奥地利马科动物肝炎相关病毒感染：一项覆盖全奥地利的马科动物调查

《EMI: Animal & Environment》：Hepatitis-associated virus infections in Austrian equids: A survey of equids sampled across Austria

　　

本研究旨在确定奥地利马科动物中马类肝炎病毒（equine hepacivirus, EqHV）、马细小病毒-肝炎（equine parvovirus-hepatitis, EqPV-H）、马乙型肝炎病毒（equid hepatitis B virus, EqHBV）和戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV）的（血清）流行率，并识别相关风险因素。在一项于2023年5月至2024年8月期间开展的横断面研究中，研究人员对586匹马科动物（583匹马和三头驴）进行了采样。通过qPCR/RT-qPCR分析血清样本，检测EqHV RNA、EqPV-H DNA和EqHBV DNA，并通过荧光素酶免疫沉淀系统（luciferase immunoprecipitation system, LIPS）检测EqHV和EqPV-H抗体。粪便样本经RT-qPCR检测HEV RNA，血清样本经ELISA筛查HEV抗体。研究人员通过广义估计方程（generalized estimating equations, GEE）的多元logistic回归评估风险因素。EqHV和EqPV-H的核酸流行率各占采样动物的不到3%，而血清流行率较高：EqHV为36.9%，EqPV-H为31.4%。未检测到EqHBV或HEV核酸；一匹马HEV血清阳性。马类肝炎病毒血清阳性与季节（春季、冬季）、咳嗽和EqPV-H合并血清阳性显著相关。对于EqPV-H，血清阳性与年龄较小（1-3岁）、季节（冬季）、特定地区、EqPV-H病毒血症和EqHV合并血清阳性显著相关。本次调查证实，EqHV和EqPV-H在奥地利马科动物中呈地方性流行，病毒血症发生率较低但血清阳性率较高。未检测到活动性EqHBV和HEV感染，表明其风险可忽略不计。上述结果强调，需要进行纵向研究以阐明传播途径，并调查EqHV和EqPV-H持续感染的临床意义。

奥地利马科动物肝炎相关病毒感染：一项覆盖全奥地利的马科动物调查

**研究背景**

马科动物的肝炎相关病毒主要包括马类肝炎病毒（equine hepacivirus, EqHV）、马细小病毒-肝炎（equine parvovirus-hepatitis, EqPV-H）和马乙型肝炎病毒（equid hepatitis B virus, EqHBV）。这些病毒感染通常与马匹的亚临床至轻度临床肝炎相关，其中EqHV还可导致持续性感染相关的严重慢性肝炎，EqHBV则与驴和斑马的慢性肝炎有关。戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV）在马科动物肝炎中的作用仍不明确。这些病毒在全球马科动物群体中广泛传播，但流行病学和传播动态仍有待深入研究。奥地利此前虽有针对EqHV和EqPV-H的研究，但受限于特定区域或住院马群，且多采用单变量分析，难以全面反映全国不同生态和管理条件下的病毒分布状况。EqHBV和HEV此前在奥地利马科动物中则完全未被调查。鉴于HEV具有人畜共患潜力以及EqHBV的新发病原特性，在奥地利马科动物群体中开展系统评估对准确的风险评估至关重要。

**研究设计与方法**

这是一项于2023年5月至2024年8月期间开展的横断面流行病学调查，采用便利抽样方式纳入586匹奥地利马科动物（583匹马和3头驴），覆盖全国169处马厩/农场。所有动物均为私人所有，由持照兽医在征得主人知情同意后实施临床检查和样本采集，并以2~8°C冷链运送至维也纳兽医大学实验室。研究人员从血清样本中提取核酸，通过逆转录定量PCR（RT-qPCR）检测EqHV RNA，通过探针法定量PCR（qPCR）检测EqPV-H DNA和EqHBV DNA，并利用荧光素酶免疫沉淀系统（LIPS）检测EqHV和EqPV-H抗体；粪便样本经处理后通过一步法RT-qPCR检测HEV RNA，血清样本采用商品化ELISA检测HEV抗体。数据分析采用R软件，以Clopper-Pearson精确法计算95%置信区间；风险因素评估使用带广义估计方程（GEE）的多变量logistic回归，以处理同一马厩个体间的聚集性；缺失数据通过链式方程多重插补（MICE）处理，并通过Rubin法则汇总各插补数据集参数估计。

**主要研究结果**

*EqHV与EqPV-H的核酸与抗体流行率*

EqHV RNA检出率为2.4%（14/586），EqPV-H DNA检出率为2.6%（15/586），两者均低于采样动物的3%。血清学阳性率则显著更高：EqHV抗体阳性率为36.9%，EqPV-H抗体阳性率为31.4%。三头驴中有两头检出EqPV-H抗体，其中一头同时为EqHV抗体阳性；所有驴均未检出两种病毒的核酸。活动性共感染（同时检出EqHV RNA和EqPV-H DNA）仅有2例（0.3%），两种抗体同时阳性的比例为20.1%。各采样区域普遍呈现低核酸流行率与高血清阳性率并存的特征。

*EqHBV和HEV的感染状态*

所有586份血清样本的EqHBV DNA检测均为阴性。529份粪便样本的HEV RNA检测全部为阴性；仅在586份血清中有一匹马呈HEV抗体阳性（S/P=101.86）。该马为来自布尔根兰州的一匹非运动骟马，夏季采样，无进口或运输史，全年放牧，同时为EqHV和EqPV-H血清阳性但核酸均为阴性。

*EqHV血清阳性风险因素*

多变量GEE逻辑回归显示，EqHV血清阳性与EqPV-H血清阳性显著相关（OR=2.8，95%CI: 1.80~4.37，p<0.001）。与秋季相比，冬季采样（OR=3.75）和春季采样（OR=3.65）的EqHV血清阳性风险显著升高。临床检查中出现咳嗽也与EqHV血清阳性相关（OR=2.35）。地区、海拔、运动用途、进口史、放牧同伴数量、EqPV-H病毒血症和国际运输频率未显示显著关联。

*EqPV-H血清阳性风险因素*

EqPV-H血清阳性与其自身病毒血症之间存在极强关联（OR=51.85，p=0.002），并与EqHV血清阳性显著正相关（OR=2.68）。在年龄方面，一岁马（1~2岁）和幼年马（2~3岁）的血清阳性几率分别是成年马（5~20岁）的4.85倍和4.97倍。地区差异上，克恩顿州（OR=5.12）、上奥地利州（OR=6.46）和福拉尔贝格州（OR=50.27）的血清阳性几率显著高于下奥地利州。冬季采样同样增加了EqPV-H血清阳性风险（OR=3.03）。其他临床体征、管理方式和运输因素未达到统计学显著性。

**讨论与结论**

本次全国性调查证实，EqHV和EqPV-H在奥地利马科动物中呈地方性流行，病毒血症率低而血清阳性率较高，符合这两种病毒的感染动力学特征：病毒血症期相对短暂，而抗体在感染后长期维持。冬季和春季较高的血清阳性可能与夏季感染高峰后的血清转化延迟有关；RNA阳性样本多在夏季采集，与吸血昆虫活跃季节吻合，提示虫媒机械传播的可能性，但尚不能确证。EqPV-H在幼年动物中血清阳性率更高，而20岁以上老年马病毒血症比例较高，提示可能存在持续性感染。EqHBV在奥地利马科动物中未发现活动性感染，符合其已知的宿主限制性；HEV在粪便和血清中均未检出核酸，仅一匹马为血清学阳性，表明该病毒在本群体中循环水平极低，健康风险可忽略不计。上述结果强调了开展纵向研究的必要性，以阐明传播途径（尤其是昆虫媒介的潜在作用）并评估EqHV和EqPV-H持续性感染的临床意义。该研究为理解这些病毒在奥地利马科动物中的传播动态和制定循证管理建议提供了重要的基线数据，论文发表于《EMI: Animal》。