柴胡皂苷通过FXR/Rubicon通路抑制自噬，从而促使前脂肪细胞褐色化

《Chinese Journal of Integrative Medicine》：Gypenosides Induce Preadipocyte Browning via FXR/Rubicon Pathway-Mediated Inhibition of Autophagy

　　

摘要

目的

确定芹菜苷（GPs）是否通过famesoid X受体（FXR）/Rubicon介导的autophagy抑制作用诱导前脂肪细胞褐变，并改善小鼠的肥胖相关代谢紊乱。

方法

体外实验中，将分化的3T3-L1前脂肪细胞用1–6 μ g/mL的芹菜苷处理。通过Western blot和qPCR检测褐变相关蛋白[解偶联蛋白1（UCP1）、过氧化物酶体增殖激活受体γ共激活剂1-α（PGC-1α）、PR结构域包含蛋白16（Prdm16）]、autophagy相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3形式II/形式I（LC3II/LC3I）、Beclin-1、重组autophagy相关蛋白7（ATG7）和FXR/Rubicon的表达。使用shRNA慢病毒进行FXR敲低实验。通过mRFP-GFP-LC3串联报告基因评估autophagy通量。体内实验中，高脂饮食诱导的肥胖小鼠随机分为5组（每组n=6只）：对照组、模型组以及低剂量和高剂量芹菜苷组（分别通过口服给予300 mg/kg和600 mg/kg），以及西格列汀（SIT）组（30 mg/kg）。所有处理持续12周，随后分析代谢参数、脂肪细胞组织学特征及腹股沟白色脂肪组织中的蛋白质表达。

结果

与分化培养基对照组相比，芹菜苷（3–6 μ g/mL）显著上调了UCP1、PGC-1α和Prdm16的蛋白质水平，并降低了LC3II/LC3I的比例（所有P<0.01）。芹菜苷增加了FXR和Rubicon的表达（P<0.01）。FXR敲低实验消除了这些效应（P<0.01）。在肥胖小鼠中，芹菜苷（600 mg/kg）降低了体重、血清甘油三酯、总胆固醇和空腹血糖，减小了脂肪细胞大小，并提高了UCP1、PGC-1α、Prdm16和FXR的水平，同时降低了LC3II/LC3I、Beclin-1和ATG7的水平（与模型组相比，P<0.05）。

结论

芹菜苷激活FXR/Rubicon信号通路以抑制autophagy，从而诱导前脂肪细胞褐变，为基于草药的抗代谢疾病策略提供了新途径。