摘要
乳杆菌是一种革兰氏阳性发酵细菌，被归类为“公认安全”（GRAS）食品添加剂。自2017年起，有报道称许多乳杆菌菌株能够形成细胞外囊泡。细胞外囊泡（EVs）是纳米级的球形双层膜结构，能够携带细胞质成分。细菌产生的EVs被认为是宿主菌与共生菌之间的重要媒介，但它们的生物学效应至今尚未得到广泛研究。EVs的纯化过程存在方法学上的困难：由于其纳米级大小，它们容易与培养基中的化合物一起被纯化出来，从而干扰其特性分析。本研究旨在获得高纯度的EVs并测定其理化性质。为此，我们开发了一种适合Lactiplantibacillus plantarum CIDCA 83114生长的合成培养基（MSM），并设计了一种用于浓缩和分离其EVs的方案。该培养基不含高分子化合物和表面活性剂，纯化步骤包括通过切向流过滤技术进行EVs的纯化。获得的EVs平均直径为110纳米±40纳米，具有负电荷（zeta potential）。它们的蛋白质含量约为100微克/毫升，且其蛋白质谱与培养基中不存在的蛋白质成分一致。EVs还含有RNA和少量DNA。我们的研究通过将传统的乳酸菌培养基（MRS）替换为合成培养基（MSM），改进了乳杆菌EVs的纯化工艺。MSM的设计使得能够获得高纯度的EVs并进行精确的表征。
