TRIM22促进LDHA的K48连接泛素化，从而抑制HBV复制

《Journal of Translational Medicine》：TRIM22 promotes K48-linked ubiquitination of LDHA, leading to the inhibition of HBV replication

　　

摘要

背景

慢性乙型肝炎（CHB）仍然是全球重大的公共卫生挑战。三元结构基序蛋白22（TRIM22）是一种干扰素刺激基因，但其E3泛素连接酶活性是否参与调控HBV复制尚不清楚。越来越多的证据表明，乳酸脱氢酶A（LDHA）促进HBV复制，而抑制LDHA是一种有前景的针对HBV治疗的宿主导向抗病毒策略。

方法

收集208例CHB患者的血清样本，分析乳酸脱氢酶（LDH）水平与临床参数的相关性。使用GSE65359数据集，建立TRIM22过表达细胞模型。通过转录组测序、靶向代谢组学和Seahorse细胞外酸化速率（ECAR）分析评估TRIM22与糖酵解之间的关联。通过共免疫沉淀结合液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）筛选TRIM22的互作蛋白并进行验证。构建TRIM22结构域缺失突变体，结合MG132处理，验证LDHA的泛素-蛋白酶体降解过程，以及突变对RIG-I-MAVS通路和HBV标志物的影响。通过LDHA共转染和阿美洛昔进行治疗实验的功能挽救实验。此外，利用LDHA过表达评估其下游效应。

结果

临床分析显示，血清LDH水平与HBV病毒载量和肝损伤标志物均呈正相关。公共数据库分析显示，在CHB肝组织中，TRIM22与LDHA及乳酸转运体呈负相关。TRIM22过表达可削弱糖酵解并激活三羧酸循环（TCA循环）。ECAR分析证实TRIM22过表达抑制了糖酵解通量。LDHA被鉴定为TRIM22的新型互作蛋白。进一步实验证实，TRIM22通过其卷曲螺旋结构域与LDHA结合，并通过其RING结构域促进LDHA的K48连接泛素化。该降解过程抑制了HBV复制，并增强了视黄酸诱导基因I（RIG-I）-线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）通路的激活。转录组和功能研究进一步表明，LDHA过表达通过抑制RIG-I-MAVS通路促进HBV复制，可能通过下调C-C基序趋化因子配体3样1（CCL3L1）和C-C基序趋化因子配体24（CCL24）实现。

结论

我们的研究揭示了一种新型机制：TRIM22通过其RING结构域对LDHA进行泛素化修饰，从而抑制糖酵解通路并激活RIG-I-MAVS通路，最终抑制HBV复制。这为开发针对HBV的新型治疗策略提供了潜在基础。

图形摘要