素衍生物）以及大量没食子鞣质（最高至十二没食子酰葡萄糖）。

**讨论与结论**
讨论部分指出，漆树果实提取物的抗炎活性与多酚（尤其是没食子鞣质和黄酮）相关，且mERC和ARC在体内表现出与阳性对照（氢化可的松和吲哚美辛）相当的效应。转录数据揭示了TNF和IL4/IL13通路的下调，体外实验进一步证实了这些通路的作用。本研究为漆树在皮肤炎症中的应用提供了证据，并提示其在过敏性和自身免疫性皮肤病（如接触性皮炎、特应性皮炎和银屑病）中的潜在价值。未来需研究慢性炎症模型以及特定多酚的贡献，并探索制剂策略（如醇质体和植质体）以提高生物利用度。

**研究结论翻译**
本研究通过体内和体外模型证明了漆树（Rhus coriaria L.）果实提取物对皮肤炎症的疗效。研究结果提示，其作用机制可能涉及抑制TNF-α和IL13通路，这些通路在急性和慢性炎症中的白细胞募集过程中起关键作用。因此，本研究结果为未来阐明漆树提取物对慢性皮肤炎症以及过敏性和自身免疫性皮肤病的作用奠定了基础。