抗LCN2抗体治疗与慢性肾脏病小鼠模型中听力损失减轻及血迷路屏障破坏减弱相关

《Journal of Molecular Histology》：Anti-LCN2 antibody treatment is associated with attenuated hearing loss and blood–labyrinth barrier disruption in a mouse model of chronic kidney disease

　　

摘要

慢性肾脏病（CKD）与感音神经性听力损失相关，但肾脏损伤与耳蜗功能障碍之间的关联机制尚未完全阐明。由于脂质体蛋白2（LCN2/NGAL）在CKD中显著升高，且被认为参与内皮功能障碍和屏障损伤，我们研究了LCN2是否在CKD小鼠模型中导致耳蜗损伤。雄性C57BL/6J小鼠接受5/6肾切除手术，CKD小鼠在手术完成一周后，每周三次注射抗LCN2单克隆抗体或同型对照，持续七周。采用听性脑于反应、畸变产物耳声发射、全片免疫荧光、FITC-右旋糖酐外渗、Western blot、定量PCR和激光多普勒血流测定来评估听觉功能、耳蜗形态学、血-迷路屏障完整性、耳蜗灌注及LCN2相关信号通路。CKD小鼠出现听性脑于反应阈值升高，在f2 = 8.0 kHz的单主音对下畸变产物耳声发射幅度降低，外毛细胞丢失，以及每个内毛细胞的CtBP2阳性突触前带状体斑点数减少。这些变化伴随血清和耳蜗LCN2升高，24p3R/SLC22A17和NLRP3上调，血-迷路屏障通透性增加，claudin-5和ZO-1表达降低，耳蜗血流受损，血管纹萎缩，以及血管纹离子转运基因表达下降。抗LCN2抗体治疗改善了听觉阈值和耳声发射反应，减轻了外毛细胞和突触损伤，减少了血管渗漏，部分恢复了紧密连接和离子转运基因表达，并改善了耳蜗灌注，但未显著降低血清尿素氮或肌酐。这些发现支持LCN2可能对CKD相关的耳蜗血管功能障碍和听力损失有所贡献。靶向LCN2可能成为CKD保护听力的治疗策略，但需在更多CKD模型、两性别及人体组织中进行验证。