生物加工方法是影响IgM寡聚化过程的关键因素

《Applied Microbiology and Biotechnology》：Bioprocessing method is a critical factor for IgM oligomerization

　　

摘要

单克隆免疫球蛋白M亚类在高效应对多种医疗并发症方面具有巨大潜力。本文对比了两种稳定的重组中国仓鼠卵巢DG44和K1细胞系，这两种细胞系均能表达由κ轻链和μ重链组成的IgM，可以根据是否添加连接链分子来生产五聚体（5IgM）或六聚体（6IgM）IgM分子。这两种重组细胞系分别通过 fed-batch 和半连续灌注方法进行生物加工。比较了它们的生产技术，包括活细胞浓度、特定生长率（μ）、代谢物水平以及时空产量。还对重组细胞系的细胞内和细胞外表达水平及后续寡聚化状态进行了分析。此外，本文还介绍了一种单步阴离子交换色谱法，该法能够快速高效地纯化高浓度产物，同时保持对IgM稳定性至关重要的pH值和盐浓度。在半连续生物过程中每天补充新鲜培养基并清除有毒代谢物，有助于提高产物的寡聚体纯度，尤其是对于6IgM而言，这一效果尤为显著。

要点

• 直接比较了used-batch（FB）和semi-continuous perfusion（SP）方法在五聚体和六聚体IgM生产中的效果 • CHO细胞的semi-continuous perfusion方法每天可生产超过500毫克5IgM和超过1000毫克6IgM • 生物加工方式会影响IgM的寡聚化程度