大豆皂苷A1通过潜在增强嗜黏蛋白阿克曼氏菌的保肝能力、恢复肠道屏障稳态以及推测性调节Wnt/β-catenin信号通路，改善代谢功能障碍相关脂肪性肝炎

《Food Bioscience》：Soyasaponin A 1 Ameliorates Metabolic Dysfunction-associated Steatohepatitis via Potentially Reinforcing Hepatoprotective Capacity of Akkermansia muciniphila, Restoring Intestinal Barrier Homeostasis, and Putatively Modulating Wnt/β-catenin Signaling Pathway

　　

摘要

引言

代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）是一种普遍且具有进展性的慢性肝病，目前针对该病的靶向治疗手段十分有限。我们此前研究发现，大豆皂苷A1（SS-A1）可能通过增加嗜黏蛋白阿克曼菌（Akk）的丰度来预防MASH，但其潜在的作用机制尚不明确。

目标

本研究旨在探讨SS-A1与Akk联合治疗MASH的协同疗效及其作用机制。

方法

采用蛋氨酸-胆碱缺乏（MCD）饮食诱导小鼠实验性MASH模型。通过伪无菌（PGF）、无菌（GF）小鼠模型及体外实验进行验证，并开展病理染色、生化分析、Western blot、实时定量PCR及转录组测序。

结果

SS-A1与Akk联合治疗的效果优于单一处理，显著减轻了MCD诱导MASH小鼠的肝脂肪变性、肝细胞气球样变、纤维化及肝损伤，并降低了肝脏脂质积累。机制上，联合干预通过上调紧密连接蛋白和黏蛋白分泌、抑制脂多糖（LPS）移位来恢复肠道屏障稳态，从而抑制肝脏TLR4/NF-κB炎症级联反应。肠道微生物耗竭可使SS-A1单一治疗的疗效消失，并部分削弱Akk的保护作用，而联合干预仍保留保护作用。体外实验显示，SS-A1增加了Akk培养液的浊度，并倾向于提高其培养密度。此外，联合干预对肠道屏障完整性的有益作用初步与Wnt/β-catenin信号通路的增强相关。

结论

本研究初步表明，SS-A1可能通过支持Akk的肝脏保护特性、恢复肠道屏障稳态以及调控Wnt/β-catenin信号通路，在MCD诱导的小鼠模型中减轻MASH表型。

引言

代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD， formerly 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD））是一种全球性的慢性肝脏疾病，其特征是在无过度饮酒及其他肝脏损伤原因的情况下出现肝脂肪变性（影响≥5%的肝细胞）（Eslam等，2020）。代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH， formerly 非酒精性脂肪性肝炎（NASH））是MAFLD的进展性亚型。病理上，MASH定义为肝脂肪变性、肝细胞气球样变性和小叶炎症共存（Fan等，2024）。作为全球公共卫生威胁，MAFLD给所有年龄段人群带来了沉重的代谢疾病负担；其在中国发病率不断上升，迫切需要安全有效的营养干预策略（Younossi等，2025）。

目前，仅有resmetirom和semaglutide在美国（US）和欧盟（EU）获批用于治疗MASH（Harrison等，2024；Sanyal等，2025），两者均适用于伴有F2-F3纤维化的非肝硬化患者，需与生活方式改变联合使用（Bansal等，2025；Chen等，2025）。在中国，尚无针对MASH的靶向药物治疗方案获批，生活方式调整仍是主要临床干预手段。

MASH是一种由营养过剩、胰岛素抵抗、肥胖和血脂异常驱动的多因素疾病（Steinberg等，2025）。其发病机制涉及脂质代谢紊乱、氧化应激、炎症和线粒体功能障碍（Habibullah等，2024；Miller等，2025）。高脂、高热量和精制碳水化合物饮食在MASH的发病和进展中起关键作用。近年来，源自植物食品（如果实、蔬菜和全谷物）的植物化学物因其潜在预防和治疗的代谢性疾病（包括MASH）作用而受到广泛关注（Wang等，2025）。

大豆皂苷（SS）是大豆及其产品中富含的典型五环三萜皂苷。它们分为四组（A、B、E、DDMP）（Singh等，2017），其中A组和B组在大豆产品中最常见（Gü?lü-Ustünda? & Mazza，2007）。大豆皂苷具有抗炎、抗氧化和调节血脂的作用。我们此前的研究表明，大豆皂苷通过调节肠道微生物群落来减轻MASH（Su等，2024；Xiong等，2021）。重要的是，大豆皂苷A1（SS-A1）对MASH的保护作用依赖于肠道微生物，且SS-A1可增加嗜黏蛋白阿克曼菌（Akk）的相对丰度（Su等，2024），提示其具有类似益生元的作用。

Akk是一种定植于肠道黏液层的革兰氏阴性菌，约占人类肠道疣微菌门的83%（Vallianou等，2021）。Akk与肥胖、2型糖尿病（T2D）和脂肪性肝病密切相关（Zhai等，2019）。它通过减轻氧化应激、肝脏脂质积累（Khalili等，2024；Zhuge等，2025）、炎症（Han等，2023；Zhang等，2025）以及增强肠道屏障功能（Hu等，2025；Nian等，2023）来缓解MASH。临床和动物研究一致表明，MASH患者和动物模型中Akk水平降低（Nistal等，2019；?zkul等，2017；Schwimmer等，2019；Tsai等，2021；Zhou等，2022），而补充Akk可改善MASH（Kim等，2020；Wu等，2023）。

近年来，肠道屏障已被认为是MASH发展的关键调节因素（Long等，2024；Seo等，2026）。肠道屏障功能缺陷会增加肠道通透性，使LPS等微生物产物进入门脉循环并引发肝脏炎症，从而促进MASH进展（Vancamelbeke，2017）。在MAFLD/MASH患者和动物模型中，常观察到紧密连接受损及occludin和ZO-1表达降低（AlMarzooqi等，2024；Chelakkot等，2018；Gieryńska等，2022）。Akk通过增厚黏液层、上调紧密连接蛋白和减少LPS渗漏来增强肠道屏障功能（Wu等，2023）。

MASH是一种普遍的慢性肝病，治疗选择有限。尽管Akk改善MASH的治疗潜力已初步得到认可，但有效调控其生物功能以发挥强大治疗效果的方法仍不明确。天然植物来源的化合物作为益生元调节特定益生菌，已成为解决这一挑战的一种有前景的方案。我们的初步数据显示，大豆皂苷对MASH具有保护作用，且肠道微生物是皂苷生物活性的关键介质；这些化合物重塑肠道微生物组成并选择性富集有益菌，尤其是Akk（Han等，2021；Mezhibovsky等，2021；Shaheen等，2025）。然而，几个关键科学问题仍未解决。尚不清楚SS-A1在体外纯培养和复杂的体内肠道微环境中是否直接促进Akk增殖。此外，SS-A1调控的Akk改善MASH的下游分子机制也不明确。现有证据仅证实SS-A1在体内可上调肠道Akk丰度，而SS-A1与Akk对肠道屏障稳态和肝脏炎症的联合调控作用及其相互作用的核心信号通路仍未被表征。

在已确立的SS-A1治疗与Akk丰度升高之间的相关性基础上，本研究聚焦于两个核心问题：SS-A1是否在体外和体内调控Akk增殖并增强其MASH保护功能，以及SS-A1重塑的Akk发挥治疗效果的分子通路是什么。鉴于肠道屏障完整性和肠道炎症通过肠-肝轴在MASH发病机制中的核心作用，本工作进一步研究SS-A1与Akk维持肠道屏障稳定性和抑制全身及肝脏炎症的联合效应。通过整合转录组分析和表型验证，系统筛选和验证SS-A1-Akk相互作用期间调控肠道上皮稳态的关键信号通路。

试剂片段

SS-A1按照此前描述的方法制备（Zhao等，2011）。α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA，货号A17910）、I型胶原（Collagen I，货号A22090）和核因子κB p65（NF-κB p65，货号A19653）抗体，以及所有二抗，均购自ABclonal（中国武汉）。Toll样受体4（TLR4，货号sc-293072）抗体购自Santa Cruz Biotechnology（美国加利福尼亚州Santa Cruz）。以下抗体……

SS-A1增强Akk在MCD诱导的MASH小鼠中的肝脏保护能力

采用MCD饮食诱导的小鼠MASH模型，评估SS-A1、Akk及其联合干预对MASH的预防效果。与饲喂MCS饮食的对照小鼠相比，MCD饮食小鼠肝脏重量显著降低（图S1.E），肝脏指数明显升高（图S1.G）（p<0.05），间接提示肝脏脂质积累。大体形态学观察显示，饲喂MCS饮食的对照小鼠肝脏呈……

讨论

MAFLD及其进展形式MASH的全球性激增与高热量、高脂饮食模式、肥胖和代谢综合征的患病率上升密切相关（Le等，2023）。作为全球主要的公共卫生负担，MASH可进展为肝硬化和肝细胞癌等不可逆并发症，凸显了开发有效预防和治疗策略的紧迫性。天然来源的植物化学物（如谷物、果实和……

结论

总之，SS-A1倾向于增加Akk培养液的浊度，可能在体外培养条件下对Akk产生潜在的促进作用。在传统、PGF和GF小鼠模型中均一致观察到，SS-A1与Akk联合干预与MASH相关病理表现的减轻相关，包括肝脂肪变性、炎症和纤维化的减轻，以及受损肠道屏障结构和功能的恢复……

作者贡献声明

张可：方法论。卢佳致：方法论。覃增辉：撰写—审阅与编辑，撰写—原稿，方法论。赵龙英：撰写—审阅与编辑，撰写—原稿，获取资金，概念化。郭庆军：调查。郑祥义：资源。罗慧宇：监督。黄怡婷：调查。李清：资源。李梓俊：方法论。钟凌云：调查。王杰贤：方法论

未引用参考文献

Bhopale and Srinivasan, 2026；Chelakkot等，2018；Chen等，2025；Di and Jia, 2024；Krawetz and Kelly, 2008；Tang and Peng, 2025；Vancamelbeke and Vermeire, 2017；Wu等，2023；Zhang等，2025

利益冲突声明：

作者声明不存在任何可能影响本文工作的已知竞争性经济利益或个人关系。

附录A. 数据可用性声明

本研究产生的所有原始转录组测序数据已存入NCBI序列读入文库（SRA）公共仓库，BioProject登录号为PRJNA1482276（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/PRJNA1482276）。所有与本研究成果相关的支持性数据集和分析文件可合理要求通讯作者提供。

机构审查委员会声明：

所有动物实验均按照ARRIVE指南进行。所有程序均符合负责的动物实验伦理委员会（机构和国家级）的伦理标准。所有动物程序均经南方医科大学实验动物伦理委员会批准（编号：SMUL202405006）。

资金支持

本工作由国家自然科学基金委员会（NSFC）资助（项目编号：82373554，82574076）。

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突：覃增辉，郭庆军，张可，卢佳致，王杰贤，李梓俊，钟凌云，黄怡婷，李清，郑祥义，罗慧宇

致谢

作者衷心感谢实验室成员在整个研究过程中提供的技术支持和有意义的讨论。我们感谢核心设施平台提供病理染色、转录组测序和分子实验的技术帮助。

覃增辉 | 郭庆军 | 张可 | 卢佳致 | 王杰贤 | 李梓俊 | 钟凌云 | 黄怡婷 | 李清 | 郑祥义 | 罗慧宇 | 赵龙英

南方医科大学公共卫生学院，国家药品监督管理局化妆品安全评价重点实验室，广东省热带病研究重点实验室，营养与食品卫生学系，广州市沙太南路1023-1026号，广东广州510515，中华人民共和国