《JOURNAL OF FOOD SCIENCE》：Dietary-Derived Corchorus olitorius L. Extract Suppresses KRAS-Mutant Pancreatic Cancer by Activating Ferritinophagy-Dependent Ferroptosis
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胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）是一种高度侵袭性恶性肿瘤，其特征是Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）频繁激活突变，且治疗选择有限。长蒴黄麻（Corchorus olitorius L.
胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）是一种高度侵袭性恶性肿瘤，其特征是Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）频繁激活突变，且治疗选择有限。长蒴黄麻（Corchorus olitorius L.）是一种在亚洲广泛食用的传统食用植物，具有已证实的抗炎特性；然而，其抗癌潜力仍不清楚。本研究探讨了长蒴黄麻叶提取物（COE）是否在KRAS突变胰腺癌细胞中诱导铁死亡。采用高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱法对COE的化学成分进行了表征。共鉴定出11种化合物，其中槲皮素-3-O-葡萄糖苷含量最高。在研究人员的研究中，KRASG12D突变的PANC1细胞比KRAS野生型BXPC3细胞表现出更强的铁死亡抵抗性。COE增加了活性氧（ROS）的产生和细胞内铁积累，同时抑制抗氧化防御，尤其是在KRAS突变的PANC1细胞中。机制上，COE增强了核受体辅激活因子4（NCOA4）介导的铁蛋白自噬，并下调KRAS和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达。在PANC1异种移植瘤中，口服COE显著抑制肿瘤生长并增加肿瘤组织内的铁积累。总之，COE通过破坏氧化还原稳态和激活铁蛋白自噬在KRAS突变胰腺癌中诱导铁死亡。这些发现支持COE作为KRAS驱动的PDAC的饮食来源治疗策略的潜力。
实际应用：长蒴黄麻叶提取物（COE）是一种常食用的食用植物，可作为具有潜在抗癌益处（尤其是针对KRAS突变胰腺癌）的功能性食品。通过破坏氧化平衡和铁代谢促进癌细胞死亡，COE可能代表一种有前景的基于食品的治疗策略。
论文解读：膳食来源长蒴黄麻提取物通过激活铁蛋白自噬依赖性铁死亡抑制KRAS突变胰腺癌
胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）是最常见的胰腺癌病理亚型，恶性程度极高，预后极差。超过90%的PDAC患者携带Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（Kirsten rat sarcoma viral oncogene homologue, KRAS）激活突变，该突变驱动肿瘤进展并对常规放化疗产生抵抗。铁死亡（ferroptosis）是一种铁依赖性、非凋亡性调节性细胞死亡，在RAS突变癌细胞中尤为活跃，但KRASG12D突变可抑制PDAC细胞铁死亡，促进肿瘤存活。铁蛋白自噬（ferritinophagy）是选择性降解铁蛋白的自噬过程，由核受体辅激活因子4（nuclear receptor coactivator 4, NCOA4）介导，在调节PDAC铁死亡易感性中发挥关键作用。长蒴黄麻（Corchorus olitorius L.）是亚洲广泛食用的绿叶蔬菜，具有抗炎等特性，但其抗癌机制尚不明确。本研究旨在探究长蒴黄麻叶提取物（COE）能否通过铁蛋白自噬依赖性铁死亡抑制KRAS突变胰腺癌，研究成果发表于《JOURNAL OF FOOD SCIENCE》。
研究人员采用高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）分析COE成分；以KRASG12D突变型PANC1细胞和KRAS野生型BxPC3细胞（均购自台湾生物资源收集与研究中心）为模型，通过细胞活力检测、活性氧（reactive oxygen species, ROS）测定、线粒体膜电位评估、丙二醛（malondialdehyde, MDA）与谷胱甘肽（glutathione, GSH）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GPX）水平检测、FerroOrange荧光探针检测Fe2+、蛋白质印迹（Western blotting）、免疫荧光共定位及实时定量PCR等方法考察机制；体内实验以BALB/c裸鼠皮下接种PANC1-荧光素酶（Luc）细胞，采用生物发光成像、苏木精-伊红（H&E）染色、普鲁士蓝染色和免疫组织化学等方法评估抑瘤效果。
研究结果包括以下几个部分：
COE生物活性成分鉴定：HPLC-ESI-MS/MS分析显示COE含11种化合物，其中槲皮素-3-O-葡萄糖苷（quercetin-3-O-glucoside, Q3G）和槲皮素-3-O-香豆酰葡萄糖苷最丰富，说明Q3G可能参与COE的抗癌活性。
BXPC3与PANC1细胞蛋白分析及细胞内Fe2+定位：Western blotting显示PANC1细胞KRAS和谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4, GPX4）表达显著高于BxPC3，而NCOA4和Fe2+水平较低，表明KRAS突变PANC1细胞具有铁死亡抵抗表型，适合作为研究模型。
COE诱导氧化应激、线粒体功能障碍和脂质过氧化：COE剂量依赖性地降低细胞活力，增加ROS产生、线粒体膜去极化和MDA含量，降低GPX活性和GSH水平，且对PANC1作用更显著；铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）可逆转COE导致的细胞死亡、ROS升高和MDA增加，证实COE通过铁死亡发挥细胞毒作用。
COE对细胞内铁定位及xCT/GPX4轴的影响：FerroOrange染色显示COE剂量依赖性增加PANC1细胞内Fe2+水平；Western blotting显示COE抑制胱氨酸/谷氨酸反转运体（xCT）和GPX4蛋白表达，提示COE削弱抗氧化防御并促进铁积累。
COE诱导NCOA4介导的铁蛋白自噬：免疫荧光显示COE增强NCOA4与溶酶体共定位；Western blotting显示COE促进铁蛋白重链（ferritin heavy chain, FTH）降解，并上调膜铁转运蛋白1（ferroportin-1, Fpn-1）和转铁蛋白受体（transferrin receptor, TFR）表达，表明COE激活铁蛋白自噬并加强铁动员。
COE对铁蛋白自噬相关信号的时间依赖性效应：COE剂量依赖性下调KRAS、核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2）和铁死亡抑制蛋白1（ferroptosis suppressor protein-1, FSP-1）表达；时间进程实验显示COE处理12小时后KRAS和GPX4下降，NCOA4升高；qPCR证实COE降低KRAS mRNA水平，说明KRAS下调部分发生在转录水平。
COE对PANC1-Luc异种移植瘤模型肿瘤生长的影响：生物发光成像和肿瘤体积测量显示，口服COE（125和250 mg/kg）显著抑制肿瘤生长，且呈剂量和时间依赖性。
COE体内抑制肿瘤生长并调节铁积累和GPX4表达：与对照组相比，COE组肿瘤重量和体积显著减小；组织学检查显示肿瘤结构破坏；普鲁士蓝染色显示铁沉积增加；免疫组织化学显示GPX4表达降低、TFR表达升高；Western blotting显示xCT降低、NCOA4增加、FTH降低，进一步验证了体内铁蛋白自噬和铁死亡的发生。
讨论与结论：COE通过同时破坏氧化还原平衡（增加ROS、抑制GSH-GPX4系统、下调xCT）和激活NCOA4介导的铁蛋白自噬（促进铁释放、增加不稳定铁池），在KRAS突变PDAC细胞中选择性诱导铁死亡。虽然Q3G是主要活性成分，但全提取物比单独Q3G具有更强的GSH消耗
