《Molecular Pain》：Pharmacological inhibition of MKP-1 exacerbates central post-stroke pain and neuroinflammation in mice
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中枢卒中后疼痛（CPSP）因机制不明而难以治疗，新证据表明小胶质细胞驱动的神经炎症参与其发生。丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1，亦称双特异性磷酸酶1/DUSP1）负调控MAPK信号并调节神经系统疾病中的炎症，但其在CPSP中的作用未明。研究人员采用小鼠
中枢卒中后疼痛（CPSP）因机制不明而难以治疗，新证据表明小胶质细胞驱动的神经炎症参与其发生。丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1，亦称双特异性磷酸酶1/DUSP1）负调控MAPK信号并调节神经系统疾病中的炎症，但其在CPSP中的作用未明。研究人员采用小鼠丘脑出血模型考察MKP-1在CPSP中的表达与功能，以行为学检测痛觉超敏和情感障碍，以免疫荧光与免疫印迹评估丘脑内MKP-1表达、小胶质细胞活化及炎症信号。药理抑制MKP-1用以评估功能贡献。丘脑出血诱导持续性机械超敏与焦虑样行为，伴病灶周围丘脑显著小胶质细胞活化；MKP-1在卒中后明显上调且主要定位于小胶质细胞。抑制MKP-1加剧痛行为并增强小胶质细胞活化，促炎介质与p38 MAPK磷酸化水平升高。结果表明MKP-1可能作为丘脑出血后小胶质细胞介导神经炎症的内源性负调控因子，MKP-1信号的药理调节值得作为CPSP潜在干预方向进一步研究。
中枢卒中后疼痛（CPSP）影响约8%–12%卒中存活者，丘脑损伤后发生率更高，患者表现为自发痛、机械与热超敏及焦虑抑郁，常规镇痛疗效差。丘脑腹后核出血与CPSP强相关，既往研究提示病灶周围丘脑小胶质细胞持续活化促进痛行为，但内源性调控小胶质炎症的机制不清。MAPK家族（p38、JNK、ERK）调控小胶质炎症，p38活化增强促炎因子释放并参与神经病理性痛；MKP-1作为双特异性磷酸酶可去磷酸化失活p38与JNK，在周围神经与中枢胶质细胞中限制炎症，但其在丘脑出血后小胶质反应及CPSP中的作用从未被直接考察。研究人员假设MKP-1是丘脑损伤后炎症的内源性刹车进而影响CPSP，故用小鼠丘脑出血模型展开验证。该研究发表于《Molecular Pain》。
关键技术方法上，研究人员使用8–10周雄性C57BL/6J小鼠，以立体定位注射胶原酶至腹后外侧核建立丘脑出血（TH）模型，假手术组仅穿刺；药理组术后即刻起每48小时腹腔注射MKP-1抑制剂BCI215（5 mg/kg）。行为学涵盖von Frey机械超敏、Hargreaves热痛敏、Bederson神经缺损评分及旷场、明暗箱、高架十字迷宫测焦虑样行为；分子层面取病灶周围丘脑做Western blot与MKP-1/Iba1双标免疫荧光，体外用BV2小胶质细胞以氧合血红蛋白（OxyHb）诱导炎症并施BCI215或p38抑制剂Adezmapimod，辅以RNA-seq做转录组富集。
研究结果部分，第一项“丘脑出血诱导小鼠持续性机械与热超敏”显示，TH组术后第1至21天von Frey缩足频率升高、热撤足潜伏期缩短，假手术组稳定，确认CPSP模型成功。第二项“丘脑出血产生焦虑样行为而不影响运动”中，旷场总路程无差异，但中心距离与时间减少；明暗箱进亮区次数与停留时间降低；高架十字迷宫开臂进入与时长下降，提示焦虑样改变。第三项“MKP-1在丘脑出血后小胶质细胞中上调”经Western blot与免疫荧光证实，术后4与14天丘脑MKP-1蛋白升高，且主要与Iba1共标，定位于小胶质细胞。第四项“MKP-1抑制加剧神经缺损与感觉超敏”中，BCI215进一步提升Bederson评分，von Frey缩足更频、热潜伏期更短。第五项“MKP-1抑制加重丘脑出血后焦虑样行为”重复三类焦虑范式，BCI215组中心探索、亮区停留、开臂进入均较Vehicle组更低。第六项“MKP-1抑制增强神经元损伤”由H&E与TUNEL显示，BCI215组嗜酸性神经元与凋亡细胞数多于Vehicle组。第七项“MKP-1抑制经p38 MAPK通路增强小胶质炎症信号”在BV2细胞中表明，BCI215提升p-p38水平及IL-6、IL-1β、TNF-α释放，联用p38抑制剂可回调；MerTK表达亦随处理改变。第八项“转录组分析识别MKP-1相关炎症与突触通路”显示差异基因富集于炎症（Il1b、Tnf、Ccl2与MKP-1反向）与突触传递（Grin2a、Gria2）条目，提供环路重塑候选。
讨论部分总结指出，MKP-1在卒中后丘脑小胶质细胞上调可能是代偿性制动过度炎症；药理抑制通过解除对p38的去磷酸化抑制而放大炎症、加剧痛与焦虑及神经元损伤，与临床CPSP伴情绪障碍一致。作者自陈局限：BCI215同时抑MKP-1与MKP-3，缺小胶质特异MKP-1条件敲除或过表达验证；转录组仅提供候选；仅用雄鼠。结论部分翻译为：本研究证明MKP-1可能通过限制小鼠丘脑小胶质细胞介导的神经炎症在中枢卒中后疼痛中发挥保护作用；结果突出MKP-1作为潜在内源性调控因子，MKP-1依赖通路的调节可作为CPSP治疗的探索策略。
