1-羟基芘通过MIF促进膀胱癌进展及肿瘤相关免疫抑制

《International Journal of Molecular Sciences》：1-Hydroxypyrene Promotes Bladder Cancer Progression and Tumor-Associated Immunosuppression via MIF

　　

摘要

本研究探讨了1-羟基芘（1-OHP）如何影响膀胱癌（BCa）的进展及肿瘤相关免疫抑制。利用公共转录组数据和靶点预测数据库筛选与1-OHP及BCa相关的靶点。随后采用机器学习方法缩小候选基因范围。此外，还通过分子对接和单细胞RNA测序对所选靶点及相关通路进行了考察。在体外实验中验证了主要靶点的作用。采用CCK-8、集落形成、EdU及Transwell实验评估细胞生长、迁移和侵袭能力。通过蛋白质印迹法检测蛋白表达。构建肿瘤细胞-CD8⁺ T细胞共培养体系，以评估CD8⁺ T细胞功能的变化。我们鉴定出1-OHP与BCa共享的29个靶点。机器学习进一步将这些靶点缩小至6个基因，并选取巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）进行实验验证。1-OHP处理后，BCa细胞的活力、增殖、迁移和侵袭能力均增加。沉默MIF部分逆转了这些效应。1-OHP还上调了MIF和CD74/CD44的表达，并增强了PI3K/AKT/mTOR信号通路。沉默MIF后，上述变化有所减轻。在共培养体系中，经1-OHP处理的BCa细胞降低了CD8⁺ T细胞的增殖和功能，Ki67、GZMB及IFNG水平均下降。敲低MIF部分逆转了这些变化。综上所述，我们的发现表明，1-OHP至少部分通过MIF依赖性机制促进膀胱癌进展和肿瘤相关免疫抑制。本研究将环境暴露与CD74/CD44–PI3K/AKT/mTOR轴的激活及CD8⁺ T细胞功能损伤联系起来，为环境相关膀胱癌发病的分子基础提供了新的见解。